Técnicas básicas para el monitoreo de cultivos de

bacterias de hierro
Orellana C. Jhodera, Ramon P. Johna, Torres S. Walter a.

a
Universidad Técnica Particular de Loja, Titulación de Ingeniería Química, Loja, Ecuador

* e-mail: jgorellana@@[Link] ; wjtorres2@[Link] ; jbramon2@[Link]

Abstrac

In mining, a number of minerals, or compounds of interest, are extracted that are generally for
profit. For this, several methods are used to extract the greatest amount of the mineral, among
them is the use of microorganisms. It is known that there is a group of bacteria that are able to
extract dissolved iron from an aqueous environment and store it in compartments called
magnetosomes, which not only help concentrate gold, but also copper and manganese. In the
present study we sought to quantify the concentrations of iron and sulfates, where it was
concluded that the concentration of iron Fe + 2 is higher than the concentration Fe + 3, which
shows that the relationship still does not reach its end point.

Introducción

En la minería se puede extraer un sin número de minerales, o compuestos de interés que

son generalmente vendidos, pero a su vez pueden presentar una serie de impurezas que pueden
estar asociados al mismo y que bajan su precio. Por ello se usan varios tipos de mecanismos
para extraer la mayor cantidad posible del mismo, uno de ellos el uso de microorganismos para
la ayuda de este, y algunos factores a controlar como el conteo de bacterias, pH, cuantificación
de hierro. Por ello se sabe que existe un grupo de bacterias que son capaces de extraer hierro
disuelto de un entorno acuoso y almacenarlo en compartimentos llamados magnetosomas, que
no solo ayudan concentrar el oro, sino también el cobre y manganeso (World Energy Trade,
2020). El hierro puede estar presente en el agua o un medio acuoso en forma de hierro férrico
(Fe3+) y de ion férrico (Fe2+), mientras que el hierro total incluye todas estas formas,
generalmente encontrado como hierro ferroso, pero se oxida rápidamente convirtiéndose en
hierro férrico (HACH, 2020). Uno de los métodos para estudiar la concentración de hierro es el
de la fenantrolina, donde el hierro ferroso reacciona con la fenantrolina para formar un quelato
color naranja, y donde para ver el hierro total se agrega ácido triglicólico para reducir el hierro
férrico al estado ferroso, donde luego se puede medir su absorbancia y expresarlos en ppm de Fe
(Tetlow y Wilson, 1964). Otro método generalmente usado es el PDTS, donde se usa acio
tioglicólico para disolver el hierro particulado y reducir del estado férrico al ferroso. Luego, el
hierro ferroso reacciona con el PDTS (3-(2-piridil)-5,6-bis (ácido 4-fenilsulfónico)-1,2,4-
triazina sal disódica) en solución ácida para formar un quelato de color púrpura, leyendo su
absorbancia y expresando los resultados en ppm (mg/L) de Fe (Smith, 1980).

Metodología

Determinación analítica:

 Se preparo previamente agua acidificada a un pH 2 con H2SO4.

 Para la determinación de hierro, se tomó 50 µL de la solución y 95 µL de ferrocina, de
forma que, al homogenizar se observe un cambio de tonalidad en presencia de hierro.
 Se llevo al equipo de espectrofotometría a tomar lectura, hierro total y hierro II la
longitud de onda se tomó a 562 nm.
 Para la medición sulfatos se tomó 1 mL de muestra más 50 µL de reactivo
condicionante.
 Agregar una pequeña cantidad de cloruro de bario.
 Realizar lectura a 520 nm.

Conteo de la muestra:

 Se realizo una dilución de la muestra en donde se tomó 20 µL de agua destilada y 10 µL

de la muestra.
 Se coloca la muestra en la cámara de Neubauer.
 Para visualizar en el microscopio se usó aceite de inmersión.
 Realizar el conteo de células en cada cuadrante.

Resultados y discusión

Una de las mayores importancias del monitoreo de hierro y sulfatos en cultivos de bacterias
en los procesos de minería es el conocer la evolución de la bio-hidrometalurgia para identificar
el seguimiento del proceso extractivo, ya sea de oro, cobre, uranio, cobalto, etc. Es por ello por
lo que, al conocer que se trata de un proceso oxidante se sabe que el proceso de biooxidación de
concentrados degrada la matriz y logra recuperar una mayor cantidad de mineral que el proceso
de cianuración tradicional (Syed, 2012) . De manera más específica se conoce que los
microorganismos degradan la matriz, siguiendo las reacciones R1-R3 (ZHANG et al., 2008).

+¿ ( R 1)¿
2−¿ +16 H ¿
2+ ¿+2 S O4 ¿
3 +¿+ 8 H 2 O →15 Fe ¿
Fe S 2 +14 Fe

7 2+¿+2 S O
2−¿+ 2H +¿ (R 2)¿ ¿
¿
Fe S 2 + O2 + H 2 O Bacteria Fe 4

2 →
 1
3+¿+ H O ( R3) ¿

1
2 2
+¿ Bacteria Fe ¿
2 +¿+ O2+ H →
¿
4
Fe

En estas reacciones se puede evidenciar como producto final la producción de iones Fe 3+ y de

aniones SO42-, justamente el seguimiento de estos compuestos expresa la evolución de la
biooxidación. Y de acuerdo con esta reacción se sabe que los sulfuros son degradados hasta
sulfatos y el ion Fe2+ se transforma en ion Fe3+.

3.1. Determinación analítica de la concentración de sulfatos.

La alícuota tomada con su tratamiento respectivo para una lectura correcta de SO 42- dio como
resultado los valores de la tabla 1.

Tabla 1.- Valores de FD y ABS en la determinación de la concentración en g/L de SO 42-

Muestra Sulfatos
FD ABS SO42- g/L
1 101 0,087 2,51
Elaborado por: Orellana, Ramón & Torres (2022).

Es importante detallar que para la obtención de la concentración en g/L de sulfatos se realizo

una curva de calibración y con esto se obtuvo la ecuación 1. Donde y es la absorbancia de la
muestra y x es la concentración de sulfatos.

y=0,0035 x −0,0077(1)

De esta ecuación se realizó un ajuste matemático para expresar la transformación a g/L y

además se debe tener en cuenta el FD (factor de dilución). Teniendo en cuenta todos estos
aspectos se tiene la ecuación 2 que permite la obtención de la concentración de sulfatos.

( ( y∗FD0,0035 ) ( 2) ¿
)
+0,0077
2−¿ ()g
L
=
1000
S O4

3.2. Determinación analítica de la concentración de Fe+2.

La alícuota tomada con su tratamiento respectivo para una lectura correcta de Fe 2+ dio como
resultado los valores de la tabla 2.

Tabla 2.- Valores de FD y ABS en la determinación de la concentración en g/L de Fe 2+

Muestra Hierro II
FD ABS Fe II g/L
 1 501 0,322 6,62
Elaborado por: Orellana, Ramón & Torres (2022).

Es preciso recalcar que se realizó una curva de calibración para poder identificar la
concentración de Fe2+, con lo que se obtuvo la ecuación 3. Donde y es la absorbancia de la
muestra y x es la concentración de sulfatos.

y=0,0229 x +0,0192( 3)

De esta ecuación se realizó un ajuste matemático para expresar la transformación a g/L y

además se debe tener en cuenta el FD (factor de dilución). Teniendo en cuenta todos estos
aspectos se tiene la ecuación 4 que permite la obtención de la concentración del ion ferroso.

Fe
2 +¿ ()
g
L
= ( ( y−0,0192
0,0229 )
1000
∗FD
) (4 ) ¿

3.3. Determinación analítica de la concentración de FeTotal.

La alícuota tomada con su tratamiento respectivo para una lectura correcta de Fe Total dio como
resultado los valores de la tabla 3.

Tabla 3.- Valores de FD y ABS para la determinación de la concentración en g/L de Fe Total.

Muestra Hierro Total

FD ABS Fe g/L
1 501 0,322 7,0
Elaborado por: Orellana, Ramón & Torres (2022).

Es preciso recalcar que se realizó una curva de calibración para poder identificar la
concentración de FeTotal, con lo que se obtuvo la ecuación 5. Donde y es la absorbancia de la
muestra y x es la concentración de sulfatos.

y=0,0229 x +0,0192(5)

De esta ecuación se realizó un ajuste matemático para expresar la transformación a g/L y

además se debe tener en cuenta el FD (factor de dilución). Teniendo en cuenta todos estos
aspectos se tiene la ecuación 6 que permite la obtención de la concentración de Hierro total.

(( ) ( 6) )
y∗FD−0,0192
FeTotal ( L)
g
=
0,0229
1000
3.2. Determinación analítica de la concentración de Fe+3.

Sabiendo que la concentración de ion férrico es la diferencia entre la concentración de hierro

total y ion ferroso, se representa su expresión matemática en la ecuación 7. Con esto se
determinan los resultados presentados en la tabla 4.

( Lg) ¿
( gL )=Fe ( gL )−Fe
2+¿
3 +¿ Total ¿
Fe

Tabla 3.- Valores de Fe2+, FeTotal y Fe3+.

FeTotal (g/L) Fe2+ (g/L) Fe3+ (g/L)

7,0 6,62 0,38

Elaborado por: Orellana, Ramón & Torres (2022).

Finalmente, se identificó que la concentración de Fe 2+ tomada en el tiempo x, supera a la

concentración de Fe3+, con esto podemos asumir que la reacción aún no ha llegado su etapa
final. La biooxidación no se ha completado todavía, ya que de manera general se conoce que
para que la reacción haya culminado la concentración de ión Fe (III) debe ser mayor a la
concentración de Fe (II). De acuerdo con el estudio realizado por (ZHANG et al., 2008) se
conoce que el papel de las bacterias es el oxidar el ion Fe2+ a Fe3+, asi como lo detalla y explica
en su mecanismo de reacción indirecta. Por lo que, se puede asumir que la reacción en este
estudio aun no ha llegado a su fin.

Conclusiones

 Se determinó la importancia del monitoreo del hierro y sulfatos dentro de la bio-

hidrometalurgia, para conocer de qué manera transcurre el proceso de extracción de
cierto mineral.
 Se cuantifico las concentraciones de las muestras estudiadas, donde para los sulfatos fue
de 2,51 g/L, de Fe+2 de 6,62 g/L, de Fe+3 de 0,38 g/L y de hierro total de 7 g/L.
 Se identificó que la concentración de Fe+2 era mayor a la concentración de Fe+3 ,
tomada en un cierto punto de tiempo, demostrando que la reacción a un no ha llegado a
su punto final.

Bibliografía
Syed, S. (2012). Recovery of gold from secondary sources—A review. Hydrometallurgy, 115–116,
30–51. [Link]

ZHANG, L., QIU, G. zhou, HU, Y. hua, SUN, X. jun, LI, J. hua, & GU, G. hua. (2008).
Bioleaching of pyrite by A. ferrooxidans and L. ferriphilum. Transactions of
Nonferrous Metals Society of China, 18(6), 1415–1420. [Link]
6326(09)60018-2

World Energy Trade, 2020. Las bacterias que almacenan hierro pueden usarse para la
extracción de oro y cobre. Recuperado de:
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hierro-pueden-usarse-para-la-extraccion-de-oro-y-cobre

HACH, 2020. ¿Qué es el hierro total? Recuperado de:

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Tetlow, A. y Wilson, A., 1964. The Absorptiometric Determination of Iron in Boiler Feed-
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Smith, G., 1980. The Iron Reagents. Analyst. Vol. 89, p. 442. Recuperado de:
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