Hôpital Mère et Enfant Rédaction : Dr SORAA

Validation : Dr SORAA
PROCEDURE EXAMEN Version : 1
Date : 13/05/2011
CHU MOHAMMED VI CYTOBACTERIOLOGIQUE DES URINES Page : 1/7
Marrakech

1. Objectif :
• Décrire les modalités d’exécution d’ un examen cytobactériologique des
urines

2. Domaine : Microbiologie

3. Responsabilités et identité des destinataires :

• destinataires : Techniciens de laboratoires, médecins résidents,

4. Documents de référence

• Guide de Bonne exécution des Analyses. Techniques usuelles en

5. Signatures des responsables :

Date Nom Fonction Signature

Rédacteur juin 2011 N. SORAA PA

Vérificateur
Approbateur
1" PRELEVEMENT"

1.2" MODE"DE"PRELEVEMENT"
MODE"DE"PRELEVEMENT
• CAS"GENERAL"""(par%voie%naturelle%en%%«%milieu"du"jet%»%)"
"
1 Première%miction%du%matin%ou,%à%défaut,%3%heures%après%la%miction%précédente%
1 Toilette%soigneuse%avec%savon%ou%antiseptique%(Dakin)%de%région%vulvaire%(femme)%ou%du%méat%(homme)%et%
rinçage%soigneux%à%l’eau%%
er
1 Recueil%du%«%milieu"du"jet%»%:%éliminer%le%1 %jet%d’urines%puis%uriner%dans%le%flacon%stérile%(sans%toucher%les%
bords)%
1 Bien%fermer%le%flacon,%l’identifier,%et%le%porter%immédiatement%au%laboratoire.%En%cas%de%délai,%le%placer%au%
réfrigérateur%à"4°C.%
%
• CHEZ"LE"NOURRISSON%%
%%%%%%%
1%%%%%Après%désinfection%soigneuse%du%méat%et%de%la%peau,%poser%le%collecteur%pour%une%durée%inférieure%à%
30minutes,%le%changer%si%pas%d’urines%dans%ce%délai%en%recommençant%le%nettoyage.%
1%%%%%Dès%la%miction,%transvaser%les%urines%dans%le%flacon%stérile%et%%porter%immédiatement%au%laboratoire%
1 Ponction%sus%pubienne%(geste%médical)%
1 Sondage%aller1retour%(=%sondage%simple)%
%
• CHEZ"LE"MALADE"SONDE""
"
1 Clamper%en%aval,%désinfecter%le%site%de%ponction%de%la%sonde%à%l’alcool%iodé,%ponctionner%à%la%seringue%et%
transvaser%les%urines%dans%le%flacon%stérile.%%
Ce%type%de%prélèvement%reflète%davantage%les%espèces%colonisant%la%sonde%urinaire,%c’est%pourquoi%on%
privilégiera%le%prélèvement%juste%après%le%changement%de%la%sonde.%

1.3" IDENTIFICATION"DU"PRELEVEMENT"
IDENTIFICATION"DU"PRELEVEMENT
%
1 Etiquette%du%patient%à%coller%sur%le%pot%
1 Si%plusieurs%ECBU%pour%le%même%patient%réalisés%en%même%temps%avec%des%origines%différentes%:%voies%
naturelles,%sondes,%préciser%l’origine%du%prélèvement%sur%chaque%pot%
1 Renseigements%devant%accompagner%le%prélèvement%:%
% 1%ECBU%par%voie%naturelle%
% 1%ECBU%sur%sonde%%
% 1%Ponction%sus1pubienne%
1%Traitement%antibiotique%en%cours%au%moment%de%l’examen%
1%%Renseignements%cliniques%
%
2" PHASE"PREDANALYTIQUE"

2.1" RECEPTION"
RECEPTION
" """Réception%du%prélèvement"%
%%%%%%%%%%%%%%%%Enregistrement%%
%%%%%%%%%%%%%%%%Indiquer%sur%chaque%tube%le%numéro%%%

2.2 " TEMPERATURE"DE"CONSERVATION "

2.4 DELAI " :"<"12"heures"à"4°C"

FICHE"TECHNIQUE"
%

PREMIER"JOUR "
"
Examen"Microscopique"
%
a)"Cytologie"quantitative!"
%
Avec%une%oese%de%10µl,%introduire%l'urine%non%centrifugée%et%homogénéisée%dans%une%cupule%de%la%KOVA%Slide%Laisser%
sédimenter%%5%minutes.%
Observer%au%microscope%l'ensemble%de%la%cellule%%(%obj.%40%)%
Chaque%cupule%de%la%KOVA%Slide%représente%1mm3%
%
→%%Noter%semi1quantitativement%la%présence%de%"cellules,"cristaux"et"cylindres":%quantité%et%nature%%
%%%%
% %
→%%Compter%les%hématies"et"les"leucocytes"en%fonction%de%la%densité%cellulaire%:%
%1%la%grille%entière%% ⇒%N%rendu%=%n%compté%x%1000%/%ml%
%1%un%grand%carré%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%⇒%N%rendu%=%n%compté%x%10%x%1000%/%ml"
%1%un%petit%carré% ⇒%%N%rendu%=%n%compté%x%100%x%1000%/ml%%
%Ne%%compter%qu’une%fois%les%éléments%situés%sur%les%traits%de%la%grille.%
%%%%%%%%%%
→%%Noter%la%présence%de%levures,%de%trichomonas,%d’œufs%de%parasites%
%
b)"Coloration"de"Gram"%
%
Si%la%leucocyturie%est%>%10%000%leucocytes%/ml%ou%si%l’on%voit%des%germes%à%la%Kovaslide%quelque%soit%le%nb%de%leucocytes,%faire%
une%coloration%de%Gram%sur%une%goutte%d’urines%séchées%sur%une%lame.%En%cas%de%lecture%difficile,%refaire%un%Gram%sur%un%
culot%de%centrifugation%%
Rechercher%la%présence%de%germes%:%Gram,%morphologie,%%groupement%et%%quantité.%
"
Mise"en"culture"
!
*%Prélever%10"µl%d'urine%homogénéisée%au%moyen%de%l'%öse%calibrée%puis%décharger%l'öse%sur%un%rayon%de%la%boite%puis%isoler%
en%stries%serrées%perpendiculaires%à%ce%rayon%sur%toute%la%surface%et%ensemencer%:%systématiquement%:%%
%
1%une%gélose"CLED,"une"gélose"CPS":"incubation%24h,%à%37°C%
%
CAS"PARTICULIERS%:%ensemencer%en%plus%:%
%
1%%%%%si%Présence%de%Bacilles"à"Gram"+"type"Corynébactéries%
Ensemencer%en%plus%%une%Chocolat%(CO2)%et%une%%gélose%au%%sang%%(Anaérobiose)%
Garder%toutes%les%boîtes%48%H%
%
Cette%culture%est%réalisée%pour%mettre%en%évidence%[Link]%qui%pousse%lentement%sur%milieu%enrichi.%
%%
%
%
%
%
%
%
DEUXIEME"JOUR "
%
Lecture"des"cultures"
%
1"D"Milieu"CLED% :""
%
% a)"Numération"des"germes"totaux%%%
%
→ ""Nombre"de"UFC"/ml"
L’interprétation%doit%tenir%compte%de%l’aspect%monomicrobien%ou%polymicrobien%de%la%culture,%de%la%leucocyturie,%du%
contexte%clinique,%de%l’âge,%du%service%clinique%et%des%antériorités.%
%
Les%pathogènes%impliqués%:%
%
groupes" espèces" Taux%de%bactériurie%
significative%
UFC/ml%%
Groupe"1" [Link]%% %
pathogènes%habituels% [Link]% 3
10 %
Groupe"2" Proteae,.Klebsiella,.spp,.[Link],.[Link],. %
responsable%d’infections%
nosocomiales%
[Link],.[Link],.Enterococcus.
spp,.[Link]%
104%
Groupe"3" [Link],%SCN%sauf%[Link],.Acinetobacter. %
pathogènes%si%isolés%en% spp,.[Link],%autres%Pseudomonaceae%Candida,. >%105%
grande%quantité% spp%

Groupe"4" Lactobacilles,%Streptocoques%alpha1hémolytiques,% %
contaminants%sauf%si% [Link],%[Link],%
isolés%de%ponction%sus1 Corynébactéries%(%sauf%C..urealyticum)%
pubienne% "
%
%