API 10 S
L’API 20 E est utilisée pour identifier les entérobactérie (oxydase négative)
Répartir de l’eau dans les alvéoles du fond de la boite d’incubation pour créer une atmosphère
humide
Test d’oxydase :
Il constitue le 11éme test d’identification à noter
Préparation de l’inoculum :
Ouvrir une ampoule d’eau physiologique stérile ou d’eau distillée stérile ou ampoule suspension
Medium (5mL)
Ajouter une colonie à partir d’une gélose dans
----> Homogénéiser pour avoir une suspension bactérienne
Inoculation à la galerie :
Introduire la suspension bactérienne dans les tubes de la galerie avec une pipette pasteur en posant
la pointe de la pipette sur le côté de la cupule toute en incluant légèrement la boite d’incubation vers
l’avant
Pour le test CIT -----> Remplir la totalité de la cupule avec la suspension bactérienne
Les cupules avec ----> Ajouter la suspension bactérienne puis remplir la cupule par l’huile de
paraffine
Renfermer la boite d’incubation et l’incuber à 37°C pendant 18-24 heures
Lecture et interprétation de la galerie :
Révéler les tests nécessitant l'addition de réactifs :
- Test TDA : ajouter 1 goutte de réactif TDA.
- Test IND : ajouter 1 goutte de réactif JAMES.
- Test NO2 : ajouter 1 goutte des réactifs NIT 1 et NIT 2 dans le tube GLU. Attendre 2 à 5 minutes.
Tests Négative Positive
ONPG Jaune
Une très légère couleur
Incolore
jaune est considérée
positive
GLU Bleu – bleu vert Jaune – jaune gris
ARA Bleu – bleu vert Jaune
LDC Jaune Rouge - orangé
ODC Jaune Rouge - orangé
CIT Vert pâle - jaune Bleu-vert - bleu
H2S Incolore - grisâtre Dépôt noir – fin liseré
URE Jaune Rouge – orangé
TDA
Jaune Marron-rougeâtre
Immédiatement après l’ajout du TDA
IND
Incolore – vert pâle - jaune Rose
Immédiatement après l’ajout du JAMES
OX Selon la notice du test utilisé
NO2
2 à 5 minutes après l’ajout de NIT1 et NIT2 Jaune Rouge
sur le tube GLU
Noter + ou - sur la fiche des résultats
A l'aide du logiciel d'identification apiweb TM, identifier la bactérie correspondante
NB : A partir de la suspension bactérienne préparée, inonder une boite de gélose