Exercice 01 :
Le génome d’un bactériophage à ADN double brin a été isolé et sa séquence nucléotidique a
été déterminée (5000 paires de bases). Afin d’avoir plus de renseignement sur la structure de
son génome, l’ADN du bactériophage est digéré par plusieurs enzymes de restriction et les
fragments obtenus sont analysés par électrophorèse en gel d’agarose suivi d’une coloration au
bromure d’éthidium (pistes 1-5, figure 1).
Figure 1: Electrophorèse en gel d’agarose des fragments de restriction obtenus après digestion
de l’ADN du bactériophage. Piste 1: témoin, ADN non digéré ; piste 2 : EcoRI ; piste 3 : BamHI;
piste 4 : HinDIII ; et piste 5 : PvuII. NB : Tous les fragments obtenus sont présents sur le gel.
- Que pouvez-vous dire sur la structure de ce génome ? Justifiez votre réponse en interprétant
tous les résultats expérimentaux obtenus à l’issue des différentes réactions de digestion
effectuées.
- Donnez le nombre de fragment(s) que l’on obtiendrait lors des doubles digestions décrites
dans le tableau ci-dessous :
Exercice 2
Un fragment d’ADN de 1 kb est digéré par EcoR I seule, puis par EcoR V seule, enfin par les
2 enzymes ensembles. Le profil électrophorétique des produits de digestion donne :
EcoRI : 800pb 200pb
EcoRV : 700pb 300pb
EcoRI+EcoRV : 500pb 300pb 200pb
Exercice 03:
Une maladie génétique est associée à une mutation d’un gène de 3,5Kb et n’apparait qu’en cas
de mutation bi-allélique. La mutation crée un nouveau site de coupure d’une enzyme de
restriction (E) qui donne 2 fragments avec l’allèle muté (figure).
a- donner la carte restriction des deux allèles pour un malade ?
b- Donner le résultat du RFLP des trois génotypes homozygote sain, homozygote malade et
hétérozygote ?
c- Même question pour un individu porteur sain ?