Intérêt pratique du spermogramme
Sekhsokh Y1., Bajjou T1., Lmimouni B1., Baaj A.J1.
Résumé:
Malgré ses limites, le spermogramme constitue un moyen important d'évaluation
de la fertilité masculine .
L'examen du sperme comporte plusieurs paramètres essentiels dont les valeurs
sont, en fait étroitement corrélés, chez les sujets féconds comme chez les
inféconds. Il est rare qu'une anomalie soit observée isolément.
Mots clés: spermogramme, fertilité
Le besoin de faire une évaluation fonctionnelle des spermatozoïdes, et donc, de la
fertilité masculine, illustre bien l'importance de la mise au point de nouvelles méthodes plus
ou moins standardisées pour l'analyse du sperme. Le spermogramme, malgré ses limites et
son hétérogénéité, reste le moyen essentiel de cette évaluation et du suivi thérapeutique.
Cet exposé, propose de faire une mise au point sur les différentes étapes de l'analyse du
sperme.
Recueil et transport des prélèvements
Le sujet doit recevoir des informations claires; écrites ou orales, sur les conditions de
recueil. Le sperme doit être prélevé après un délai minimum d'abstinence sexuelle de 48
heures et n'excédant pas une semaine. Un document accompagnant le prélèvement doit
comporter les renseignements suivants: nom, prénom, délai d'abstinence, date, heure du
prélèvement et délai écoulé entre l'heure du prélèvement et l'heure d'analyse .
Pour une première évaluation, deux éjaculas doivent être recueillis, dans un délai compris
entre une semaine et trois mois maximum.
Le sperme est recueilli par masturbation de préférence, dans l'intimité d'une pièce à proximité
du laboratoire. L'échantillon du sperme doit parvenir au laboratoire dans l'heure qui suit le
prélèvement. Lorsque la mobilité des spermatozoïdes est anormalement basse, il faudra
veiller à ce que l'intervalle entre le recueil et l'analyse soit aussi court que possible lors du
second prélèvement.
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Laboratoire de Microbiologie. Hôpital Militaire d'Instruction Mohamed V, Rabat
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Le sperme total de l'éjacula est émis dans un réceptacle évasé en plastique ou en verre. Si un
examen bactériologique est prévu, le patient doit d'abord uriner, puis se laver les mains et la
verge avant le recueil du sperme dans un réceptacle stérile.
Le recueil de sperme ne doit pas être effectué dans un préservatif classique qui risque
d'altérer la viabilité des spermatozoïdes. Des préservatifs spéciaux en silastique sont
conseillés lorsque le prélèvement par masturbation est difficile voire impossible. Le recueil
consécutif à un coït interrompu n'est pas recommandé car la première partie de l'éjacula,
généralement la plus concentré en spermatozoïdes est perdue. Par ailleurs, une contamination
cellulaire et bactérienne peut affecter le prélèvement, le pH acide du liquide vaginal altèrant
la mobilité des spermatozoïdes.
Le prélèvement ne doit pas être soumis à des températures inférieures à 20°c ou supérieures à
40°c durant le transport au laboratoire.
Le réceptacle doit être identifié avec le nom du patient, la date et l'heure du prélèvement.
Examen du sperme humain
A- Examen macroscopique initial
1 -Liquéfaction
Le sperme normal se liquéfie en moins d'une heure à température ambiante quelques fois, la
liquéfaction ne s'effectue pas du tout. Dans ce cas, un traitement additionnel (agitation
mécanique ou utilisation de produits tels la broméline à 1g/l, ou la chymotrypsine 150 usp /
ml ) peut s'avérer nécessaire pour permettre l'analyse du sperme.
2- Aspect
Un sperme normal a un aspect homogène gris opalescent, il peut être moins opaque si la
concentration est très basse et peut prendre une couleur brune lorsqu'il contient des hématies
3- Volume
Le volume de l'éjacula est mesuré dans un tube gradué à fond conique ou par aspiration à
l'aide d'un dispositif mécanique dans une pipette graduée à large ouverture. Les seringues en
plastiques et les aiguilles hypodermiques son proscrites en raison de la perturbation de
certains paramètres du sperme tel que la mobilité.
4- Consistance
La consistance ( souvent appelée viscosité ) du sperme liquéfié est évaluée après aspiration
douce dans une pipette de 5ml, en notant la façon dont le sperme s'écoule. A l'état normal, il
s'écoule sous forme de gouttes bien séparées alors qu'un sperme de consistance augmentée
forme des filaments de plus de 2 cm entre chaque goutte. La consistance peut aussi être
évaluée en plongeant une baguette de verre dans le sperme et en observant la longueur du
filament qui se forme lorsqu'elle est retirée de l'échantillon, ici encore, les filaments ne
doivent pas excéder une longueur de 2 cm.
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5- pH
Une goutte de sperme est déposée sur une bandelette de papier pH, la couleur de la zone
imprégnée est comparée à une échelle de lecture. Le pH est mesuré dans l'heure qui suit
l'éjaculation, il est normalement compris entre 7,2 et 8.
B- Analyse microscopique initiale
Elle évalue la concentration, la mobilité des spermatozoïdes et recherche la présence
éventuelle d'agglutinats spermatiques ou d'autres éléments cellulaires.
1- Mobilité et qualité du mouvement
Le sperme est observé entre lame et lamelle au grossissement 40, et le mouvement de chaque
spermatozoïde rencontré est analysé et classé dans les catégories a, b, c, d selon qu'il est :
* rapide et progressif : a
* lent ou faiblement progressif: b
* mobile mais non progressif :c
* immobile: d
Le nombre de spermatozoïdes de chaque catégorie est déterminé à l'aide d'un compteur
manuel. Habituellement quatre à six champs sont parcourus pour classer 100 spermatozoïdes
consécutifs et calculer leurs pourcentages respectifs dans chacune des classes.
2- Cellules rondes
L'éjacula contient toujours d'autres cellules que les spermatozoïdes. Il s'agit de cellules
épithéliales de l'urètre, de cellules de la lignée germinale et de leucocytes, habituellement
toutes regroupées sous le terme de "cellules rondes".
La concentration de ces cellules peut être mesurée à l'état frais à l'aide d'un hémocytométre .
En règle générale, un éjacula normal ne contient pas plus de 5.106 cellules rondes / ml et la
concentration en leucocytes n'excède pas 106 /ml.
Plusieurs techniques de quantification de leucocytes dans le sperme ont été proposés. Parmi
celles-ci une technique biochimique mesurant les concentrations d'élastase à l'aide d'un test
d'immuno-adsorption enzymatique ELISA.
Deux techniques histologiques permettant l'identification des leucocytes par la détection de
peroxydase intracellulaire et d'antigènes spécifiques par des anticorps monoclonaux
appropriés .
Lorsque le sperme contient plus de 106 globules blancs /ml, des tests bactériologiques pour
rechercher une infection éventuelle des glandes annexes sont recommandés.
3- Agglutination
L'agglutination des spermatozoïdes est définie par l'attachement de spermatozoïdes mobiles
entre eux par la tête, la pièce intermédiaire, le flagelle, ou de manière mixte.
L'attachement de spermatozoïdes immobiles entre eux ou de spermatozoïdes mobiles à des
filaments de substances mucineuses, à d'autres cellules ou à des débris ne constitue pas une
agglutination spécifique mais une agrégation non spécifique. Le pourcentage moyen de
spermatozoïdes agglutinés est évalué à 5%.
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C- Autres analyses microscopiques
1-vitalité
La vitalité des spermatozoïdes reflète la proportion de spermatozoïdes "vivants". Elle est
évaluée par l'exclusion de colorants ou par la capacité de régulation osmotique des
spermatozoïdes mesurée dans les conditions hypotoniques.
a- coloration vitale
La proportion de spermatozoïdes vivants est déterminée à chaque fois que le pourcentage des
spermatozoïdes immobiles dépasse 50 %.
Deux types de colorations, basées sur le principe de la perméabilité des cellules morte
(membranes plasmiques lésées) à certains colorants: éosine seule, éosine-nigrosine (technique
de bloom modifiée).
b- Test de gonflement hyposmotique ( HOS - test)
C'est un test simple basé sur le fait que la cellule vivante est imperméable. Le spermatozoïde
mort, placé dans un milieu hypotonique, augmente de volume.
Ce test apporte des informations supplémentaires sur l'intégrité et la fonctionnalité de la
membrane plasmique.
2- Numération des spermatozoïdes
La numération bien qu'apparemment objective comporte des risques importants d'erreurs
puisque l'intervalle de confiance pour une seule mesure est de 50%.
Différentes précautions techniques et un double comptage permettent de réduire ces risques à
moins de 10%.
Cette numération est réalisée en utilisant un hémocytométre après homogénéisation et
dilution.
3- Analyses des caractéristiques morphologiques des spermatozoïdes
De nombreux centres ont adopté en France la classification de DAVID .elle comporte 13
classes :
Anomalies de la tête: allongée, amincie, microcéphalie, macrocéphalie, irrégulière, dupliquée
et en lyse.
Anomalies de la pièce intermédiaire: restes cytoplasmiques et angulations.
Anomalies du reste du flagelle: absent, court, enroulé et double.
Dans certains cas, l'exploration au microscope électronique peut renseigner sur des causes
cyto-pathologiques d'infertilité dans deux indications essentielles : les formes à tête dite
irrégulière, que l'on peut classer en différents sous groupes et les
asthénospermies importantes isolées consécutives à une anomalie ultra-structurale du flagelle.
4- Méthodes de coloration
Quatre colorations sont d'usage courant :
-Coloration de Giemsa: meilleure pour les différents types de leucocytes que pour les
spermatozoïdes.
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-Coloration de Papanicolaou modifiée pour les spermatozoïdes: elle colore l'acrosome en bleu
pale, la région post-acrosomique en bleu foncé, la pièce intermédiaire en rouge et le flagelle
en bleu, les restes cytoplasmiques, généralement localisés en arrière de la tête, se teintent en
vert.
-Coloration de Bryan-Leishman: particulièrement utile pour identifier les cellules germinales
immatures et pour les distinguer des leucocytes .
-Coloration de Shorr: simple à réaliser, suffisante pour une évaluation de routine de la
morphologie des spermatozoïdes.
Valeurs de références des caractéristiques du sperme
Les valeurs de références du sperme normal devraient être déterminées à partir d'éjaculas de
patients récemment responsables d'une grossesse.
Pour un sperme analysé selon les techniques décrites précédemment, les critères de normalité
suivants sont habituellement adoptés.
Volume 2.0 ml ou plus
pH 7.2 -8.0
Concentration des spermatozoïdes 20x106 spermatozoide/ml ou plus
Nombre total 40x106 spermatozoïde par éjacula ou plus
Mobilité 50% des spermatozoïdes ont une mobilité progressive
Morphologie 30% de forme normale ou plus
Vitalité 75% des spermatozoïdes vivants ou plus
Leucocytes moins de 1x106
Nomenclature relative à certaines caractéristiques du sperme
Une nomenclature a été proposée pour identifier les variations des caractéristiques du sperme
par rapport aux valeurs normales.
Elle peut être utilisée de la façon suivante:
Oligospermie Concentration des spermatozoïdes < à20x106/ml
Polyzoospermie Concentration des spermatozoïdes > à250x106/ml
Asthénospermie Moins de 50% des spermatozoïdes présentent
une mobilité progressive
Tératospermie Moins de 30 % des spermatozoïdes présentant
une morphologie normale
Oligo-asthéno-terato-spermie Les trois variables sont perturbées
Azoospermie Absence de spermatozoïde dans l'éjacula
Aspermie Absence d'éjacula
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Conclusion
Des variations importantes peuvent affecter les différents paramètres d'analyse du sperme et
induire, ainsi, des erreurs d'interprétation: celles liées aux conditions de recueil et à
l'imperfection des mesures elles mêmes, mais aussi celles en rapport avec les fluctuations
physiologiques du sperme. Par ailleurs le rythme des éjaculations, la saison, l'âge sont
également des facteurs pouvant modifier le spermogramme.
Références:
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8-Worischeck J.H., Parraro. Transrectal ultrasound in the évaluation of men with loow volume
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Summary:
In spite of the limits, the spermogramme establishes an important means of
evaluation of the male fertility. The exam of the sperm contains several
parameters of which values are, infact strictly correlated, to subjects fertile
as to the infertile.
It is rare an abnormality is observed remotely.
Keywords: spermogramme, fertility.
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