ON/2021 TP Géochimie Organique

Première
PYROLYSE ROCK-EVAL
MANIPULATION

I But
Etude qualitative et quantitative du contenu lipidique d'une matière organique. Il s'agit de déterminer :

S1 Les quantités d'hydrocarbures présents dans la

"Les composés hydrocarbonés libres" :
roche à l'état libre.

S2 Les quantités d'hydrocarbures provenant du

"Les composés hydrocarbonés potentiels" :
craquage du kérogène.

S3 Les quantités d'oxygène provenant de la pyrolyse du

"Les composés oxygénés"
kérogène.

Roche totale Gaz Huile Fraction pyrolisable Fraction résiduelle

HC. libre Kérogène
Matière organique Totale

II Principe de l’Analyse
II-1 Description du Matériel utilisé

II.1.1 Présentation du cycle d’analyse

La méthode utilisée a été mise au point par Espitalié et al. (1977). Elle consiste à analyser quantitativement
les composés hydrocarbonés et oxygénés (CO2) libérés par pyrolyse de la matière organique contenue dans
100 mg de sédiment sous atmosphère inerte (Helium) et en programmant la température de chauffe de
250°C à 550°C à raison de 25°C/min.

Au fur et à mesure de l'élévation de la température, l'enregistreur raccordé à l'appareil, donne un

thermogramme où sont enregistrés les pics suivants :

 Le pic P1 avec une surface S1 proportionnelle à la quantité des composés hydrocarbonés libres
contenu dans l'échantillon. Ces hydrocarbures sont libérés à des températures comprises entre
250 et 350°C.

 Le pic P2 dont la surface S2 est proportionnelle à la quantité de composés hydrocarbonés

potentiels, issus principalement du craquage thermique de la matière organique insoluble
(kérogène) et des composés polaires solubles dans les solvants organiques (résines et
asphaltènes), dans l'intervalle de température compris entre 300°C et 550°C.

 Le pic P3 dont la surface S3 est proportionnelle à la quantité des composés oxygénés (CO2),
libéré lors de l'oxydation du kérogène qui a été précédemment pyrolysé dans l'intervalle
de température compris entre 250 et 390°C pendant 3 minutes.

Analyse par pyrolyse Rock Eval 1/4

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L'appareil fourni également, la température à laquelle est libéré le maximum de composés hydrocarbonés
provenant du craquage du kérogène (température mesurée au sommet du pic P2 "Tmax").

Remarque:

Le cycle analytique est fixé dès le départ par l'opérateur, entre 250°C et 550°C, dans le cas des sédiments
évolués. Pour l'étude des sédiments peu évolués (sédiments récents), il faut travailler à une température
initiale comprise entre 150 et 200°C pour éviter les phénomènes de craquage précoce.

T2

T1
FID
HC Ti
T0
S2
S1
Four
Enregistreur S3

CO2

Piège à CO2 TCD

II.1.2 Description du mode de fonctionnement d’un RE

Le démarrage de l’appareil est marqué par le préchauffage du four pour atteindre la température de
début du cycle (Ti). A la fin du temps de préchauffage et d’initialisation, la nacelle passe dans le four,
l’élévation de la température provoque en première étape la libération de la fraction représentant les
hydrocarbures libres présents dans l'échantillon qui passe au détecteur à ionisation de flamme "FID" :
l'enregistreur donne alors le pic P1. Le circuit gazeux comprend, à ce stade, un piège à CO2 qui collecte la
quantité de CO2 libérée au cours de cette étape.

La deuxième phase de la programmation de température permet la pyrolyse du kérogène. Cette

pyrolyse fournit des composés hydrocarbonés et du CO2. Les composés hydrocarbonés en passant dans le
FID sont représentés dans le graphe par le pic P2.

A la fin de la deuxième phase, pendant le refroidissement du four de pyrolyse, le piège à CO2 d'origine
organique (rester à ce stade à la température ambiante) commence à chauffer. Le signal au niveau de
l'enregistreur provient donc directement du détecteur catarométrique à la place du signal qui provenait
initialement de l'électromètre. La partie représentative du CO2 d'origine organique, qui avait été

Analyse par pyrolyse Rock Eval 2/4

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immobilisée dans ce piège, est désorbée et entraînée dans la colonne analytique avant d'être détectée par
le cataromètre pour fournir le pic P3.

III Procédé Analytique

1) Vider la nacelle de son contenu pyrolysé (la manipuler avec soin à l'aide d'une pince métallique
appropriée).

2) Peser environs 100 mg de roche broyée.

3) Charger le Rock-Eval de la nacelle porteuse de l'échantillon à pyrolyser.

4) Démarrer un cycle analytique.

5) Porter les valeurs relatives aux paramètres Rock-Eval sur le tableau correspondant et interpréter.

IV Résultats et Interprétation
IV-1 Détermination des paramètres RE

A partir des pyrogrammes et des températures qui figurent sur chaque pic on peut calculer pour chaque
échantillon les valeurs correspondant à S1, S2, S3 et Tmax., en utilisant les valeurs correspondant à l'étalon.

Les teneurs en S1, S2 et S3 sont données en mg d'hydrocarbures par gramme de roche totale. Ces valeurs,
rapportées au carbone organique total C.O.T. (exprimé en mg/g de roche), permettent de calculer, aussi
bien l'index d'hydrogène IH (IH = S2/COT), que l'index d'oxygène IO (IO = S3/COT).

D'autres paramètres peuvent être calculés à partir de S1, S2 et S3 tel que :

 Le rapport S2/S3 : indicateur du degré d'anoxicité du milieu de dépôt de la

matière organique.

 L'index de production IP (IP = S1/S1+S2) : indicateur du degré de maturité de

la matière organique et qui pourrait renseigner, également, sur des
éventuels phénomènes de migration.

 Le potentiel pétrolier S1 +S2.

IV-2 Exploitation des différents paramètres

Porter sur un diagramme "IH/IO", contenant les lignées de références I, II et III (lignée I, relative à une
matière organique type alguaire; lignée II, relative à une matière organique type planctonique marine et
lignée III, relative à une matière organique type continentale ligneuse), les points représentatifs des
échantillons. La position des points pourrait donner des indications sur l'origine du matériel organique.

Porter sur un diagramme "IH/Tmax" les points représentatifs des échantillons. Ce diagramme comprend en
plus des trois lignées de référence de la matière organique, les courbes d'isoréflectance de la vitrinite

Analyse par pyrolyse Rock Eval 3/4

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(courbes IR = 0,5%, courbe IR = 1% et courbe IR = 2%). Ce qui permet d'indiquer le degré de maturité de
cette matière organique :

 Domaine de diagenèse (IR < O,5%) : matière organique immature,

 Domaine de catagenèse ou "fenêtre à huile" (0,5% < IR < 2%), dans ce domaine la courbe IR = 1,
sépare la zone de production des huiles liquides de la zone de production des gaz humides.

 Domaine de métagenèse ou de production des gaz sec (IR > 2%).

Représenter sur un même graphique, le log lithologique et les différentes valeurs des paramètres Rock-
Eval. Ceci permettra de dégager les variations de ces paramètres en fonction de la profondeur et des
variations lithologiques de la série étudiée.

Remarque :

Dans le cas de matière organique récente d'autres corrélations peuvent être utilisées (permettant de
donner une idée sur l'homogénéité et l'origine de la matière organique) tel que : S1/S2 - S1/COT - S2/COT.

Analyse par pyrolyse Rock Eval 4/4

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Deuxième
EXTRACTION DE LA FRACTION LIPIDIQUE LIBRE
MANIPULATION

I BUT
Il s'agit d'extraire au chloroforme la quantité d'hydrocarbures se trouvant à l'état libre dans la roche et de
déterminer son pourcentage en poids de roche totale.

II Principe de la Manipulation
II-1 Définitions
Phase A
L'extraction est l'ensemble des procédés mécaniques et physiques X
permettant de séparer les divers corps purs formant un mélange.
Elles permettent de réaliser le transfert d’un soluté X initialement
contenu dans une phase liquide A (ou solide), vers une phase B non X
Phase B
miscible avec le premier milieu. Le principe est fondé sur la
distribution du soluté entre les deux phases, en fonction de son
affinité pour chacune d’elles.

La polarisation moléculaire : lorsque dans une molécule les centres de gravité des charges (électrons-
noyaux) ne sont pas confondus, celle-ci possède un moment électrique:  (ou moment dipolaire). Ce
moment définit en quelque sorte l’énergie de liaison (de van der Waals). La constante diélectrique (),
définit la polarisabilité moléculaire (ou polarisation moléculaire) ; elle permet de se rendre compte de
l’affinité des solvants entre eux.

Les solvants dipolaires (par opposition aux solvants Constante diélectrique () de quelques
solvants
apolaires) sont définis comme les solvants qui ne possèdent
pas de moment électrique. Le caractère hydrophile ou H2O 80.4

hydrophobe se superpose assez bien avec la polarité. Les cyclohexane 2.0

solvants les plus polaires sont aussi les plus hydrophiles : dioxane 2.2
eau, ammoniac, alcools, acides, amines, ainsi que les tetrachlorure de C 2.2
cétones, les esters, et les esters-oxydes de polarité benzène 2.3
moyenne. toluène 2.4
Parmi les composés peu polaires se trouvent les diethylether 4.3
hydrocarbures halogénés ou nitrés. Selon la position et le chloroforme 4.8
nombre de substituants chlorés, la polarité peut être plus acétone 20.7
ou moins faible, ainsi le tétrachlorure de carbone et le
éthanol 24.3
sulfure de carbone sont apolaires. Les hydrocarbures
méthanol 33.6
aromatiques sont très légèrement polaires ; quant aux
hydrocarbures aliphatiques ou alicycliques, ils sont strictement apolaires.

Extraction de la fraction lipidique Libre 1/3

ON/2021 TP Géochimie Organique

II-2 Principes de base de l’extraction

L'extraction obéit aux principes suivants :

 Un solvant dissout bien un composé qui lui ressemble : "qui se ressemble s’assemble "

 Les solvants polaires et dissociants tels que l’eau dissolvent les composés ioniques et/ou
polaires hydrophiles.

 Les solvants apolaires et peu dissociants dissolvent les molécules et les composés hydrophobes
(solvants chlorés ou hydrocarbures)

Dans notre cas le but est d'extraire la fraction lipidique qui est composé essentiellement de composés
hydrocarbonés apolaires (ou très peu polaire). La dissolution de la fraction lipidique libre contenue dans un
sédiment est réalisée dans un solvant apolaire qui est le chloroforme (CHCl3).

III Procédé Analytique

1. 20g de roche broyée sont placés dans un bêcher de 1litre (forme haute) et additionnés d'un volume
de chloroforme dans les proportions de 10 ml/g de roche.

2. Introduire un barreau aimanté dans le bêcher et couvrir d'une coupelle contenant de l'eau qui
servira de réfrigérant. Placer le bêcher sur un agitateur magnétique chauffant. L'extraction est
conduite pendant une heure à la température de 50°C.

3. Placer un filtre de verre whatman sur le fond de la tulipe en verre fritté.

4. Monter la tulipe en verre sur une fiole à vide.

5. Verser le contenu du bêcher, par petites quantités sur le filtre.

6. Transvaser le filtrat (hydrocarbures libres et chloroforme) dans le ballon de l'évaporateur rotatif qui
servira à évaporer le chloroforme.

7. Le chloroforme est ainsi évaporé, l'échantillon est alors repris dans un faible volume de
chloroforme (10 ml au maximum) et déposé dans un tube à hémolyse tarée au préalable.

8. Le tube est ensuite laissé à l'air libre jusqu'à évaporation totale du solvant. Le poids de l'extrait
chloroformique total est déterminé par double pesée.

Extraction de la fraction lipidique Libre 2/3

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Eau
Réfrigérant

CHCl3
Chloroforme Echantillon
récupéré
Eau chauffée

Plaque chauffante

Filtration sous vide

Extraction Evaporation

IV Résultats et Interprétation

Les poids de la fraction de lipides libres (exprimés en milligramme par gramme de roche) des différents
échantillons sont portés sur le tableau des résultats sur lequel sont indiqués les teneurs en carbone
organique total.

Représenter sur un même graphique, le log lithologique et les teneurs correspondantes en extraits
chloroformiques (Ceci permettra de dégager les variations de ces paramètres en fonction de la profondeur
et des variations lithologiques de la série étudiée).

Représenter la variation des teneurs en extrait chloroformique en fonction des teneurs en carbone
organique total "Ext (%) = f (C.O.T. %)". Interpréter.

Corréler les teneurs en extraits choloroformiques et les paramètres du RE (données).

Extraction de la fraction lipidique Libre 3/3

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Troisième FRACTIONNEMENT DE L'EXTRAIT LIPIDIQUE PAR

MANIPULATION CHROMATOGRAPHIE EN PHASE LIQUIDE (C.P.L)

I Les composées hydrocarbonées contenus dans l’extrait lipidique

L’extrait lipidique est un mélange de composés hydrocarbonés (CHC) qui contient obligatoirement, de
l’hydrogène et du carbone dans leur structure moléculaire. Ces composées sont subdivisés en deux
catégories majeures : Les hydrocarbures (HC) et les "NSO compounds".

I-1 Les Hydrocarbures :

Les hydrocarbures sont constitués seulement par l’hydrogène et le carbone

I.1.1 Les hydrocarbures saturés (HCS):
 Les aliphatiques : Ces composants sont des hydrocarbures saturés caractérisés par une
formule générale de type CnH2n+2. Ils peuvent avoir la forme d’une chaîne linéaire, et ils
sont connus sous les noms n-alcane ou n-paraffine, ou d’une chaîne ramifiée, et ils sont
appelés iso-alcane ou iso-paraffine.
 Les cycliques ou les naphtènes: Ces hydrocarbures ont une formule générale de type
CnH2n ; ils contiennent des atomes de carbones disposés en cycle à liaison simple. Lorsque
la molécule contient deux cycles attachés, la formule générale serait de type CnH2n-2
I.1.2 Les Hydrocarbures insaturés

Dans ce groupe certaines molécules de carbones sont liées à trois atomes ou moins ; ce qui implique
l’existence des liaisons doubles et triples.

On distingue trois sous-groupes

 Les alcènes: Les alcènes, ont une formule générale de type CnH2n et contiennent
obligatoirement une et une seule double liaison dans leur chaîne. Le plus simple des
alcènes est l’éthylène, avec deux atomes de carbones joints par une double liaison.
 Les diènes : Ce sont des hydrocarbures insaturés de formule générale CnH2n-2 ayant deux
doubles liaisons carbone-carbone.
 Les acétylènes :C’est une autre forme d’hydrocarbures insaturés de formule générale
CnH2n-2 et comportant une triple liaison carbone-carbone.
I.1.3 Les aromatiques (HCA):

C’est une classe spéciale des insaturés comportant au moins un noyau benzoïque.
I-2 Les "NSO compounds" :

Ce sont des composants du pétrole qui contient, outre l’hydrogène et le carbone, d’autres atomes,
généralement l’azote (N), le soufre (S) et l’oxygène (O).

 Les asphaltènes :

Fractionnement de l'extrait lipidique 1/3

ON/2021 TP Géochimie Organique

Ils sont définis comme étant la fraction qui précipite dans les alcanes légers, tels que le pentane,
l’hexane et l’heptane. Ils sont solubles dans les solvants aromatiques tels que le toluène et le benzène. Ce
sont des composants lourds et polaires.

Les asphaltènes sont composées de noyaux aromatiques et/ou naphténiques, parfois liés à des chaînes
aliphatiques de longueurs variables.
 Les résines :

C’est la fraction soluble dans les alcanes légers tels que le pentane et l’heptane, et insoluble dans le
propane liquide. Comme les asphaltènes ces composés sont lourds et polaires mais moins lourds que
les asphaltènes.

II Fractionnement de l’extrait lipidique par chromatographie en

phase liquide (CPL):
II-1 But

Il s'agit de séparer les différents composés hydrocarbonés contenus dans l'extrait chloroformique
total.
II-2 Principe de la manipulation

La chromatographie liquide-solide est basée sur la répartition des solutés entre une phase fixe et une phase
mobile. Chacun des solutés est soumis à une force de rétention (par adsorption) et une force
d'entraînement par la phase mobile. L'équilibre qui en résulte aboutit à une migration différentielle des
solutés de l'échantillon à analyser, ce qui permet leur séparation.
II-3 Définitions :

Phase stationnaire : est un support dont la surface est active par

Eluan
nature (silice, alumine, florisil, carbone, polymères poreux). Les solutés t
y sont retenus essentiellement par adsorption. Actuellement, la silice Phase
stationnair
est encore la phase (polaire) non greffée la plus utilisée. Elle est e
surtout utilisée pour l’adsorption de composés polaires dissous dans
des solvants peu polaires.

La phase stationnaire solide (adsorbante) contenue dans la colonne

retient donc sélectivement les composés désirés. Ceux-ci sont ensuite
élués (désorbés) avec un petit volume de solvant.

La phase mobile : utilisé pour la désorption et l’entraînement du soluté préalablement fixé par la phase
stationnaire. Dans la CPL, la phase mobile est un solvant appelé aussi éluant.

L'adsorption : C'est la fixation des molécules dissoutes par la phase solide. Cette fixation est due à
l'établissement de liaisons secondaires de surface entre l'adsorbant et la molécule adsorbée : liaison dipôle-
ion ou dipôle-dipôle ou liaison de Van der Waals.
II-4 Principe de base de la séparation Liquide solide

Fractionnement de l'extrait lipidique 2/3

ON/2021 TP Géochimie Organique

L’extraction proprement dite s’effectue par rétention du soluté sur un support solide approprié. Les
mécanismes de cette rétention sont les mêmes que ceux rencontrés en chromatographie liquide classique.
Le solvant contenant le soluté à séparer joue le rôle de phase mobile, la rétention étant fonction de
l’affinité du soluté respectivement pour la phase solide et la phase liquide (solvant).

La silice (SiO2 ) ou gel de silice, (silice plus ou moins hydratée (4% H2O), provenant de la déshydratation de
l’acide silicique) se présente sous forme d’une poudre blanche de très fine granulométrie.
II-5 Principales Etapes de l'extraction liquide- solide

préparation de la colonne pour recevoir l’échantillon liquide à

1 Conditionnement
analyser ;

2 Introduction de l’échantillon l'échantillon est déposé sur la colonne ;

désorption sélective (ou spécifique) du soluté, au moyen d’un

3 Elution
solvant approprié ;

4 (régénération) de la colonne si possible et si nécessaire.

Dans le cas de la séparation des différentes fractions des composées lipidiques la phase solide, silice,
remplit une colonne ; l’échantillon, en solution concentré est déposé en haut de la colonne. Les sites actifs
caractérisant le gel de silice adsorbent les composées modérément polaires. La séparation des composants
résulte de l’écoulement continu d’un éluant traversant la colonne par gravité. Généralement on augmente
la polarité de l’éluant de façon à désorber les composés les moins polaire au début et les composants les
plus polaires à la fin.

Ces composés sont alors élués en utilisant des solvants de différentes polarités :
 L'hexane (apolaire) permettra de véhiculer la fraction saturée (apolaire aussi) contenue
dans l'extrait lipidique jusqu'à la partie inférieure de la colonne ;
 Le mélange hexane + chloroforme (légèrement polaire) permettra de véhiculer en
second lieu les hydrocarbures aromatiques (qui sont légèrement polaire) ;
 La troisième fraction (la plus polaire) reste fixée dans la colonne, adsorbée sur la silice.

III Procédé Analytique

III-1 Préparation de la colonne de silice

La silice est nettoyée avec le cyclohexane et le dichlorométhane. Une fois les solvants évaporés, elle est
conditionnée sous vide à 140°C pendant 1 heure. La silice utilisée est le gel de silice Davison 100/200 mesh.

La colonne utilisée est une pipette pasteur : c'est un tube de verre de 0,5 cm de diamètre et de 10 cm de
long, effilée à l'une de ses extrémités.

Avant d'introduire la silice dans le tube, on introduit un petit morceau de laine de verre pour empêcher la
silice de sortir par l'extrémité effilée. On ne doit pas tasser la laine de verre pour ne pas freiner l'élution des
hydrocarbures.
III-2 Elution des Hydrocarbures Saturés et Aromatiques

L'extrait chloroformique, de poids connu, est repris dans une petite quantité de chloroforme (de volume v :
quelques gouttes), puis déposé sur la colonne de silice préalablement imbibée par un volume V de hexane.

Fractionnement de l'extrait lipidique 3/3

ON/2021 TP Géochimie Organique

HCA + NSO NSO

Echantillon Elution
Elution par
déposé à la par
l'hexane
surface de la l'hexane
colonne HCS + CHCl3
Colonne
HCA
imprégnée
d'Hexane

Les hydrocarbures saturés sont élués au début avec un volume d'hexane égal à 1,5V ; les hydrocarbures
aromatiques sont ensuite élués par un mélange hexane / chloroforme dans les proportions 2/3-1/3. Ces
deux fractions sont recueillies dans des tubes en verres préalablement tarés. Le poids des hydrocarbures
saturés (HCS) et aromatiques (HCA) est déterminé après évaporation du solvant. Les composés polaires
(NSO compound) sont fixés par la colonne de silice et leur poids est déterminé par différence :

Poids NSO = poids extrait chloroformique total - (Poids HCS + Poids HCA).

IV Résultats et Interprétation
Les pourcentages en poids de chaque fraction constituant l'extrait chloroformique étant calculé, ils sont
portés sur le tableau des résultats.

Porter les points sur un digramme ternaire (Sat-Arom-NSO), chaque échantillon d'extrait chloroformique
est représenté par les pourcentages relatifs de ses composants. Cette représentation permet de ressortir la
prédominance ou non des hydrocarbures par rapport aux composés polaires ce qui témoignerait du degré
de maturité (élevé ou faible) de la matière organique. Elle permet, également, de distinguer la fraction
prépondérante.

TABLEAU DES RESULTATS

Réf COT P Extrait P tube vide P tube + P HCS P tube vide P tube + P HCA P NSO
total HCS HCA

V Remarques :

Fractionnement de l'extrait lipidique 4/3

ON/2021 TP Géochimie Organique

La technique de chromatographie en phase liquide permet la séparation de l’extrait chlorophormique en

trois fractions. Il existe d’autre techniques permettent de fractionner encore plus le mélange de composés
hydrocarbonées. Par exemple la "SARA separation" qu’on applique surtout lors de l’étude du pétrole,
permet d’avoir quatre fractions les Saturés, les Aromatiques, les Résines et les Asphaltènes.

Le procède expérimentale de la "SARA separation" consiste à séparer l’asphaltène et éventuellement les

composés inorganiques des autres composants connus sous le nom de maltènes. Les maltènes vont être à
leur tour fractionner par CPL en HCS, HCA et résines.
Description du désasphaltage :

L’échantillon, dont le poids est de l’ordre de 1g, est traitée par le n-heptane chaud, il subi ensuite l’agitation
par un agitateur magnétique.

La matière insoluble consistant principalement en asphaltène et éventuellement en matière inorganique

sont séparés par filtration sous vide de trompe à eau, en utilisant un filtre de porosité égale à 0.45 µm.

L’évaporateur rotatif permet la récupération du n-heptane. Les maltènes sont ensuite asséchés
définitivement. Ces maltènes vont être ensuite fractionnés par CPL.

Pour isoler les asphaltènes des composés inorganiques, on rince le papier filtre par du toluène chaud alors
qu'il est encore dans le dispositif de filtration ;

Le poids des sédiments est déterminé par la différence entre le poids du papier filtre et le poids du papier
filtre contenant le sédiment après l’avoir séché à l’étuve.

Le toluène est récupéré grâce à un évaporateur rotatif. L’asphaltène est ensuite asséché.

Fractionnement de l'extrait lipidique 5/3

ON/2021 TP Géochimie Organique

4ème ANALYSE PAR CHROMATOGRAPHIE EN PHASE

MANIPULATION GASEUSE (C. P. G.)

I But
Il s'agit d'identifier les pics des n-alcanes et de déterminer la quantité relative de chaque n-alcane. La même
manipulation peut être effectuée pour la fraction aromatique.

II Principe de la manipulation
II-1 Composition d’un chromatographe

Un appareil de CPG correspond schématiquement à la réunion de différents modules spécialisés :

l'injecteur, la colonne et le détecteur, réunis dans un bâti unique.

Comme la CPL, le principe de séparation par CPG est basé sur le partage de l'échantillon entre deux phases
l'une est stationnaire, l'autre est mobile. Dans ce cas la phase mobile est un gaz appelé gaz vecteur ou gaz
porteur, il est constitué de He, de N2 ou de H2.

Les injecteurs :

Le système d'injection permet l'introduction de l'échantillon dans le

chromatographe, par l'intermédiaire d'une seringue.

C'est dans l'injecteur que l'échantillon est vaporisé et transféré dans

la colonne chromatographique.

Parmi les injecteurs classiques, l'injecteur diviseur est le plus utilisé

dans le cas d'un échantillon en solution. Celui-ci est introduit avec une
micro-seringue. Un système de vannes élimine une partie de
l'échantillon (en fonction du mode d'injection) et permet ainsi une analyse plus précise d'une certaine
quantité de produit sans surcharge de la colonne.

Les Colonnes :

La colonne est l'organe principal d'un chromatographe; elle est

constituée d'un tube généralement métallique, elle est enroulée sous
une forme hélicoïdale, reliée à l'injecteur à l'une de ses extrémités et
au détecteur à l'autre bout. Elle est disposée dans un four muni d'un
système de régulation de température.

On utilise deux types de colonnes :

Types de colonnes Caractéristiques

Colonnes remplies Ces colonnes sont utilisées pour l'analyse de gaz, elles sont généralement
constituées d'un tube en métal de diamètre intérieur de 2 à 4 mm et de longueur 1
à 6 m, rempli d'un granulé poreux

Fractionnement de l'extrait lipidique 1/3

ON/2021 TP Géochimie Organique

Colonnes capillaires Ce sont des colonnes à très faible diamètre (0,1 à 0,35 mm) fabriquées à partir de
silice pure. La phase stationnaire est déposée sous la forme d'un film régulier
(d'épaisseur 0,1 à 5 µm). Leur diamètre intérieur varie entre 0,05 et 0,6 mm pour
une longueur de 10 à 100 m. Ces colonnes présentent une grande efficacité, un
faible débit et une faible capacité d'échantillon.

Les détecteurs :

Le détecteur est un appareil de mesure physico-chimique qui doit

donner un signal au passage de chaque constituant, sans
interaction avec le gaz vecteur. Le plus usuel des détecteurs en
analyse organique est le détecteur à ionisation de flamme (FID).

Le principe de FID est de brûler, dans une flamme d'hydrogène et

d'air, les composants du courant gazeux issus de la colonne.

Cette combustion produit des ions et des particules chargées qui

seront collectées par 2 électrodes, entre lesquelles on applique
une différence de potentiel. Il en résulte un courant électrique recueilli par un électromètre capable de le
convertir en une tension mesurable qui va être enregistrée sous forme d'un signal (pic), l'ensemble des pics
forme un chromatogramme.

Plusieurs types de détecteurs sont disponibles les plus courants sont représentés dans le tableau suivant :

Type de détecteur Utilisation

Détecteur à ionisation de flamme (FID) Détecteur universel pour tous les composés organiques
Pour les composés contenant un atome de N ou P
Détecteur thermo-ionique (NPD) ou azote-
phosphore

Détecteur à capture d'électrons (ECD) Pour les composés halogénés et les noyaux aromatiques
(adapté aux composés électrophiles)
II-2 Mécanisme de fonctionnement d'un chromatographe

On injecte, à l'aide d'une microseringue, l'échantillon liquide, solide ou gazeux que l'on veut analyser. Le
gaz vecteur (phase mobile) permet de volatiliser et d'éluer l'échantillon. Le gaz alors obtenu, monte à une
vitesse variable, selon sa composition, dans une colonne, et est analysé à sa sortie.

L'étape séparative est réalisée sur une colonne contenant une phase stationnaire, dont la température est
régulée. Les différents constituants de l'échantillon se répartissent entre la phase stationnaire et la phase
mobile. Les constituants qui ont le plus d'affinité pour la phase stationnaire y séjourneront plus longtemps
et atteindront donc le détecteur plus tardivement.

Fractionnement de l'extrait lipidique 2/3

ON/2021 TP Géochimie Organique

Le temps écoulé entre l’instant où l’échantillon est injecté et celui où le pic correspond à un composé
atteint sa valeur maximale est appelé temps de rétention.

III Procédé Analytique

La fraction d'hydrocarbures saturés est d'abord dissoute avec l'hexane dans les proportions de 10 µl/mg de
produit.

On injecte ensuite entre 1 et 10 µl de ce produit.

IV Résultats et Interprétation
Sur les chromatogrammes obtenus, les pics correspondants aux n-alcanes sont identifiés par comparaison
de leur position sur le chromatogramme à celle des pics des iso-alcanes (pristane Pr. et phytane Ph.).

La quantité relative de chaque n-alcane est déterminée par mesure de la hauteur du pic correspondant.

Déterminer les n-alcanes existant dans le chromatogramme. Quel est le mode de répartition de ces n-
alcanes (distribution unimodale ou distribution bimodale) ?

Notez-vous la présence d'UCM ?

Calculer l'indice d'imparité CPI des n-alcanes en utilisant la formule suivante:

Calculez les rapports nC17/nC18, Pr/nC17 et Ph/nC18.

Représentez ces valeurs sur le diagramme de waples.

Interprétez.

Fractionnement de l'extrait lipidique 3/3