dossier
SOMMAIRE
Quels besoins de recherche et développement ? | Page 6
Focus : Emmanuel Lemazurier, Direction scientifique | Page 7
Quel impact de REACh sur les substances chimiques ? | Page 8
Focus : Patricia Rotureau, Unité Procédés et Énergies Propres
et Sûrs | Page 9
Des analyses socio-économiques en mal de recherches | Page 9
Focus : Alexandre Péry, Unité Modèles pour l’Écotoxicologie
et la Toxicologie | Page 10
L’INERIS, partenaire de la plate-forme pour le développement
des méthodes alternatives | Page 10
Focus : Selim Aït-Aïssa, Unité Écotoxicologie in vitro et in vivo | Page 11
Un équipement dédié à la toxicologie environnementale | Page 11
INERIS | Le magazine | DÉCEMBRE 2008 | #22 | 5
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Reach, QUELS ENJEUX POUR LA RECHERCHE ?
L
a réglementation REACh renferme trois dans le cadre du Forum d’Echange d’Information
leviers de développement de la recher- sur les Substances (FEIS) et, surtout, la validation
che dans le champ des thématiques et le développement de méthodes alternatives à
couvertes par les sciences du vivant. En l’expérimentation animale.
premier lieu, la législation européenne Un troisième axe de recherche découle de l’as-
appelle à un renforcement des moyens humains similation des substances dites « de niveau de
et techniques pour répondre aux enjeux que sous- préoccupation équivalent » aux substances sou-
tendent l’enregistrement progressif sur onze ans mises à autorisation, c’est-à-dire les substances
de trente mille substances chimiques fabriquées Cancérigènes, Mutagènes, Reprotoxiques (CMR),
ou importées dans l’Union européenne (dans des les substances Persistantes, Bio-accumulables,
quantités supérieures à une tonne/an telles quelles Toxiques (PBT), les Polluants Organiques Persistants
ou contenues dans des préparations) et l’autori- (POPs) et les substances très persistantes et très Modélisation de la structure moléculaire
sation de mille cinq cents substances classées bio-accumulables (vPvB). « On sait ce qu’est une de l’acide salicylique pour la dérivation d’un
très préoccupantes en raison des risques qu’elles substance CMR ou une substance PBT parce qu’on modèle QSAR qui exprime une corrélation
représentent pour l’homme et les écosystèmes. dispose des critères d’effet telle que la toxicité entre l’activité des molécules et leur
Or, les informations relatives à la toxicité de 86 % chronique ou aiguë pour les identifier, observe Éric structure physico-chimique.
des produits chimiques actuellement sur le marché Thybaud, responsable du Pôle Dangers et impact
sont insuffisantes voire inexistantes. sur le vivant de la Direction des risques chroniques domaine d’application dépendent de la compo-
Au-delà de ce changement d’échelle, REACh véhi- de l’INERIS, en revanche on ne sait pas ce qu’est sition du jeu d’apprentissage utilisé pour calibrer
cule la volonté clairement affichée de limiter au une substance “à niveau de préoccupation équi- le modèle, explique Enrico Mombelli, ingénieur à
maximum les essais in vivo sur les animaux ver- valent”. Seuls les perturbateurs endocriniens ont la Direction des risques chroniques. La conformité
tébrés. Cette orientation éthique implique, selon la été mentionnés. On a donc besoin de définir des aux critères de l’OCDE n’est possible que pour une
volonté exprimée par les législateurs européens, le critères adéquats, ce qui implique d’engager des minorité des modèles ; la définition rigoureuse du
partage des données scientifiques par les industriels recherches spécifiques. » domaine d’application du modèle est primordiale
pour une correcte interprétation des résultats ;
| Quels besoins de recherche Vers le développement enfin, dans leur quasi-totalité les modèles QSAR
des méthodes in silico disponibles ne peuvent pas modéliser la toxicité
et développement ? | Résultante de ces trois leviers, REACh appelle une des mélanges chimiques. »
P
ar son caractère volontariste, la démarche forte mobilisation des compétences en toxicologie L’approche numérique extrapolée à différents
de l’Union européenne implique d’impor- et en écotoxicologie pour concourir au développe- niveaux d’organisation biologique, de la cellule
tants efforts de recherche et de dévelop- ment de méthodes d’essais d’apparition récente, jusqu’à l’organisme entier, représente une voie de
pement pour répondre aux objectifs de REACh : jusqu’à présent peu usitées voire non reconnues par recherche fortement investie par les toxicologues
réduction de l’impact des substances chimiques la réglementation. « Conséquence de la limitation car, elle seule peut rendre compte de la complexité
sur la santé humaine et les écosystèmes, évolution des ressources, mais aussi des problèmes éthiques des mécanismes impliqués et des effets toxiques
des méthodes d’évaluation des effets physico- et des contraintes économiques, les recherches induits par les relations dose-réponse à l’intérieur
chimiques et biologiques de ces substances, doivent mettre l’accent sur de nouveaux outils de d’un système vivant.
mutation de l’industrie chimique. toxicologie prédictive, souligne Philippe Hubert, Les approches de toxicologie prédictive in silico ont
Afin de définir avec pertinence les projets de Directeur des risques chroniques. En particulier pour particularité de pouvoir être associées entre
recherche qu’elle est appelée à soutenir dans ce
dans deux domaines : les techniques in vitro qui elles. « Les paramètres physico-chimiques des
contexte, l’ANR (Agence Nationale de la Recher-
reposent sur l’utilisation de cultures cellulaires ou modèles pharmacocinétiques à fondement phy-
che) a mis en place un consortium de dix-huit
de fractions subcellulaires ; et les techniques de siologique, modèles PBPK*, peuvent être estimés
partenaires représentant la communauté scien-
modélisation numérique in silico telles que les outils à partir de modèles QSAR, note Alexandre Péry,
tifique, des organismes publics - dont l’INERIS -
QSAR et les modèles de toxicocinétique. » responsable de l’Unité Modèles pour l’Écotoxico-
et l’industrie.
Les Stratégies de Test Intégrées (STI) que préconise logie et la Toxicologie. Outre les QSAR, la modéli-
Cet « Atelier de réflexion prospective » (PRO-
le règlement REACh font une place importante aux sation tirera également bénéfice de l’intégration
REACh), que coordonne l’INERIS, a mis en place
cinq groupes de travail dont trois s’intéressent aux
QSAR (Quantitative Structure Activity Relationships) de la toxicogénomique qui étudie la réponse des
méthodes alternatives et aux besoins en recher-
susceptibles de réduire d’un facteur 3 à 4 le recours gènes et des protéines à l’exposition à un composé
che liés à l’innovation chimique tandis que deux à l’expérimentation animale s’ils sont utilisés pour chimique se comportant comme un stresseur
autres groupes travaillent sur l’acceptabilité sociale évaluer la toxicité des substances chimiques. L’ob- toxique de la cellule. Il est également possible, et
et économique de la nouvelle réglementation et jectif de la modélisation QSAR est de prédire par des même nécessaire, d’imbriquer plusieurs modèles
sur l’accélération des modalités de validation des méthodes statistiques les effets biologiques d’une pharmacocinétiques à fondement physiologique
méthodes d’évaluation. variation de la structure moléculaire provoqués par afin de représenter la distribution d’un produit
Après avoir dressé un état des lieux, chaque un produit toxique en fonction de ses propriétés xénobiotique dans les compartiments du corps
groupe de travail remettra ses préconisations à physico-chimiques. Cependant, comme l’ont mon- humain ayant un rôle physiologique important
l’ANR au terme de la seconde année d’existence tré les travaux d’évaluation des logiciels existants, (cerveau, poumons, foie, rein, sang, …) à partir des
de l’atelier PRO-REACh. l’approche QSAR connaît actuellement un certain
nombre de limites : « Leur pouvoir prédictif et leur | suite page 8 |
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Emmanuel Lemazurier, chef de projet, Direction scientifique
« Une nouvelle méthode in vitro pour tester
la reprotoxicité des molécules chimiques »
U
ne première étape vient d’être maintien de
franchie vers la mise au point d’une la spermato-
méthode alternative in vitro pour génèse - selon
l’étude des effets des perturbateurs de la le modèle
fonction endocrinienne. Ces travaux engagés retenu.
en 2007 en collaboration entre l’INERIS,
l’INRA (Tours/Nouzilly) et l’Unité mixte 566 Comparer les méthodes
(Inserm-CEA-Université Paris VII), ont permis L’objectif de ce programme de recherche,
dans un premier temps de valider la mor- qui fera l’objet d’une soutenance de thèse,
phologie et la fonctionnalité de la barrière est de concevoir un test permettant de
hémato-testiculaire, créée in vitro, à partir vérifier la capacité d’une molécule à carac-
de cellules testiculaires de rat. tère perturbateur endocrinien à franchir la
Le rôle de la barrière hémato-testiculaire barrière hémato-testiculaire, à fragiliser les
(BHT) est primordial pour la défense des jonctions intra-cellulaires qui participent
tubules séminifères, siège de la production à la défense des testicules et d’identifier
des spermatozoïdes chez le mâle, face aux sa toxicité potentielle sur les cellules ger-
agressions extérieures, notamment celle des minales.
xénobiotiques ou des perturbateurs endocri- Ce travail s’achèvera par l’inter-comparai-
niens véhiculés par le sang. Cette barrière son entre les méthodes in vivo qui sont
épithéliale se compose de trois compar- actuellement les seules à être reconnues
timents cellulaires : interstitiel, basal et par les autorités compétentes pour tester la
apical. L’objet initial de cette recherche était reprotoxicité d’une substance chimique, et
de reproduire ce système de protection en ce modèle de BHT in vitro. Des publications
conditions in vitro à partir de cellules primai- dans des revues scientifiques à comité de
res de rat cultivées en chambre bicamérale lecture et une soumission aux instances
dans une matrice extracellulaire artificielle. internationales permettront d’en valider
La correspondance entre la morphologie de les résultats. À terme, cette méthode com-
la BHT in vivo et l’organisation du système plémentaire et alternative à l’expérimen-
cellulaire obtenu in vitro ayant été validée, tation animale pourra être utilisée par les
les travaux se sont poursuivis par le test de industriels pour évaluer la reprotoxicité des
la fonctionnalité de la culture - présence molécules qu’ils conçoivent.
des jonctions des cellules sertoliennes,
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Reach, QUELS ENJEUX POUR LA RECHERCHE ?
réseau ANTIOPES (Analyse intégrée pour la toxi- sur les installations expérimentales de l’INERIS
cologie prédictive en santé environnementale). et les laboratoires de l’Université de Technologie
Formé d’équipes aux compétences complémen- de Compiègne (UTC), de l’Université de Picardie
taires couvrant les champs des méthodes in vivo, Jules Verne (UPJV) et de l’Institut Polytechnique
in vitro et in silico, ce réseau - officiellement créé LaSalle Beauvais.
le 8 février 2008 - rassemble des organismes Depuis 2007, l’INERIS co-anime également le
publics (Inserm, INRA, CEA, INERIS, CNRS), des réseau ERICHE (Évaluer et Réduire l’Impact de
universités (Paris VII, Marseille), des écoles (Institut la Chimie sur l’Environnement), l’un des quatre
Polytechnique LaSalle Beauvais) et l’AFSSAPS. réseaux de recherche mis en place sous l’égide du
L’objectif global est de travailler aux couplages programme CPDD (Chimie Pour le Développement
des méthodes d’évaluation en utilisant l’approche Durable) que pilote le CNRS. « L’idée qui a prévalu
in vivo non plus comme un outil de test mais est de fournir aux chimistes, dès le démarrage de
comme un outil de consolidation des méthodes la phase de conception d’une nouvelle molécule,
in vitro. « Les partenaires d’ANTIOPES ont défini des outils d’évaluation qui leur permettront d’en
quatre axes de recherche : le criblage in vitro connaître les dangers potentiels pour les milieux
différentes voies d’exposition, et d’en déterminer de biomarqueurs, la validation/qualification des biologiques et environnementaux », explique
les effets et les biotransformations.» biomarqueurs identifiés in vitro, la modélisation in Éric Thybaud.
Plus globalement, « le défi lancé par REACh contri- silico en biologie systémique, le développement Dans cet objectif, ERICHE met en relation deux
bue au rapprochement des techniques qu’utilise de modèles bio-artificiels », annonce Emmanuel cent quarante chercheurs répartis en cinquante et
la biologie pour concevoir de nouveaux outils de Lemazurier, chef de projet à la Direction scientifique une équipes dont vingt spécialisées en écotoxi-
toxicologie prédictive », souligne Philippe Hubert. de l’INERIS et secrétaire du réseau. cologie. Parmi les sept sujets de thèse pluridisci-
Si les méthodes in vivo sont aujourd’hui standar- Dès à présent, ANTIOPES a vocation à répondre plinaire sélectionnés par le comité de pilotage,
disées, elles devront évoluer et notamment être aux nouveaux appels à proposition de l’ANR et du deux sont soutenus par l’INERIS en coopération
associées à l’approche in vitro et à la simulation Plan National de Recherche sur les Perturbateurs avec l’Inserm et le Laboratoire HydroSciences
statistique afin d’optimiser les plans d’expérience Endocriniens. Les chercheurs bénéficieront de la de Montpellier. Comme l’ont prévu les organi-
pour n’utiliser que le nombre minimum d’animaux. mutualisation des équipements existants ainsi sateurs du réseau, des rencontres permettent
Des travaux sur de tels couplages vont être lan- que de la future plate-forme d’expérimentation aux chercheurs des différentes disciplines de se
cés dans un avenir proche par les chercheurs en ANIMEX conçue par l’INERIS et l’Institut Polytech- réunir chaque année. Un colloque de restitution
toxicologie et écotoxicologie du pôle Dangers et nique LaSalle Beauvais. s’est ainsi déroulé du 29 septembre au 4 octobre
impact sur le vivant récemment créé au sein de Cet objectif de mutualisation des moyens et de 2008, couplé à une Action Nationale de For-
la Direction des risques chroniques. regroupement de compétences multidisciplinaires mation intitulée « L’écotoxicologie, définition,
pour satisfaire les besoins de la Recherche française domaine, objectifs ». Ouverte aux chimistes et
Mutualisation des moyens en toxicologie et en écotoxicologie a conduit l’INERIS aux biologistes, cette session visait à mieux
et des compétences à prendre l’initiative d’un pôle national applicatif en leur faire appréhender le rôle, les objectifs et
Pour faire face aux défis de la toxicologie environ- sud-Picardie. Réponse aux enjeux de REACh et aux les méthodologies de l’écotoxicologie.
nementale et au développement inéluctable des recommandations du Grenelle de l’Environnement
* Physiologically Based PharmacoKinetic
méthodes alternatives à l’expérimentation animale, qui prônait la constitution d’au moins un pôle de
l’INERIS a contribué dès 2006 à la constitution du ce genre en France, cette structure sera articulée
| Quel impact de REACh sur les substances chimiques ? |
A
fin d’aider les utilisateurs de produits Samira Abdesslam, chef de projet Fondée sur l’expertise de l’INERIS en toxicologie
chimiques à appréhender l’impact futur « risques chimiques en mécanique » et en écotoxicologie, cette base de données nous
de REACh sur leur activité, l’INERIS met à au CETIM : « Nous utilisons IneReach fournit des informations fiables et synthétiques.
leur disposition IneReach, une base de données pour hiérarchiser les risques » Elle permet de situer rapidement le niveau de
comprenant actuellement trois cent cinquante « Dans le cadre d’un grand projet lancé par le connaissances atteint sur la substance qui nous
fiches. Dédiées à une substance particulière, ces CETIM* et la FIM** avec la collaboration d’autres intéresse, en particulier sur ses propriétés cancéri-
fiches fournissent des informations générales partenaires, un recensement des produits chimi- gènes ou reprotoxiques. Cet état des lieux donnera
(nature et domaines d’utilisation du produit), ques entrant dans la composition des substan- la possibilité au CETIM de hiérarchiser les risques
des éléments relatifs à sa classification et aux ces utilisées directement par les industriels de la et d’établir des priorités et nous serons en mesure
dangers identifiés qu’elle représente, le règle- mécanique, comme des solvants, ou présents dans de mettre en place une alerte opérationnelle pour
ment auquel elle est soumise, des données les composants des articles qu’ils assemblent et prévoir suffisamment en amont les risques encourus
toxicologiques et écotoxicologiques ainsi qu’un commercialisent, est en cours. Dans ce cadre, nous et envisager des solutions de substitution. »
indicateur définissant son statut dans le cadre souhaitons nous associer avec INERIS et utiliser
* Centre d’Etudes Techniques des Industries Mécaniques
de REACh, notamment la soumission à une IneReach. Ce recours est essentiellement centré ** Fédération des Industries Mécaniques
autorisation. sur les substances soumises à autorisation.
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Patricia Rotureau, docteur ingénieur,
Unité Procédés et Énergies Propres et Sûrs
« L’INERIS travaille à la mise au point
d’un outil prédictif de l’explosibilité
des substances chimiques »
L
’enregistrement des substances chimiques dans divers cadres réglementaires, à des fins de chissant la base
selon le règlement REACh et le nouveau pré-classification par exemple. Il s’agit de savoir de données et
système de classification et d’étiquetage si une molécule présente des caractéristiques en introduisant
des produits chimiques (SGH) imposent l’un et d’explosibilité nécessitant la réalisation de tests de nouveaux
l’autre la détermination des dangers liés à leurs physiques à grande échelle, par nature plus descripteurs des structures moléculaires. Des
propriétés toxicologiques, écotoxicologiques mais longs, plus coûteux et nécessitant une quantité modèles permettant d’estimer d’autres carac-
également physico-chimiques telles que les importante de substance à tester. téristiques de l’explosibilité des substances,
propriétés d’explosibilité et d’inflammabilité. Les comme la sensibilité à l’impact, seront ensuite
délais et coûts nécessaires à l’évaluation expéri- Une association originale développés.
mentale de ces caractéristiques pour les 30 000 Supporté par une thèse réalisée par Guillaume
* Programme REPLACE : Recherche sur les Propriétés et L’Activité
substances circulant en Europe étant incompati- Fayet, ce programme* inédit d’une durée de trois de Composés Explosifs.
bles avec les exigences du calendrier européen, ans (2007-2009) associe de manière originale
les deux règlements font référence à l’utilisation la modélisation moléculaire (calculs de chimie
de méthodes alternatives à l’expérimentation quantique) et l’approche QSPR. Ces recherches,
pour l’obtention de données liées à ces dangers. visant à proposer un nouvel outil de screening
L’une de ces méthodes repose sur les modèles pour l’évaluation des propriétés dangereuses
prédictifs de type QSPR - Relations Quantitatives complexes d’explosibilité, ont déjà donné lieu à
Structures-Propriétés - encore peu développés la présentation de premiers résultats dans des
pour les dangers physiques (a contrario des congrès internationaux et dans des revues scien-
modèles QSAR - Relations Quantitatives Structu- tifiques à comité de lecture et ont été confrontés
res-Activités - très utilisés pour les dangers liés à à des groupes d’experts internationaux spécialisés
la santé humaine et à l’environnement). sur les problèmes liés aux produits chimiques
Expert en évaluation expérimentale des dangers dangereux (par exemple, à l’International Group
physiques des substances chimiques, l’INERIS a of experts on the explosion risks of Unstable
engagé dès 2007, en collaboration avec l’École Substances – IGUS – créé par l’OCDE). Il s’agit d’un a) Étiquetage du danger d’explosion
Nationale Supérieure de Chimie de Paris, des premier modèle QSPR, développé à partir des selon la directive "substances dangereuses"
travaux visant à développer de tels modèles structures moléculaires de vingt-deux compo- et selon le GHS.
prédictifs pour l’évaluation des propriétés dange- sés nitro-aromatiques (nitrobenzène et dérivés) b) Molécule de TNT modélisée
reuses d’explosibilité. Une fois validés, ils pourront potentiellement explosifs pour prédire leur stabi- à l’aide de la chimie quantique
être utilisés par les industriels en phase amont lité thermique. Les travaux se poursuivent pour (orbitale moléculaire, densité
électronique).
ou par les instances qui classent les substances améliorer la prédictivité de ce modèle en enri-
| Des analyses socio-économiques en mal de recherches |
R
EACh prévoit le recours à l’analyse socio-économique (ASE) dans les procé- analyse coût/efficacité, expertise des impacts santé/environnement et évaluation
dures d’autorisation et de restriction de certaines substances. Dans le cas des risques, monétarisation des bénéfices, analyse multi-critère, modélisation
des autorisations qui concernent trois types de substances (cancérogènes, macro-économique.
mutagènes ou toxiques pour la reproduction ; persistantes, bio-accumulables et « Outre le faible nombre d’experts compétents en analyse socio-économi-
toxiques ; perturbatrices du système endocrinien), l’ASE a pour rôle d’évaluer que, le problème c’est que la réglementation REACh est allée plus vite que
si les bénéfices socio-économiques liés à l’emploi de la substance sont ou non la connaissance dans deux domaines essentiels : la modélisation de l’impact
supérieurs aux dommages consécutifs aux risques de son usage « non contrôlé ». des substances sur les écosystèmes et l’évaluation monétaire des dommages
Dans le cas des restrictions à la mise sur le marché et à l’utilisation d’une subs- environnementaux. La remarque vaut également pour les lois sur l’eau, sur l’air
tance chimique dans l’Union européenne, le but de l’ASE sera d’évaluer si cette et pour les études de substitution des substances dangereuses. Il y a donc un
décision est la meilleure solution pour réduire les risques. besoin de compétences en recherches à long terme dans ces deux domaines »,
La réalisation de ce type d’étude associe plusieurs démarches : enquêtes, observe Jean-Marc Brignon, responsable de l’Unité Économie et Décision pour
consultations, analyse de procédés et filières industrielles, analyse financière, l’environnement.
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Alexandre Péry, responsable de l’Unité Modèles
pour l’Écotoxicologie et la Toxicologie
« L’INERIS participe à des travaux innovants
sur le couplage des approches
in vitro et in silico »
D
epuis plusieurs années, les modèles implique un développement de la méthode plexité du vivant ; la mise au point des
pharmacocinétiques (PBPK*) sont passant par l’intégration de données sur la techniques de métabolomique (mesure
utilisés par les toxicologues pour distribution puis la biotransformation et la des réponses métaboliques à un toxique)
étudier le cheminement et la concentration métabolisation des composés chimiques pour identifier l’apparition de biomarqueurs,
d’une substance toxique dans différents à l’échelle moléculaire, dans les cellules. dans le rein ou le foie, sous l’effet de l’ex-
organes du corps humain pour y étu- Ces paramètres peuvent aujourd’hui être position à une substance hépatotoxique
dier notamment les relations dose-effet. acquis par d’autres méthodes alternati- ou néphrotoxique ; le développement de
Conduits par l’INERIS en collaboration avec ves de type QSAR** et modèles bioartifi- modèles in silico permettant l’intégration
le Centre Hospitalier Universitaire d’Amiens, ciels. Les relations quantitatives entre la des données recueillies par tests in vitro
des travaux de cette nature ont par exem- structure chimique d’une substance et son afin de disposer de représentations les plus
ple permis le développement d’un outil activité biologique (QSAR) représentent la proches des expositions in vivo et d’obtenir
d’aide à l’administration de la caféine aux première et la plus rapide évaluation du par cette méthode la meilleure prédictibilité
nourrissons, en fonction de leurs caracté- danger toxique. possible des risques.
ristiques physiologiques, dans le cadre de L’optimisation du design expérimental par
la prévention de la détresse respiratoire Couplage des approches des simulations in silico n’a pas seulement
par apnée. in vitro et in silico pour finalité la réduction des tests in vivo.
Baptisés in silico parce qu’ils font appel à Couramment pratiqué par l’industrie phar- Elle revêt un intérêt majeur pour les indus-
la puissance de calcul des ordinateurs, ces maceutique pour la recherche de nouvelles triels de la chimie auxquels cette méthode
modèles toxicocinétiques ont vocation à se molécules par criblage, le couplage des permettra d’évaluer rapidement le risque
substituer à terme aux essais expérimentaux approches in vitro et in silico fait actuelle- toxicologique des nouvelles molécules et de
sur l’organisme vivant pour la prévision des ment l’objet de travaux, en particulier dans savoir, pour un coût de revient très inférieur
propriétés toxicologiques et environnemen- le cadre du projet SYSBIOX (ANR) auquel à l’expérimentation animale, s’il y a lieu ou
tales : solubilité, dégradation, adsorption. La participe l’INERIS. Ces travaux innovants non d’engager une démarche réglementaire
validation, puis l’utilisation, de cette appro- portent sur trois axes de recherche : le d’évaluation du risque.
che technologique pour l’étude prédictive développement de systèmes dynamiques
*Physiologically Based PharmacoKinetic
des expositions chroniques à de faibles d’organes bioartificiels (cultures de cellules **Quantitative Structure Activity Relationships
quantités en toxicologie environnementale in vitro) capables de reproduire la com-
| L’INERIS, PARTENAIRE DE la plate-forme pour le développement
des méthodes alternatives |
D
ès juin 2006, l’INERIS s’est doté d’un « comité d’éthique sur la et le contrôle des produits de santé et des substances chimiques et de
question de l’expérimentation animale ». Le rôle de ce comité était former une plate-forme miroir de la plate-forme européenne ECOPA
de veiller au respect des législations en vigueur ainsi qu’aux condi- (European consensus platform on alternatives). Le GIS réunit douze
tions d’approvisionnement, d’hébergement et d’entretien des animaux. partenaires : le ministère chargé de la Recherche, l’Afssaps, l’INERIS,
En novembre 2007, l’INERIS a participé à la création de la plate-forme l’Afsset, l’Inserm, le CNRS, l’UIC (Union des industries chimiques), la FEBEA
nationale pour le développement des méthodes alternatives à l’expéri- (Fédération des entreprises de la beauté), le LEEM (Les entreprises du
mentation animale. Philippe Hubert, Directeur des risques chroniques, médicament), l’OPAL (Recherche expérimentale et protection de l’animal
en est Directeur et la présidence est assurée par l’AFSSAPS. Constitué en de laboratoire), la Ligue française des droits de l’animal, et la Société de
Groupement d’Intérêt Scientifique le 6 mars 2008, cet organisme a pour pharmaco-toxicologie cellulaire. Les travaux de cette plate-forme natio-
but d’identifier et de promouvoir les méthodes alternatives en l’expéri- nale sont conduits au sein de deux sous-comités : produits de santé et
mentation animale permettant de réduire ou de supprimer le recours à substances chimiques dont les secrétariats sont respectivement assurés
l’animal de laboratoire, notamment dans le développement, l’évaluation par l’INERIS et l’AFSSAPS.
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Selim Aït-Aïssa, ingénieur,
Unité Écotoxicologie in vitro et in vivo
« Les tests in vitro sont particulièrement
adaptés au criblage des substances
chimiques »
D
epuis quelques années, les effets ou du tissu. Dans l’organisme, les différents nomètre, en
des polluants chimiques – pesticides, mécanismes de régulation, cibles potentielles présence d’un
métaux lourds, phtalates, molécules des substances chimiques, sont en effet inter- perturbateur
d’origine pharmaceutique… – sur les systè- connectés et/ou inter-régulés et contribuent endocrinien.
mes endocriniens des organismes aquatiques globalement au maintien du statut hormonal. L’intérêt de ce type de tests in vitro réside
sont devenus une préoccupation majeure en Nos recherches nous ont conduits par exem- dans un rapport coût/performance, qui en fait
écotoxicologie du fait notamment du mode ple à développer une approche multi-cibles un outil particulièrement adapté aux opéra-
d’exposition directe et de la sensibilité par- pour appréhender l’évaluation du caractère tions de criblage des molécules chimiques.
ticulière des poissons ou des amphibiens. La perturbateur endocrinien des pesticides.
rareté des données sur l’action endocrine d’un Le panel de bio-essais qui a été mis au point
grand nombre de ces substances a conduit prend en compte différents mécanismes molé-
l’INERIS à étudier ce phénomène en centrant culaires complémentaires intervenant dans les
ses travaux sur deux familles de contami- régulations endocrines. Les effets mesurés ont
nants : les pesticides et les hydrocarbures ainsi apporté des données sur : l’interaction
aromatiques polycycliques (composés orga- des polluants avec des récepteurs nucléaires
niques dangereux présents dans les dérivés (récepteurs androgènes ou œstrogènes) dans
du pétrole ou d’origine automobile). Compte les réponses cellulaires aux hormones ; avec le
tenu des avantages de l’approche (rapidité, récepteur de la dioxine, impliqué notamment
automatisation, coût, éthique), ce sont les dans le métabolisme des xénobiotiques et
méthodes de cultures cellulaires in vitro qui des stéroïdes endogènes ; sur l’altération de
ont été utilisées pour réaliser le criblage de l’aromatase, enzyme clé de la synthèse des
ces perturbateurs endocriniens. hormones stéroïdiennes.
Les tests d’effets (anti) œstrogéniques ont été
Une batterie de tests développés en collaboration avec l’Unité 896
Ce programme a permis de développer et de l’Inserm (Montpellier). Ils font appel à des
valider une batterie de tests complémentaires cultures de cellules génétiquement modifiées
permettant d’évaluer différents mécanis- qui expriment le gène rapporteur codant pour
mes d’action impliqués dans les perturba- la luciférase, une enzyme qui présente la Lignée cellulaire ZFL dérivée de tissu
tions endocrines et les effets multiples des particularité d’émettre une quantité variable hépatique de poisson zèbre (Danio rerio)
substances toxiques en fonction de l’espèce de lumière, mesurable au moyen d’un lumi- (photo A. Cosnefroy/S. Aït-Aïssa)
| Un équipement dédié à la toxicologie environnementale |
D
ès 2005, l’INERIS et l’Institut Polytechnique LaSalle Beauvais se sont le pôle ANIMEX-Chimie (6,3 M€) devrait être mis en service au cours du
associés pour concevoir une plate-forme d’expérimentations in vivo. deuxième semestre 2010.
Dans un contexte caractérisé par l’absence d’équipements dimen- Financé conjointement par l’État et la Région, cet outil technologique sera
sionnés à l’aune des programmes de recherche en santé-environnement*, ouvert au partenariat avec les établissements universitaires implantés en
ce projet a pour but de répondre aux besoins en bio-essais engendrés par Picardie : Université de Technologie de Compiègne, Centre-Hospitalo-Uni-
le développement des études de toxicologie environnementale ainsi qu’aux versitaire et Université d’Amiens. Il s’intégrera plus largement au réseau
travaux de qualification des méthodes alternatives en expérimentation ANTIOPES dont la mission est de mutualiser les moyens humains et techni-
animale requises par l’application du règlement REACh. ques pour le développement des nouveaux outils de toxicologie prédictive
ANIMEX** comprendra deux zones distinctes dédiées aux travaux de bio- à finalité environnement-santé.
logie et à la toxicologie des produits chimiques. Ces deux pôles seront
* À peine 1% des capacités actuelles sont applicables aux domaines de la toxicologie
réalisés en décalage dans le temps sous la maîtrise d’ouvrage respective environnementale.
de l’Institut Polytechnique LaSalle Beauvais et de l’INERIS. Premier achevé, ** Plate-forme d’ANIMalerie pour EXpérimenter sur l’organisme entier.
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