Dosage de l'Antistreptolysine O (ASO)
Dosage de l'Antistreptolysine O (ASO)
680 2218
Application
Pour usage in vitro.
Le réactif VITROS Chemistry Products ASO permet d’effectuer le dosage quantitatif des anticorps à la streptolysine O dans
le sérum et le plasma humains sur le système de chimie clinique VITROS 5,1 FS et VITROS 5600. Déterminer la présence
d’anticorps à la streptolysine O facilite le diagnostic des individus infectés par le streptocoque du groupe A.
Principe de la méthode
Le dosage quantitatif de l’antistreptolysine O est réalisé avec le réactif VITROS Chemistry Products ASO en association avec
les jeux d’échantillons de calibrage VITROS Chemistry Products Calibrator Kit 28 et FS Calibrator 1 sur les systèmes de
chimie clinique VITROS 5,1 FS et systèmes intégrés VITROS 5600.
Le réactif VITROS ASO est une cartouche à double compartiment contenant des réactifs liquides prêts à l’emploi, à utiliser
au cours d’une réaction en deux phases pour le dosage quantitatif de l’antistreptolysine O (ASO). Dans un premier temps, le
tampon contenu dans le réactif 1 est utilisé pour diluer la streptolysine O fixée sur des particules de latex dans le réactif 2. Au
cours de la seconde phase, l’échantillon à tester est ajouté et une réaction antigène-anticorps se produit entre
l’antistreptolysine O de l’échantillon et la streptolysine O liée aux particules de latex, entraînant une agglutination.
L’agglutination est détectée comme une modification d’absorbance à 575 nm, l’importance du changement étant
proportionnelle à la quantité d’ASO dans l’échantillon. Une fois qu’un calibrage a été effectué sur chaque lot de réactifs, la
concentration en ASO de chaque échantillon à tester peut être calculée à l’aide de la courbe d’étalonnage mémorisée et de
l’absorbance mesurée obtenue dans le dosage de l’échantillon.
Réaction
Durée approximative Échantillon/
Type de test Système VITROS d'incubation Température Longueur d'onde Volume
Incubation 1 : 5,2
Cinétique en deux minutes
5600, 5,1 FS 37 °C 575 nm 2,7 µL
points Incubation 2 : 4,4
minutes
Les produits et systèmes ne sont pas tous disponibles dans tous les pays.
Schéma de la réaction
Étape 1 : dilution du R2 avec le R1
R1 + R2 R2 dilué
Avertissements et précautions
Pour usage in vitro.
Ce produit contient des composés sanguins d’origine bovine et doit être manipulé en observant les mêmes précautions que
pour tout autre produit sanguin ou dérivé du sang.
AVERTISSEMENT : ce produit contient de l’azide de sodium. Si ces réactifs sont éliminés dans un évier
à tuyauterie de plomb ou de cuivre, rincer abondamment à l’eau pour éviter la
formation d’azides métalliques potentiellement explosifs.
Attention : ce produit contient du Na2EDTA. Irritant pour les yeux.
Réactifs
Composants actifs
Réactif 1 (R1) : aucun
Réactif 2 (R2) : particules de latex enduites d’antigène streptolysine O, 0,17% (poids/volume)
Autres composants
Réactif 1 (R1) : conservateur, tampon, sel inorganique, protéine
Réactif 2 (R2) : conservateur, tampon, sel inorganique, protéine
Préparation du réactif
1. Retirer du réfrigérateur.
2. Charger immédiatement dans la Réserve 3.
IMPORTANT : ne pas desserrer ni retirer les bouchons avant le chargement.
Sérum et plasma
Prélèvement et préparation des échantillons
Prélever les échantillons selon les techniques de laboratoire classiques7, 8.
Remarque : pour plus de détails sur les volumes de remplissage minimum requis, se reporter
au mode d’emploi du système.
Préparation du patient
Le patient ne nécessite aucune préparation particulière.
Précautions particulières
• Les échantillons plasmatiques sur EDTA prélevés dans des tubes partiellement remplis peuvent donner des biais de
prédiction négatifs.
• Centrifuger les spécimens et extraire le sérum du matériel cellulaire dans les deux heures après le prélèvement9 .
Manipulation et conservation des échantillons
• Manipuler et conserver les échantillons dans des récipients fermés afin d’éviter tout risque de contamination ou
d’évaporation.
• Mélanger les échantillons par inversion douce et les ramener à température ambiante, entre 18–28 °C, avant analyse.
Procédure de dosage
Matériel fourni
Réactif VITROS Chemistry Products ASO
Mode opératoire
• Vérifier les réserves de réactifs au moins une fois par jour afin de s’assurer que les quantités disponibles sont suffisantes
pour réaliser la charge de travail programmée.
• Pour plus d’informations, se reporter au mode d’emploi du système.
IMPORTANT : ramener tous les liquides et tous les échantillons à température ambiante, entre
18–28 °C, avant analyse.
Dilution manuelle :
Si les concentrations d’antistreptolysine O dépassent la gamme de mesures (linéarité) du système :
Calibrage
Étalons requis
• Jeu d’échantillons de calibrage VITROS Chemistry Products Calibrator Kit 28
• Jeu d’échantillons de calibrage VITROS Chemistry Products FS Calibrator 1
Procédure d'étalonnage
Se reporter au mode d’emploi du système.
Quand étalonner
Calibrer :
• quand le numéro de lot du réactif change ;
• après une opération de maintenance, comme le remplacement d’une pièce importante du système ;
• lorsque la législation en vigueur dans le pays l’impose.
Aux États-Unis, par exemple, la réglementation CLIA impose un calibrage ou une vérification du calibrage tous les six mois
au minimum.
Il peut également être nécessaire de calibrer le dosage VITROS ASO :
• si les résultats du contrôle de qualité sont régulièrement en dehors des limites acceptables ;
• après certaines interventions techniques.
Pour plus d’informations, se reporter au mode d’emploi du système.
Calculs
L’absorbance est mesurée à 575 nm à deux moments fixes durant l’incubation et le changement entre les deux lectures est
calculé. Une fois qu’un calibrage a été effectué pour chaque lot de réactifs, la concentration en antistreptolysine O dans les
échantillons à tester peut être calculée à l’aide de la courbe d’étalonnage mémorisée et de la réponse calculée lors du dosage
de chaque échantillon.
Traçabilité de l'étalonnage
Les valeurs attribuées aux jeux d’échantillons de calibrage VITROS Chemistry Products Calibrator Kit 28 et FS Calibrator 1
pour l’antistreptolysine O (ASO) sont dérivées de l’antistreptolysine O, réactif NIBSC 97/66210.
Contrôle de qualité
Choix du matériau de contrôle de qualité
IMPORTANT : il est recommandé d’utiliser les échantillons de contrôle VITROS Chemistry Products
ASO/RF Performance Verifiers sur les systèmes de chimie clinique VITROS 5,1 FS
et systèmes intégrés VITROS. Avant d’utiliser d’autres échantillons de contrôle
disponibles sur le marché, évaluer leurs performances pour s’assurer de leur
compatibilité avec ce dosage.
Les échantillons de contrôle autres que les échantillons de contrôle VITROS Chemistry Products ASO/RF Performance
Verifiers peuvent présenter une différence par comparaison avec d’autres méthodes de dosage de l’ASO si :
• ils ne proviennent pas d’une matrice humaine véritable,
• ils contiennent de fortes concentrations de conservateurs, stabilisants ou autres additifs non physiologiques.
Résultats
Unités employées et de conversion
Les systèmes de chimie clinique 5,1 FS et systèmes intégrés VITROS peuvent être programmés pour rapporter les résultats
d’ASO en unités conventionnelles, unités SI ou autres.
Limites de la méthode
Interférences connues
Aucune substance interférente n’a été identifiée.
Autres limites
• Aucun effet d’excès d’antigène n’a été observé pour des échantillons avec une concentration en ASO allant jusqu’à
4000 UI/mL.
• Certains médicaments et états cliniques peuvent modifier les concentrations d’antistreptolysine O in vivo ou in vitro19.
Valeurs attendues
Unités
conventionnelles
et unités SI Autres unités
Population (UI/mL) (kUI/L)
Adultes12,13 ≤200 ≤200
Enfants14 ≤240 ≤240
Les valeurs supérieures aux seuils indiqués pour chaque population sont compatibles avec une infection récente par le
streptocoque du groupe A. Ces valeurs attendues ne sont fournies qu’à titre indicatif. Les taux de ASO dépendant de facteurs
divers comme l’âge, le lieu géographique, le site de l’infection, la saison et de l’incidence des infections
streptococciques13, 14, 15, 16, 17, 18, il est recommandé à chaque laboratoire d’établir des valeurs attendues appropriées en
fonction de la population concernée.
Performances
Comparaison des méthodes
Les courbes et les données ci-dessous montrent les résultats de la comparaison entre des échantillons sériques analysés
sur le système de chimie clinique VITROS 5,1 FS à l’aide de la méthode par néphélométrie Dade Behring N Latex ASL et de
la méthode par turbidimétrie de l’antistreptolysine O COBAS INTEGRA, conformément au protocole EP920 du NCCLS.
Le tableau indique aussi les résultats de la comparaison entre les échantillons sériques et plasmatiques analysés sur le
système intégré VITROS 5600 et ceux analysés sur le système de chimie clinique VITROS 5,1 FS. Le dosage a été effectué
conformément au protocole EP920 du NCCLS.
Unités conventionnelles/unités SI
(UI/mL)
Coefficient Intervalle de
de concentration Ordonnée
n Pente corrélation de l’échantillon à l’origine Sy.x
Système 5,1 FS /
Méthode par
127 1,00 0,987 37–876 -27,93 36,21
néphélométrie disponible
dans le commerce *
Système 5,1 FS /
Méthode par turbidimétrie
126 0,91 0,991 26–742 -12,24 25,49
disponible dans le
commerce**
Système 5600 / Système
106 0,97 0,998 34–890 4,31 14,70
5,1 FS **
* Dosage Dade Behring N Latex ASL
** Dosage de l’antistreptolysine O COBAS INTEGRA
Précision
La précision a été évaluée à l’aide de matériaux de contrôle de qualité sur le système VITROS 5,1 FS conformément au
protocole EP521 du NCCLS.
La précision a été également évaluée à l’aide de matériaux de contrôle de qualité sur le système intégré VITROS 5600
conformément au protocole EP521 du NCCLS.
Ces résultats sont donnés à titre indicatif. Des variables telles que l’entretien de l’appareil, l’environnement, la manipulation/
conservation des réactifs, la reconstitution des échantillons de contrôle et la manipulation des échantillons peuvent affecter
la reproductibilité des résultats de dosage.
Spécificité
Substances n’induisant pas d’interférences
Les substances répertoriées dans ce tableau ont été testées avec le réactif VITROS Chemistry Products ASO à des
concentrations en ASO de 250 UI/mL à l’aide de protocoles conformes au protocole EP722 du NCCLS. Aucune interférence
n’a été observée, avec un biais <12,1% aux concentrations indiquées.
Composé Concentration
Acétaminophène 20 mg/dL 1,3 mmol/L
Acide acétylsalicylique
(aspirine) 50 mg/dL 2,8 mmol/L
Amoxicilline 2 mg/dL 1,15 mmol/L
Ampicilline 5 mg/dL 143 µmol/L
Acide ascorbique 3 mg/dL 170 µmol/L
Atorvastatine 1,6 mg/dL 13,2 µmol/L
Bilirubine 60 mg/dL 1,03 mmol/L
Caféine 10 mg/dL 515 µmol/L
Carbamazépine 12 mg/dL 508 µmol/L
Créatinine 30 mg/dL 2,6 mmol/L
Diazepam 2 mg/dL 70 µmol/L
Dipyrone 30 mg/dL 854 µmol/L
Éthamsylate 3 mg/dL 114 µmol/L
Sulfate de gentamicine 12 mg/dL 0,2 U/L
Hémoglobine 1000 mg/dL 10 g/L
Ibuprofène 40 mg/mL 1,9 mmol/L
Intralipide 1000 mg/dL S/O*
Méthotrexate 454 mg/dL 10 mmol/L
Nicotine 2 mg/dL 123 µmol/L
Procaïnamide 10 mg/dL 368 µmol/L
ProClin 300 140 mg/dL S/O*
Propranolol 500 µg/dL 19 µmol/L
Protéine 9 g/dL 90 g/L
Rantidine 20 mg/dL 570 µmol/L
Facteur rhumatoïde 300 UI/mL 300 UI/mL
Azide de sodium 200 mg/dL 30,8 mmol/L
Naproxène sodique 90 mg/dL 3,6 mmol/L
Théophylline 25 mg/dL 1,4 mmol/L
Triglycérides 1200 mg/dL 13,4 mmol/L
Composé Concentration
Urée 50 mg/dL 8,3 mmol/L
Acide valproïque 50 mg/dL 3,5 mmol/L
* S/O : sans objet ; le composé est un mélange.
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Lors du remplacement de ce feuillet technique, signer et dater ci-dessous, puis archiver conformément à la législation locale
en vigueur ou aux directives du laboratoire.
Ortho-Clinical Diagnostics
Johnson & Johnson
50-100 Holmers Farm Way
High Wycombe
Buckinghamshire
HP12 4DP
United Kingdom