Formation sur les animaux en recherche
Formation sur les animaux en recherche
Module de formation du CCPA sur : les animaux de laboratoire utilisés en recherche biomédicale
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Notes explicatives
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Notes explicatives
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Notes explicatives
Modèles expérimentaux
Il s’agit de modèles chez lesquels les scientifiques reproduisent expérimentalement une affection ou une
maladie. Par exemple, la streptozotocine est une substance chimique qui permet de provoquer le diabète
en endommageant les cellules productrices d'insuline dans le pancréas; il est également possible de provo-
quer un certain type de cancer à l'aide d'un cancérogène chimique ou de déclencher un accident vasculaire
cérébral de façon chirurgicale.
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Modèles négatifs
Certains animaux sont résistants à une affection ou
une maladie donnée. En étudiant les causes de cet
état, on peut trouver des indices sur la résistance à la maladie et ses fondements physiologiques. Par exemple,
certaines souches de souris sont résistantes à certains agents infectieux tandis que d'autres y sont sensibles.
Modèles orphelins
Il s’agit de modèles animaux présentant des affections apparaissant naturellement chez un animal et pour
lesquelles il n'existe pas d'équivalent chez l'humain. Autrefois, la tremblante du mouton entrait dans cette
catégorie, mais cette maladie constitue maintenant un modèle utile pour l'étude des encéphalopathies spon-
giformes humaines dont on entend si souvent parler (ESB ou « maladie de la vache folle » ainsi que de l'en-
céphalopathie des cervidés qui touche les cerfs).
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données scientifiques actuelles, significativement moins élevé, comme chez certains invertébrés, et ce, avant
de décider d'employer des animaux dans ses travaux.
L'utilisation d'un modèle approprié peut être considérée comme une solution de réduction lorsque :
• le modèle est validé et permet de répondre aux objectifs de la recherche ou de fournir une valeur prédi-
cative pour un point limite d'intérêt
• le modèle a fait l'objet d'une caractérisation complète, de sorte que tous les aspects du cycle de vie de
l'animal et leur incidence potentielle sur l'expérimentation sont définis (par exemple, pour s'assurer que
l'animal vive suffisamment longtemps pour compléter l'expérimentation ou pour connaître si la crois-
sance rapide d'un jeune animal est appropriée comme modèle pour simuler une maladie chez l'adulte
humain)
• les installations de recherche sont en mesure d'héberger adéquatement les espèces sélectionnées et de
permettre de leur donner des soins convenables, y compris de répondre aux besoins comportementaux
et sociaux des espèces en question
• l’évaluation du bien-être des espèces par des personnes compétentes peut être effectuée et comprend les
aspects de la connaissance de la douleur et de sa prise en charge chez les espèces en question
• des espèces produites spécifiquement pour la recherche, l'enseignement ou les tests sont employées plu-
tôt que des animaux capturés à l'état sauvage
L'espèce et le modèle semblant convenir le mieux à une recherche donnée peuvent être identiques à ceux
qui ont déjà été sélectionnés par d'autres chercheurs pour des travaux du même type. Cependant, comme
le nombre de modèles animaux créés, les nouvelles mutations spontanées et les animaux génétiquement
modifiés ne cessent de croître, tous les facteurs devront être pris en compte par le chercheur afin de choisir
le meilleur modèle animal pour son projet de recherche.
Certains des facteurs qui peuvent influencer le choix du modèle animal effectué par le chercheur incluent :
• les modèles naturels par opposition à des modèles expérimentaux. Les modèles naturels et artificiels de
maladie peuvent être utiles selon les objectifs de l'étude envisagée
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• la disponibilité de l'espèce
• le nombre nécessaire pour que les résultats de la recherche soient statistiquement valides
• le nombre de sujets requis en fonction des critères de sexe et d’âge la durée de vie de l'animal employé
comme modèle
• l’expertise en entretien des animaux, car certains modèles nécessitent des soins spéciaux en plus d’un
type d’hébergement particulier
Parmi tous ces facteurs, il y a des considérations de nature scientifique et des aspects purement pratiques,
mais tous ces points revêtent une certaine importance pour le succès du programme de recherche.
Festing M.F. (2010) Improving toxicity screening and drug development by using genetically defined strains.
Methods in Molecular Biology 602: 1-21.
Festing M.F.W. et Altman D.G. (2002) Guidelines for the Design and Statistical Analysis of Experiments
Using Laboratory Animals. Institute for Laboratory Animal Research Journal 43(4): 244-258.
Johnson P.D. et Besselsen D.G. (2002) Practical Aspects of Experimental Design in Animal Research. Institute
for Laboratory Animal Research Journal 43(4):202-206.
Lignes directrices du CCPA sur : la révision de protocoles d'utilisation d'animaux d'expérimentation (1997). Visitez
le site Web du CCPA au [Link] pour consulter ce document de lignes directrices.
Shaw R., Festing M.F.W., Peers I. et Furlong L. (2002) Use of factorial designs to optimize animal experiments
and reduce animal use. Institute for Laboratory Animal Research Journal 43(4):223-232.
Wood M.W. et Hart L.A. (2008) Selecting appropriate animal models and strains: making the best use of re-
search information and outreach. Alternatives to Animal Testing and Experimentation 14:303-306.
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Ressources et références
additionnelles :
Lipman N.S. et Perkins S.E. (2002). Factors that May
Influence Animal Research. Dans : Laboratory Ani-
mal Medicine, 2e éd. (Fox J.G., Anderson L.C., Loew F.M. and Quimby F.W., éd.) Orlando FL: Academic Press,
Chaptire 29. p. 1143-1184.
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• la constitution génétique
• la flore microbienne
• les maladies
2. Constitution génétique
Une considération importante concerne la constitution génétique de l’animal. Les animaux proviennent-ils
de lignées endogames ou exogames? À la base, tous les animaux de lignées endogames sont génétiquement
identiques, mais il est important de comprendre qu’il peut exister des différences subtiles entre les animaux
de même lignée qui proviennent de fournisseurs différents. La plupart du temps, on préfère les animaux
provenant de lignées endogames plutôt que ceux de lignées exogames, car la diversité génétique réduite si-
gnifie qu’un nombre d’animaux moindre est nécessaire pour que les résultats de la recherche soient statis-
tiquement valides. Par contre, les animaux de lignées endogames ont tendance à être plus petits et moins
robustes que les animaux de lignées exogames.
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Notes explicatives
Est-ce que les animaux sont génétiquement modifiés? La modification génétique peut avoir une incidence
non seulement sur le gène étudié, mais elle peut également modifier le phénotype de l’animal de façon inat-
tendue et affecter les résultats de la recherche.
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maux ayant des acariens et présentant des signes graves de maladie, comme la dermatite, ne peuvent être
utilisés en recherche. Par exemple, les souris peuvent avoir une réaction accrue des lgE, une augmentation
de la formation d’amyloïdes secondaires, de l’hypoalbuminémie et une baisse du taux d’hémoglobine
moyen.
Les modèles immunodéficients ou immunocompromis (p. ex. les souris nudes (nues) ou à immunodéficience
combinée grave) sont très sensibles aux organismes habituellement non pathogènes comme Corynebacterium
spp. Pour éviter de telles infections, il est essentiel d'employer des cages et des procédures de soins spéciales.
Chez ces modèles particuliers, non seulement les infections accidentelles peuvent déclencher des maladies
graves, mais elles portent également atteinte à la réponse immunitaire de l'animal pendant la recherche.
Maladies subcliniques
Cependant, les maladies affectant les animaux de laboratoire sont plus souvent subcliniques ou silencieuses,
ce qui signifie que l’animal peut sembler être en bonne santé malgré la présence d’agents infectieux. Ces in-
fections subcliniques peuvent néanmoins brouiller les résultats de la recherche en modifiant la réaction im-
munitaire, le métabolisme des médicaments, le comportement et l’état reproducteur du modèle animal.
Voici deux exemples d’infections silencieuses pouvant brouiller les résultats de recherche :
Exemple 1 :
Le parvovirus de la souris (MPV) est une infection subclinique ou silencieuse. Chez les souris ayant un sys-
tème immunitaire normal, l'infection peut durer jusqu'à six mois; en cas d'immunodéficience ou d'immu-
nosuppression, l'infection et l'excrétion du virus peuvent durer toute la vie de l'animal. Le MPV infecte de
façon persistante le tissu lymphoïde, notamment les lymphocytes T, et il modifie les réponses du système
immunitaire. Il peut également arriver que les lymphocytes T ne croissent pas bien in vitro. Les parvovirus
peuvent aussi nuire à la recherche sur le cancer, car le pouvoir cytolytique des lymphocytes T peut être
amoindri chez les souris infectées.
Exemple 2 :
La pasteurellose est une maladie chez le lapin et qui est provoquée par l’agent pathogène Pasteurella multocida.
Chez de nombreux lapins infectés, la maladie se traduit par des écoulements nasaux, des conjonctivites ou
des abcès. Cependant, la bactérie peut être présente dans les voies respiratoires supérieures de lapins en bonne
santé sans que l’animal présente de signe visible. Ces porteurs asymptomatiques peuvent excréter l’agent pa-
thogène et infecter d’autres lapins. Lorsqu’on soumet les lapins infectés mais asymptomatiques à un stress,
par exemple lors de manipulations expérimentales, ils peuvent subitement devenir malades ou même mourir
de façon inattendue. Pour les chercheurs, ce sont des pertes imprévues qui entraînent un gaspillage de temps
et d’argent en plus de représenter un important coût éthique. L’utilisation de lapins exempts d’organismes pa-
thogènes spécifiques non porteurs de cette maladie peut être considérée comme un exemple de réduction.
Comme le montrent les quatre exemples précédents, il est évident que les résultats d'une étude peuvent
être brouillés de façon significative par les infections, y compris les infections subcliniques ne produisant
aucun signe visible. Les nombreux efforts entrepris à divers niveaux pour éliminer ces infections ont gran-
dement contribué à réduire cette variable nuisible dans les recherches biomédicales s'appuyant sur des mo-
dèles animaux.
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Notes explicatives
Module de formation du CCPA sur : les maladies infectieuses (2010). Visitez le site Web du CCPA au [Link]
pour consulter ce module de formation.
• la température de la pièce
• l’humidité relative
• la ventilation
• l’éclairage
• le bruit
• la nourriture et l’eau
• la litière
Conseil canadien de protection des animaux (1993) Le milieu. Dans : Manuel sur le soin et l’utilisation des ani-
maux d’expérimentation, vol. 1, 2e éd. Ottawa ON : CCPA, Chaptire 29 p. 56-70. Visitez le site Web du CCPA
au [Link] pour consulter ce manuel.
Gonder J.C. et Laber K. (2007) A renewed look at laboratory rodent housing and management. Institute for
Laboratory Animal Research Journal 48 (1):29-36.
Hessler J.R. et Hoglund U. (2003) Laboratory Animal Facilities and Equipment for Conventional, Barrier,
and Containment Housing Systems. Dans : Handbook of Laboratory Animal Science, vol. 1, 2e éd. (Hau J. et
Van Hoosier G.L. Jr., éd.). Boca Raton FL: CRC Press, Chapitre 8, p. 127-172.
Johnson N.A. et Nevalainen T. (2003) Impact of the Biotic and Abiotic Environment on Animal Experiments.
Dans : Handbook of Laboratory Animal Science, vol. 1, 2e éd. (Hau J. et Van Hoosier G.L. Jr., éd.). Boca Raton
FL: CRC Press, Chapitre 13, p. 311-326.
Lipman N.S. (2007) Design and Management of Research Facilities for Mice. Dans : The Mouse in Biomedical
Research, vol. 3, 2e éd. (Fox J.G., Barthold S.W., Davisson M.T., Newcomer C.E., Quimby F.W. et Smith A.L.,
éd.). New York NY: Academic Press, Chapitre 9, p. 271-320.
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Notes explicatives
Pour certains types d'études, il peut être nécessaire de mesurer les paramètres à l'intérieur des cages (mi-
croclimat) et non seulement ceux de la salle où elles se trouvent. La température à l’intérieur d’une cage
peut être beaucoup plus élevée que la température dans cette salle, en particulier si la cage héberge un grand
nombre d’animaux et qu’elle est placée sur le haut du support à cages. La température dans les cages à mi-
croisolation statiques sera probablement plus élevée que celle dans les cages ouvertes ou dans les cages ven-
tilées individuellement.
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Dans une animalerie, la ventilation, les concentrations d'ammoniac et de CO2 et la circulation d'air peuvent
accuser des écarts importants d'un endroit à l'autre. Il est possible d'éviter les biais dus à ces facteurs en at-
tribuant un emplacement aléatoire aux animaux des différents groupes de traitement sur le support à cages
ou dans la pièce.
4. Éclairage
Chez les animaux, l'éclairage revêt plusieurs aspects : le cycle circadien, l’intensité de la lumière et la lon-
gueur d'onde.
Il est nécessaire que le cycle jour-nuit, ou circadien, soit commandé par une minuterie pour assurer un
rythme diurne constant du métabolisme des animaux. Même l’exposition à de courtes périodes d’éclairage
pendant la phase d’obscurité peut avoir une incidence sur le rythme diurne et avoir des répercussions sur
le rendement reproductif de l’animal et sur son métabolisme, ce qui peut avoir une incidence sur les résultats
de l’étude. Par exemple, l’exposition à un faible éclairage pendant la phase d’obscurité peut favoriser le dé-
veloppement de tumeurs chez les rats.
Le matin, l'allumage soudain de l'éclairage a des répercussions sur la concentration de certaines hormones,
et ces effets peuvent se prolonger plusieurs heures. L'emploi de systèmes reproduisant l'aube et le crépus-
cule, c'est-à-dire créant une variation graduelle de l'intensité lumineuse entre les phases d'éclairage et d'obs-
curité est encouragé.
L'intensité et la longueur d'onde de la lumière ont également une certaine importance. Les rongeurs albinos
en particulier subissent des lésions de la rétine lorsque l'intensité de l'éclairage dans la cage dépasse 300
lux. Il a été démontré que la longueur d’onde à laquelle sont exposées les souris influence le poids de leurs
organes ainsi que la durée de leur cycle œstrien.
L’intensité lumineuse à l’intérieur d’une cage dépend de facteurs tels le type de cage, la proximité de la cage
à la source de la lumière, la présence de dispositifs d’enrichissement de l’environnement opaques comme
des tunnels ou des maisons, ainsi que la durée de la vie des ampoules et la réflectivité des surfaces de la
salle. Dans les études où l'intensité de l'éclairage risque d'influencer les résultats, on peut tenter d'éviter les
biais de cette nature en attribuant aux animaux des différents groupes de traitement un emplacement aléa-
toire sur le même support à cages.
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Notes explicatives
Memarzadeh F., Harrison P.C., Riskowski G.L. et Henze T. (2004) Comparison of Environment and Mice in
Static and Mechanically Ventilated Isolator Cages with Different Air Velocities and Ventilation Designs.
Contemporary topics in laboratory animal science 43(1):14-20.
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Notes explicatives
De l’eau conforme aux normes pour la consommation humaine doit être offerte aux animaux de laboratoire.
Il ne s’agit ici que d’une exigence minimale étant donné qu’il existe d’importantes différences dans la qualité
de l’eau potable provenant de sources différentes. L’eau peut contenir des impuretés, notamment des bac-
téries, des métaux lourds et des traces de produits chimiques comme les pesticides, ce qui peut avoir une
incidence sur la recherche. En outre, les quantités de ces contaminants peuvent varier selon les saisons ou
les conditions météorologiques locales. C’est pour cette raison que la purification de l’eau par osmose in-
versée est en voie de devenir la norme. Dans certaines animaleries, l’eau est traitée par acidification ou ja-
vellisation pour éliminer la prolifération des bactéries. Ces deux méthodes peuvent influer sur les résultats
de la recherche. Par exemple, l’acidification de l’eau peut causer le lessivage de produits chimiques contenus
dans les bouchons de caoutchouc utilisés pour les bouteilles d’eau et les sous-produits de la javellisation
peuvent modifier les paramètres hématologiques des animaux.
7. Litière
Dans la plupart des animaleries, les procédures normalisées de fonctionnement (PNF) contiennent des dis-
positions relatives à la litière qui devrait être régulièrement fournie aux animaux. Le chercheur principal
doit préciser s'il y a des exigences particulières concernant la litière.
On connaît bien le phénomène d'activation des systèmes d'enzymes hépatiques (enzymes P450) par les ré-
sines contenues dans les litières de bois mou (p. ex., les copeaux de cèdre). Cela peut brouiller les résultats
si l'étude porte sur l'activité des enzymes hépatiques.
Lauer A.M., May B.J., Hao Z.J. et Watson J. (2009) Sounds levels in modern rodent housing rooms are an
uncontrolled environmental variable with fluctuations mainly due to human activities. Laboratory Animals
38(5):154-160.
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2. Hébergement
Cages
L'espace dont dispose chaque animal et le nombre d'animaux par cage peuvent avoir une influence sur la
réaction des animaux lors d’une expérimentation. Tous les animaux utilisés pour une étude donnée de-
vraient être placés dans des cages identiques, de sorte que l'espace dont chacun d'eux dispose et le nombre
d'animaux par cage demeurent constants au cours de l'étude. La conception de la cage est également un
facteur important, car il existe des différences significatives entre les différents types de cages (les cages ou-
vertes, les cages à microisolation statiques ou les cages individuellement ventilées en ce qui concerne la
température, l’humidité et la qualité de l’air, ainsi que l’intensité du bruit et des vibrations).
Des études ont montré que le nombre de rongeurs par cage avait un effet sur leur niveau de stress (l’isole-
ment ou la surpopulation) et leur croissance. De façon générale, les petits rongeurs devraient être hébergés
en petits groupes pour réduire le stress et créer un enrichissement social. Si les animaux doivent être héber-
gés dans des cages individuelles aux fins de la recherche, cet aspect devrait être justifié par des arguments
scientifiques auprès du comité de protection des animaux de l’établissement.
Lawlor M. (1990) The size of rodent cages. Dans : Guidelines for the Well-Being of Rodents in Research. (Guttman
H.N., éd.).Bethesda MD : Scientists Center for Animal Welfare. p. 19-28.
Swallow J., Anderson D., Buckwell A., Harris T., Hawkins P., Kirkwood J., Lomas M., Meacham S., Peters
A., Prescott M., Owen S., Quest R., Sutcliffe R. et Thompson K. (2005) Guidance on the transport of laboratory
animals: report of the Transport Working Group established by the Laboratory Animal Science Association
(LASA). Laboratory Animals 39(1):1-39.
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Notes explicatives
• Module de formation du CCPA sur : l’enrichissement du milieu (2003). Visitez le site Web du CCPA au
[Link] pour consulter ce module de formation.
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Notes explicatives
Le mode de manipulation d'un animal peut modifier son comportement ou sa physiologie et, par consé-
quent, influencer sa réaction dans une étude. On peut citer l'exemple d'une étude de manipulation menée
chez les porcs. En 1987, Hemsworth et ses collaborateurs ont publié un article présentant une étude com-
parative des réactions observées chez les porcs lors de trois types de manipulations (manipulations agréa-
bles, manipulations désagréables et manipulations réduites au minimum). Les porcs ayant fait l’objet de
manipulations agréables s'approchaient plus volontiers des humains. Chez les femelles ayant subi des ma-
nipulations agréables, l'âge du premier œstrus et la réceptivité sexuelle au moment de la reproduction n'était
pas les mêmes que chez les deux autres groupes; de plus, elles présentaient un taux de conception plus
élevé. Fait à noter, bien que cela ne représente pas un résultat statistiquement significatif, les mâles ayant
fait l’objet de manipulations agréables avaient des testicules plus gros que leurs congénères des autres
groupes. Cette source de variation sera réduite si le personnel de soin aux animaux, les techniciens en re-
cherche et les chercheurs manipulent toujours les animaux de façon consistante.
Le chercheur doit comprendre les opérations hebdomadaires exécutées dans l'animalerie. Dans de
nombreuses installations, le nettoyage des cages a lieu à des journées précises. Si la prise d'échantillons est
effectuée immédiatement après que les animaux aient été dérangés par le nettoyage des cages, les résultats
peuvent être brouillés. De plus, les opérations courantes sont généralement différentes la fin de semaine et
les jours fériés par rapport aux jours de semaine, ce qui peut affecter la réaction des animaux si la prise
d'échantillons a lieu ces jours-là.
Duke J.L., Zammit T.G. et Lawson D.M. (2001) The effects of routine cage-changing on cardiovascular and
behavioral parameters in male Sprague-Dawley rats. Contemporary topics in laboratory animal science 40(1):17-
20.
Hemsworth P.H., Barnett J.L. et Hansen C. (1987) The influence of handling by humans in the behaviour,
reproduction and corticosteroids of male and female pigs. Applied Animal Behavioural Science 17(3): 245-252.
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Notes explicatives
Pour chaque procédure de recherche, il est recommandé de rédiger des PNF que toutes les per-
sonnes concernées devront respecter et qui viseront à uniformiser le mieux possible toutes les
manipulations est recommandée.
Les manipulations courantes des animaux, comme le déplacement des rats dans des cages propres, peuvent
provoquer des changements cardio-vasculaires et des comportements transitoires bien que significatifs. Le
chercheur et le personnel de soin aux animaux devraient être conscients que de telles manipulations peuvent
brouiller les résultats recueillis peu de temps après.
Pendant la période de conditionnement, les animaux devraient être soumis aux opérations courantes qui feront
partie de l'expérimentation subséquente. Cet aspect est particulièrement important si l'étude nécessite l'emploi
de dispositifs spéciaux de contention tels que des colliers ou des revêtements munis de cathéters (p. ex., des
rats reliés à des dispositifs d'enregistrement de l'activité cérébrale et des moutons placés dans une cage à mé-
tabolisme). Pour des raisons de bien-être animal ainsi que des raisons scientifiques, il importe d’ha-
bituer l'animal aux manipulations et aux appareils de contention avant le début du projet.
Récompenser l’animal pour un bon comportement constitue une excellente façon d'encourager l'animal à se
montrer coopératif. Les rats adorent les friandises comme les Gummi Bears et les Fruit Loops. Il peut également
s’agir de donner un biscuit à un chien, une friandise à un chat ou une gâterie spéciale à un primate non humain.
Bien entendu, il ne faut pas que ces récompenses nuisent au déroulement du projet de recherche.
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Notes explicatives
Module de formation du CCPA sur : l’analgésie (2003). Visitez le site Web du CCPA au [Link] pour consul-
ter ce module de formation.
Module de formation du CCPA sur : la douleur, la détresse et les points limites (2010). Visitez le site Web du CCPA
au [Link] pour consulter ce module de formation.
• Module de formation du CCPA sur : la douleur, la détresse et les points limites (2010)
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Notes explicatives
• veiller à ce que le suivi de l'état de santé soit effectué conformément aux règles de l'établissement
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Notes explicatives
• veiller à ce que le suivi de l'état de santé soit effectué conformément aux règles de l'établissement
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Notes explicatives
Diapositive 34 En bref
L’importance d’atteindre des objectifs à la fois scien-
tifiques et éthiques, soit l'obtention de données
scientifiques reproductibles avec le plus petit nom-
bre possible d'animaux, a été soulignée dans ce mo-
dule de formation. Les modèles animaux doivent
être soigneusement sélectionnés selon le principe
des Trois R.
Tous les membres de l’équipe de recherche et de soin aux animaux ont un rôle à jouer dans la reconnaissance
et le contrôle de ces variables. Les chercheurs et les autres utilisateurs d’animaux devraient s’efforcer d’at-
teindre leurs objectifs scientifiques en adoptant les meilleures normes possible de bien-être animal.
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