trinôme: Guirat Ilef
Boussetta Iheb
Ben Hamouda Ines
BIO3 (GROUPE3)
chromatographie sur papier
objectif:
séparation des analytes 𝐻 2𝑂 et 𝑁𝑎𝐶𝑙 qui dépend de l’affinité par rapport à la
phase stationnaire et de la force d’élution de la phase mobile
principe:
La chromatographie sur papier est une méthode physico-chimique analytique
qui permet de séparer des différents constituants contenant dans un
échantillon
elle consiste à faire migrer les constituants à séparer à une phase stationnaire
immobile (papier whatman) à l’aide d’une phase mobile liquide
explication:
l’échantillon est adsorbé sur le papier, les molécules interagissent avec la
phase stationnaire. Elles ont tendance à rester dans le même endroit: c’est la
force de rétention et le solvant ou l’éluant monte tout le long de papier, il
rencontre l’échantillon et il l'entraîne
les substances migrent à différentes vitesses selon l’interaction de la phase
stationnaire
c’est une méthode QUALITATIVE
les substances de l’échantillon peuvent être identifiées en calculant les
𝑑𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑒 𝑝𝑎𝑟𝑐𝑜𝑢𝑟𝑢𝑒 𝑝𝑎𝑟 𝑙'é𝑐ℎ𝑎𝑛𝑡𝑖𝑙𝑙𝑜𝑛
valeurs de rapport frontal= 𝑡𝑟𝑎𝑗𝑒𝑡 𝑐ℎ𝑟𝑜𝑚𝑎𝑡𝑜𝑔𝑟𝑎𝑝ℎ𝑖𝑞𝑢𝑒
mode opératoire:
1. Tirer un trait au crayon gris à 1 cm du bas (ligne de base) d’haut
(ligne de fond) de papier
whatman
2. Déposer sur la ligne des points de couleur espacés d'un 1 cm
3. Mettre moins de 1 cm d'eau au fond du bécher
4. Laisser tremper le papier dans l'eau en le tenant bien à la verticale.
5. séparation
6. Révélation: Attendre 15 minutes, le temps de voir les couleurs se
séparer.
7. Sortir le papier (le chromatogramme) du bac et laisser sécher
(verticalement).
8. Mesurer la distance parcourue par l'eau et NaCl
9. Mesurer la distance parcourue par les diverses substances
10. Caractériser chaque substance par la relation:
𝑑𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑒 𝑝𝑎𝑟𝑐𝑜𝑢𝑟𝑢𝑒 𝑝𝑎𝑟 𝑙'é𝑐ℎ𝑎𝑛𝑡𝑖𝑙𝑙𝑜𝑛
D= 𝑡𝑟𝑎𝑗𝑒𝑡 𝑐ℎ𝑟𝑜𝑚𝑎𝑡𝑜𝑔𝑟𝑎𝑝ℎ𝑖𝑞𝑢𝑒
on va utiliser 3 étalons:
-étalon(1): colorant E102 jaune
-étalon(2): colorant E131 bleu
-étalon(3): colorant E122 rouge
résultats:
l’eau a subi une séparation meilleure que NaCl
échantillon 1: ROUGE/ORANGE
échantillon 2: BLEU/JAUNE/ORANGE
NaCl eau
𝑅 0.9 0.95
𝑓102
𝑅 0.33 0.85
𝑓122
𝑅 0.9 0.97
𝑓131
𝑅 é𝑐ℎ1
rouge: 𝑅 𝑓1/𝑟
=0.5 rouge:𝑅 𝑓1/𝑟
=0.7
orange:𝑅 𝑓1/𝑜
=0.7 orange: 𝑅 𝑓1/𝑜
=0.88
𝑅 é𝑐ℎ2
bleu:𝑅 𝑓2/𝑏
=0.72 bleu:𝑅 𝑓2/𝑏
=0.97
rouge:𝑅 𝑓2/𝑟
=0.37 rouge:𝑅 𝑓2/𝑟
=0.85
jaune:𝑅 𝑓2/𝑗
=0.57 jaune:𝑅 𝑓2/𝑗
=0.9