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Endonucléases de restriction en microbiologie

Les endonucléases de restriction sont des protéines bactériennes qui protègent contre les virus en coupant l'ADN à des séquences spécifiques. Elles se classifient en trois types et peuvent générer des extrémités à bouts francs ou collants. Le document présente également des exemples d'enzymes, leur nomenclature et des définitions associées.

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Endonucléases de restriction en microbiologie

Les endonucléases de restriction sont des protéines bactériennes qui protègent contre les virus en coupant l'ADN à des séquences spécifiques. Elles se classifient en trois types et peuvent générer des extrémités à bouts francs ou collants. Le document présente également des exemples d'enzymes, leur nomenclature et des définitions associées.

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Université des Sciences et de la Technologie Houari Boumediene

Module de Génie Biologique


Master Microbiologie et Contrôle de Qualité

Cours 2:
Les endonucléases de restriction
(Dr ABBAS-TOUMIAT)

1- Les endonucléases de restriction :

Protéines principalement isolées de bactéries ; synthétisées pour se protéger des infections de


virus.

Reconnaissent de courtes séquences spécifiques (palindromes).

En présence de Mg2+, elles effectuent une coupure dans chacun des deux brins de la molécule
d’ADN.

Il existe 3 types :

- Type I :

- Type II :

- Type III :

2- Classification et nomenclature :

La classification des endonucléases de restriction est la suivante : E.C.[Link]

« 3 » (classe) :

« 1 » (sous-classe) :

« 21 » (sous-sous-classe) :

«4»:

- 1ère lettre en majuscule:


- 2ème et 3ème lettres en minuscule:
- 4ème lettre en majuscule:
- Chiffre romain:
3- Réaction générale :

La réaction générale catalysée par les enzymes de restriction implique la présence dans le
milieu réactionnel des facteurs suivants :

-
-
-
-

4- Sites de restriction et types de coupures :

Les enzymes de restriction possèdent deux types de coupures :

- les enzymes de restriction qui génèrent des extrémités dites « à bouts francs ».

- les enzymes de restriction qui génèrent des extrémités dites « à bouts collants ou
cohésif ».
5- Exemples d’endonucléases de restriction :

- BamHI : Produite par Bacillus amyloliquefaciens

Son site de liaison à l’ADN :


- Pvu I :

Produite par Proteus vulgaris

Son site de liaison à l’ADN :

- Pvu II :

Produite par Proteus vulgaris

Son site de liaison à l’ADN :

- KpnI :

Produite par Klebsiella pneumoniae

Son site de liaison à l’ADN :

- HindIII :

Produite par Haemophilus influenzae

Son site de liaison à l’ADN :


- Sau 3A :

Produite par S aureus 3A

Son site de liaison à l’ADN :

6- Quelques définitions :
- Deux isoschizomères :

- Deux enzymes compatibles :

- Unité d’activité d’une enzyme :


7- Système de méthylation de l’ADN :

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