République Algérienne Démocratique et Populaire

Ministère de l’Enseignement Supérieur et de la Recherche Scientifique

École Nationale Supérieure des Technologies Avancées

Département du second cycle

Module:
MBE
TP 𝑵° 1:
Le Microscope optique

Binôme:
Alouat Rania & Keddad Meriem
Groupe:
TE-1

1
 [Link] :
Le microscope optique est un outil clé en microbiologie, utilisé pour observer et
identifier des micro-organismes invisible à l’œil nu, comme les bactéries, les levures et
les protozoaires. Grace à un système de lentilles qui amplifie la taille des objets observés,
le microscope offrent une résolution suffisante pour analyser les détails structurels des
cellules.

B. But du TP :
 Maîtriser la manipulation du microscope optique.
 Observer et identifier la morphologie des micro-organismes.

C. Matériels utilisés :
o Microscope optique

o Les micropipettes :

La micropipette est un instrument de laboratoire indispensable

pour mesurer et transférer des volumes précis de liquide en
généralement microlitres. La micropipette est un instrument de
Elle possède un bouton pour régler le volume, un écran
d’affichage, et un bouton de pipetage (piston)pour aspirer et
expulser le liquide. Un cône permet de fixer un embout jetable, et
un bouton d’éjection facilite le retrait de l’embout pour éviter la
contamination.

o Lames et lamelles :

Les lames : sont des supports en verre pour poser les échantillons
en microscopes, tandis que les lamelles sont des fines plaques qui
couvrent l’échantillon pour le stabiliser et le protéger pendant
l’observation.

2
 D. Description des échantillons observés :
 Penicilium :
Le genre Penicillium comprend environ 227 espèces de champignons filamenteux du
phylum des Ascomycètes, définies principalement par leurs caractéristiques
morphologiques. Ces champignons, très courants dans l'environnement, sont polyphagies
et contribuent à diverses dégradations. Ils se trouvent naturellement dans le sol, les
denrées alimentaires, et les matières organiques en décomposition.

Description morphologique :

Les Penicillium se caractérisent par leur

organisation en forme de pinceau. Leur
thalle est composé de filaments mycéliens
septés et hyalins, portant des conidiophores
qui se terminent par un pénicille. Les
conidiophores peuvent être isolés ou
groupés, et les phialides, disposées en
verticilles à l’extrémité des conidiophores,
donnent naissance à des conidies. Ces
conidies sont des spores unicellulaires aux
formes variées, lisses ou rugueuses.

Pathogénie des Penicillium :

Les Penicillium sont des contaminants de laboratoire rarement associés à des

infections. Ils peuvent causer des infections par inhalation de spores, entraînant des
problèmes pulmonaires et des affections telles que la kératomycose et l'onychomycose.
Penicillium marneffei peut provoquer des infections systémiques chez les personnes
immunodéprimées.

3
 Espaces utiles :

Des nombreuses espèces de Penicillium sont utilisées dans l’industrie pour la

fabrication de fromages, de salaisons et pour la production de métabolites d’intérêt,
notamment des substances antibiotiques.

Taxonomie :

Règne Division Classe Ordre Famille Genre

Fungi Ascomycota Eurotiomycetes Eurotiales Trichomaceae Pénicillium

 Levure de bière :
La levure de bière est une levure (un champignon microscopique) appelée Saccharomyces
cerevisiae, très proche de la levure de boulanger. C’est un organisme unicellulaire de la classe
des Saccharomyces.

Description morphologique :

La levure de bière, principalement Saccharomyces

cerevisiae, est une levure unicellulaire de forme
sphérique ou ovoïde, avec un diamètre d'environ 5 à 10
micromètres. Elle se caractérise par une paroi cellulaire
épaisse et rigide, composée de glucanes, de
mannoprotéines et de chitine, ce qui lui confère une
résistance aux conditions de brassage. Au microscope,
ses cellules apparaissent souvent en bourgeonnement,
un processus par lequel elle se reproduit de manière
asexuée. Ce bourgeonnement forme une petite
excroissance qui se développe avant de se détacher,
donnant naissance à une nouvelle cellule. En milieu de
culture, elle produit des colonies blanchâtres et
crémeuses.

4
 Taxonomie :

Règne Division Classe Ordre Famille

Fungi Ascomycota Saccharomycetes Saccharomycetales Saccharomycetaceae
Famille Genre
Saccharomycetaceae Saccharomyces
Espèce
Saccharomyces cerevisiae

Atouts de la levure :
La levure de bière, Saccharomyces cerevisiae, est très appréciée pour ses capacités de
fermentation, particulièrement dans les industries de la brasserie et de la boulangerie. Elle
transforme les sucres en alcool et en dioxyde de carbone, un processus clé dans la production de
boissons alcoolisées et dans le levage des pâtes en boulangerie. En plus de son rôle fermentaire,
cette levure est riche en protéines, vitamines B, et minéraux, ce qui en fait un complément
nutritionnel bénéfique pour la santé. Sa tolérance à diverses conditions, comme les variations de
température, de pH, et les concentrations modérées d'alcool, en fait un organisme robuste et
polyvalent dans les industries de la fermentation et de la biotechnologie.

5
 [Link] du microscope optique :

Le microscope est un instrument optique qui donne une image grandie d’un
objet en général transparent. Il est constitué d’un banc optique dont une partie se
trouve devant l’objet : l’éclairage, l’autre partie derrière l’objet pour
l’observation. Ce banc doit être rigide et posséder tous les organes de centrage des
pièces optiques.

Les utilisations :
Voici quelques utilisations principales :

1. Biologie et médecine : Observation des cellules, des tissus et des micro-

organismes pour le diagnostic et la recherche.

2. Microbiologie : Identification et étude des bactéries, virus et autres agents

pathogènes.

3. Géologie : Analyse des fines structures minérales dans les roches et les sols.

4. Sciences des matériaux : Observation de la structure des matériaux,

identification des défauts et de la composition des surfaces.

5. Criminalistique : Analyse d’échantillons pour des preuves (fibres, cheveux,

résidus) dans les enquêtes.

6. Industrie pharmaceutique : Contrôle de qualité des composants des

médicaments et étude des cultures cellulaires.

7. Botanique : Étude des cellules végétales et des structures comme les feuilles et
les racines.

8. Éducation : Utilisé dans l’enseignement pour apprendre les bases de

l’observation [Link] microscope optique est donc essentiel dans de
nombreuses sciences et industries pour l’analyse et la recherche.

6
 Les composantes :
1
2
Oculaire 2
3
Image intermédiaire se forme ici 15 4
14
13
Objectif
12
échantillon 11 5
10
7 6
9
Une image plus grande apparait dans l’œil de l’observateur
8
N° composant fonction
1 Oculaire La lentille par laquelle on observe, qui agrandit encore l’image
formé par l’objectif
2 Tubulure Connecte la tête optique aux objectifs
3 Tête/Tube Partie supérieure ou se situe l’oculaire et qui maintient
l’alignement de l’image entre l’oculaire et les objectifs

4 Vis de blocage de la tête Stabilise la tête pour éviter tout mouvement

5 Vis macrométrique Réalise les premiers réglages de mise au point
(régler la distance entre l’objectif et l’échantillon)

6 Vis micrométrique Effectue les ajustements fins pour des détails précis
7 Sélecteur X-Y axe platine Permet de déplacer la platine horizontalement en X et Y pour
positionner l’échantillon.
8 Interrupteur+variateur Permet d’allumer la source de lumière et d’ajuster son intensité
pour un éclairage optimal
9 Lentille de champ Elargit le champ de vision pour une meilleure observation
10 Sélecteur d’ouverture du Ajuste la taille du faisceau lumineux pour contrôler la lumière sur
condensateur l’échantillon
11 Condensateur Dirige la lumière vers l’échantillon pour plus de clarté
12 Platine Supporte et positionne l’échantillon sous les objectifs
13 Valet Maintient l’échantillon fermement en place sur la platine
14 Objectif Fournit un premier agrandissement de l’image de l’échantillon
15 Tourellee Permet de changer les objectifs pour varier le groississement

7
 Procédure d’observation et de mise au point :

Voici les étapes nécessaires :

1. Préparation de l’appareil :

Installez le microscope sur une surface plane et stable ,et assurez-vous qu’il est bien
alimenté.

2. Préparation de l’échantillon :

Déposez une goutte ou un spécimen solide sur une lame propre, puis recouvrez-le
d’une [Link]-vous que l’échantillon est bien centré pour faciliter la mise en
point.

3. Ajustement de la platine :

Abaissez la platine à son niveau le plus bas en utilisant la vis macrométrique, puis
fixez la lame délicatement en ouvrant les valets de maintien, puis refermez-les pour
stabiliser l'échantillon

4. Réglage de la source lumineuse :

Adaptez l’intensité de la lumière pour que l'échantillon soit correctement éclairé.

5. Choix de l'objectif initial :

Sélectionnez un objectif à faible grossissement (4x) pour trouver et centrer

l’échantillon dans le champ de vision.

6. Première mise au point :

Approchez l’objectif de la lame en ajustant la vis macrométrique jusqu'à obtenir une

vue générale des détails de l’échantillon.

7. Affinage de l’image :

Utilisez la vis micrométrique pour optimiser la netteté de l’image obtenue.

8. Sélection d’un objectif à plus fort grossissement :

Si nécessaire, tournez la tourelle pour choisir un objectif de puissance supérieure

8
(40x …) afin de mieux visualiser les détails fins.

9. Réajustement lumière et mise au point :

Après chaque changement d’objectif, ajustez de nouveau l’éclairage et la netteté en

suivant les étapes précédentes.

10. Nettoyage et rangement final :

Nettoyez les lentilles et l’échantillon avec soin, éteignez l’appareil, puis rangez le
microscope en prenant les précautions nécessaires.

Ces étapes garantissent une observation microscopique précise et permettent de

préserver l’état de l’appareil pour un usage futur.

9
 [Link] des observations réalisées :
❖LE PENICILLIUM :

Grossissement «X4» :
À faible grossissement, on peut observer l'échantillon dans sa globalité.
Le Penicillium se présente sous forme d'une masse de filaments entrelacés,
appelés hyphes.

Grossissement «X10» :
À ce grossissement intermédiaire, on distingue davantage de détails dans
la structure du Penicillium. Les conidiophores, qui sont les structures
responsables de porter les spores, deviennent visibles. Toutefois, les spores
elles-mêmes restent trop petites pour être distinguées individuellement à ce
niveau d'observation

Grossissement «X40» :
Avec ce niveau de grossissement, les conidiophores apparaissent avec
plus de précision. On distingue également les conidies (spores) fixées à
leur extrémité.

Grossissement «X40» :
Avec ce niveau de fort grossissement, on peut distinguer les détails les
plus subtils. Les conidies se révèlent de manière plus précise, et les
caractéristiques morphologiques sont bien plus apparentes. On observe
une disposition régulière des conidies le long des conidiophores, ainsi
qu'une texture lisse ou rugueuse selon les spécimens. De plus, la forme et
la taille des conidies semblent uniformes, indiquant une maturation
homogène des spores.

10
❖La levure de bière:

Grossissement «X4» :
À faible puissance de grossissement, on peut observer l’échantillon en
entier. On distingue probablement un groupement de cellules de levure, qui
apparaissent généralement sous forme de petites sphères.

Grossissement «X10» :
Avec cette observation, des détails supplémentaires émergent. Les cellules
de levure deviennent plus nettes, et des structures comme les parois
cellulaires se révèlent.

Grossissement «X40» :
Ce grossissement permet de voir chaque cellule individuellement et en
détail. On est capable de percevoir les noyaux ainsi que d’autres éléments
internes des cellules.

Grossissement «X60» :
Avec un grossissement élevé, les détails les plus fins deviennent visibles.
On peut ainsi discerner les organites et diverses structures subcellulaires.

11
 [Link] :
❖LE PENICILLIUM :
Lors de l'observation microscopique du Penicillium, une structure complexe et
organisée est clairement visible. Les filaments mycéliens, ou hyphes, se présentent
sous forme de longues ramifications qui dessinent le réseau cellulaire de ce
champignon. Ces hyphes sont cloisonnés par des septa, ajoutant une segmentation
visible qui structure davantage l'organisation cellulaire. Les spores conidiennes sont
également remarquables, disposées en grappes à l'extrémité des conidiophores, avec
des formes rondes à ovales, caractéristiques de ce genre fongique. On observe aussi
une paroi cellulaire définie qui assure la protection et la rigidité des cellules,
soulignant l'adaptation de Penicillium à divers environnements. Cette analyse
détaillée de la morphologie du Penicillium permet de mieux comprendre ses rôles
dans des applications microbiologiques, qu’il s’agisse de sa fonction écologique dans
la décomposition de matières organiques ou de son utilisation dans la production
d'antibiotiques comme la pénicilline.

❖La levure de bière:

L'observation microscopique de Saccharomyces cerevisiae, communément appelée
levure de bière, a révélé ses cellules rondes caractéristiques et sa structure
morphologique unique. À travers ce grossissement, nous avons pu distinguer de
manière précise les parois cellulaires épaisses, qui jouent un rôle crucial dans la
protection de la cellule et dans la régulation de ses échanges avec l'environnement.
Les noyaux des cellules étaient également visibles, montrant l'organisation du
matériel génétique nécessaire pour les nombreuses fonctions métaboliques de la
levure. En plus des noyaux, d’autres organites essentiels, tels que les vacuoles et les
mitochondries, ont pu être identifiés, offrant un aperçu de la complexité biologique de
cette levure. Cette exploration détaillée de la morphologie de S. cerevisiae met en
lumière son importance dans des applications variées, notamment dans les industries
alimentaires pour la fermentation du pain et la production de levain, ainsi que dans
des recherches biotechnologiques et scientifiques où elle sert souvent de modèle pour
étudier des processus cellulaires fondamentaux.

12
 [Link] :

En conclusion, ce travail pratique a permis une première familiarisation avec le

microscope et les différents outils nécessaires pour des observations microscopiques
précises.

L'examen de Penicillium et de Saccharomyces cerevisiae a offert une

compréhension approfondie de leurs structures cellulaires distinctes, ces observations
nous ont permis d'identifier des éléments caractéristiques tels que les hyphes et
conidies pour Penicillium et les parois cellulaires, noyaux, et organites pour la levure
de bière.

Finalement, ce TP nous a ainsi aidés à développer des compétences essentielles en

microscopie tout en améliorant notre compréhension des structures microbiennes,
essentielles pour des applications futures en microbiologie .

13
 I.Références bibliographique :

[Link]

[Link]

[Link]
d-observation/

[Link]

[Link]
g%C3%A9om%C3%A9trique-Microscope-Optique.-[Link]

14