Uni vers ité Mohamed boudiaf-m’sila
Faculté des sciences
Département de microbiologie & biochimie
Niveau de 3 éme année Licence ANP
Technique physico-chimique d’analyses
Réalisé par:
1. AMROUNE AHLAM
2. TAHMI IMANE
3. BONAB AYA YESSMINE
Introduction:
Les colorants alimentaires jouent un rôle essentiel dans l'industrie
agroalimentaire, car ils améliorent l'apparence visuelle des produits et influencent les
perceptions des consommateurs. Parmi ces colorants, le SIN110, un colorant azoïque,
est largement utilisé dans les boissons gazeuses pour sa capacité à fournir une couleur
vive et attrayante. Cependant, la consommation excessive de colorants artificiels
soulève des préoccupations sur la santé et la sécurité des aliments, ce qui rend leur
surveillance et leur quantification d'une importance cruciale.
La spectrophotométrie est une technique analytique puissante qui permet de mesurer
l'absorbance de la lumière par une solution à une longueur d'onde spécifique. Cette
méthode est particulièrement adaptée à la détermination quantitative des colorants
alimentaires, car elle repose sur le principe que la quantité de lumière absorbée par
une solution est proportionnelle à la concentration du soluté, conformément à la loi de
Beer-Lambert.
Dans cette étude, nous proposons un protocole pour quantifier la concentration de
SIN110 dans une boisson gazeuse par spectrophotométrie directe. Ce processus
implique la préparation de solutions étalons, l'établissement d'une courbe d'étalonnage,
et la mesure de l'absorbance de l'échantillon. En utilisant cette méthode, nous visons à
fournir des résultats fiables qui peuvent contribuer à une meilleure compréhension de
la présence de colorants dans les produits alimentaires et à promouvoir des pratiques
de consommation éclairées.
Objectif :
L'objectif principal de cette étude est de quantifier la concentration du colorant
alimentaire SIN110 dans une boisson gazeuse à l'aide de la méthode
spectrophotométrique. Nous visons à établir une courbe d'étalonnage précise qui
permettra de relier l'absorbance mesurée à la concentration de SIN110, afin d'évaluer
la quantité de ce colorant présente dans le produit. Cette quantification est essentielle
pour garantir la conformité aux réglementations en matière de sécurité alimentaire et
pour informer les consommateurs sur les ingrédients présents dans les boissons qu'ils
consomment.
Le principe :
Le principe fondamental de la spectrophotométrie repose sur la loi de Beer-
Lambert, qui stipule que l'absorbance (A) d'une solution est proportionnelle à sa
concentration (C) et à la longueur du chemin optique (l)
le coefficient d'extinction molaire, une constante spécifique au soluté à une longueur
d'onde donnée. Dans le cadre de cette étude, nous préparons des solutions étalons de
SIN110 à des concentrations connues et mesurons leur absorbance à une longueur
d'onde spécifique, où le colorant présente un maximum d'absorption. En traçant la
courbe d'étalonnage (absorbance en fonction de la concentration), nous pouvons
ensuite déterminer la concentration du SIN110 dans l'échantillon de boisson gazeuse
en mesurant son absorbance et en utilisant l'équation de la droite obtenue.
Mode de opératoire :
1. Détermination de la longueur d’onde d’absorption maximale « λmax
»:
1.. Remplissez une cuve avec de l'eau distillée pour établir le "zéro optique".
2. Dans une autre cuve, préparez une solution du colorant « SIN110 » à une concentration de 4,42
x 10⁻⁴ M.
3. À partir de λ = 450 nm, effectuez des mesures d'absorbance par intervalles de 5 nm ou moins,
en fonction des variations rapides de l'absorbance, dans le sens croissant des longueurs d'onde,
jusqu'à atteindre 550 nm.
4. Pour chaque longueur d'onde mesurée, n'oubliez pas de réajuster le "zéro optique" en utilisant
une cuve remplie d'eau distillée.
450 455 460 465 470 475 480 485 490 495 500 505
ABS 0.4275 0.4656 0.5070 0.5393 0.5803 0.6078 0.6202 0.6155 0.6042 0.5913 0.5765 0.5532
510 515 520 525 530 540 545 550
0.5112 0.4424 0.3521 0.2785 0.1803 0.1237 0.1935 0.0613
2. Préparation de la gamme des étalons :
- Préparer la gamme d’étalonnage
La solution mère (2mg Poudre du colorant alimentaire SIN110 dans 100 ml l’eau
distillé )
Lire l’absorbance à la longueur d’onde d’absorption maximale « ʎmax »
Échantillon T0 T 01 T02 T 03 T 04 T 06 T 07 T T
(tube) mami Mami
noir blanc
ABS 0.1213 0.1279 0.1367 0.1538 0.1598 0.1803 0.2061 0.4607 0.3744
Résultat:
1 ;Tracer le spectre d’absorption du colorant alimentaire « SIN110» : A = ƒ (ʎ).
Discussion:Analyse des Graphiques:
1. Spectre d'absorption du colorant alimentaire SIN110 :
Le premier graphique montre l'absorbance du colorant en fonction de la longueur
d'onde.
La longueur d’onde d’absorption maximale () est indiquée à 480 nm. Cela signifie que
le colorant SIN110 absorbe le plus fortement à cette longueur d'onde.
2. Courbe d’étalonnage et échantillon de boisson gazeuse :
Le deuxième graphique compare l'absorbance des solutions étalons (en vert) avec les
valeurs d'absorbance des échantillons de boisson gazeuse (en rouge).
Les échantillons de la boisson gazeuse ont une absorbance d'environ 0,45.
Réponses aux Questions
1. Spectre d’absorption du colorant alimentaire SIN110 :
: À partir du premier graphique, .
Le spectre d’absorption a été correctement tracé avec un maximum
d’absorbance de 0,6 à 480 nm.
2. Longueur d’onde où l’absorbance est maximale :
Comme mentionné ci-dessus, l’absorbance maximale est à 480 nm.
3. Couleur de la solution de SIN110 :
Comme le colorant absorbe à 480 nm (dans la région du bleu), la couleur
perçue sera le complémentaire, c’est-à-dire jaune-orange. Cela
correspond à la couleur du SIN110.
4 Déterminer la concentration massique du « SIN110 jaune orangé S »
dans la boisson gazeuse :
• D'abord, calculons la concentration molaire des échantillons de
boisson gazeuse avec l'équation de la droite d'étalonnage:
A = 241,27[SIN110] + 0,1118
• Pour l'échantillon 1 (A = 0,4607):
[SIN110] = (0,4607 - 0,1118) / 241,27 = 1,45 × 10⁻³ mol/L.
• Pour l'échantillon 2 (A = 0,3744):
[SIN110] = (0,3744 - 0,1118) / 241,27 = 1,09 × 10⁻³ mol/L.
5-6
7
Concentration molaire moyenne = (1,60 × 10⁻³ + 1,19 × 10⁻³) / 2 = 1,40 ×
10⁻³ mol/L.
• Conversion en concentration massique :
M(SIN110) = 452 g/mol
C(massique) = C(mol/L) × M(g/mol)
Cm1 = 1,45 × 10⁻³ × 452 = 0,656 g/l.
Cm2 = 1,09 × 10⁻³ × 452 = 0,493 g/l.
Vérification de la norme internationale:
Selon la FAO/OMS, la limite maximale pour SIN110 dans les boissons est
généralement de 0.1 g/L. Ici, les deux échantillons dépassent largement
la limite, alors 0.656 g/L et 0.493 g/L, non conformes aux normes.
7) Calculer le coefficient d’absorption molaire :
D'après la loi de Beer-Lambert: A = εℓC
où:
- ε est le coefficient d'absorption molaire (L⋅ mol⁻¹⋅ cm⁻¹)
- ℓ est la longueur du trajet optique (1 cm dans une cuve standard)
- C est la concentration molaire (mol/L)
La pente de notre droite d'étalonnage (241,27 L/mol) représente ε × ℓ
Donc avec ℓ = 1 cm:
ε = 242 L⋅ mol⁻¹⋅ cm⁻¹
Le coefficient d'absorption molaire du SIN110 est donc ε = 242
L⋅ mol⁻¹⋅ cm⁻¹.
Conclution :
La spectrométrie UV-Visible permet de doser efficacement le colorant
alimentaire E110 (jaune orangé) dans une boisson gazeuse. Grâce à la
mesure de l’absorbance à une longueur d’onde caractéristique (souvent
autour de 480 nm pour E110), et en utilisant une courbe d’étalonnage, il
est possible de déterminer la concentration de ce colorant dans
l’échantillon.
Les résultats obtenus doivent être comparés aux limites réglementaires
établies pour garantir la conformité et la sécurité alimentaire. Cette
méthode présente l’avantage d’être rapide, sensible et relativement simple
à mettre en œuvre, tout en fournissant des résultats fiables pour un
contrôle de qualité ou une analyse réglementaire.