Rapport de stage
Analyses physico-
chimiques et
bactériologiques de
l'eau
Année
2021 / 2022
Présentée par
Melle BENHADJ AMAR Nada Rihab
Rapport de stage
Analyses physico-
chimiques et
bactériologiques de
l'eau
2021/2022
Etablissement: ENSSMAL - Dély Ibrahim 16320
Entreprise d'acceuil: SEOR - 05, rue des Freres Bouchakour, El Hamri
Oran
REMERCIEMENTS
Je tiens tout d’abord à remercier les responsables, ainsi que tout le personnel du
laboratoire central de la direction générale de la SEOR, pour l’accueil et l’assistance, avec
beaucoup de patience le long de mon stage de 15jours. Ils n'ont pas hésité à interrompre
leur travail en cours, pour prendre le temps de me présenter ce qu'ils faisaient, je les
remercie chaleureusement pour cela.
J’exprime également mes sincères remerciements à mes parents et mes deux sœurs, Aya
et Nour El Houda pour leur soutien inconditionnel.
Grâce à vous tous, je garderai un très bon souvenir de mon premier stage de 3ème année.
Merci pour tout.
SOMMAIRE
INTODUCTION................................................................................................ 6
AVANT PROPOS.........................................................................................................7
1. Présentation de la SEOR ...............................................................................7
a) Historique..............................................................................................7
b) Missions de la SEOR...................................................................7
2. Généralités sur les laboratoires SEOR...........................................................8
3. Tâches du laboratoire de production..............................................................8
LES NORMES DES PARAMETRES VUS AU SEIN DU LABORATOIRE
CENTRALE ..................................................................................................................9
MODE OPERATOIRE...............................................................................................10
1. Paramètres Organoleptiques........................................................................10
a) La couleur..................................................................................................10
b) Le goût (saveur) et l’odeur......................................................................11
c) La turbidité.................................................................................................11
2. Paramètres Physico-chimiques....................................................................12
a) Le pH..........................................................................................................12
b) La conductivité..........................................................................................13
c) La température..........................................................................................13
d) Dosage de chlorure (Clˉ).........................................................................14
e) Dureté de l’eau (Titre Hydrométrique)...................................................14
f) Calcium......................................................................................................14
g) Magnésium................................................................................................15
h) dosage de sulfates (SO4²ˉ).....................................................................15
i) Titre Alcalimétrique Complet (TAC).......................................................15
2. Paramètres Chimiques.................................................................................16
a) Oxydabilité (Matière Organique) ...........................................................16
b) Dosage de l’Ammonium (NH4+)............................................................17
c) Dosage de Nitrites (NH2-).......................................................................17
d) Dosage de Nitrates (NH3-)......................................................................18
4. Paramètres Bactériologiques........................................................................18
a) Coliformes .................................................................................................18
b) Entérocoques............................................................................................19
c) Clostridium.................................................................................................20
CONCLUSION...............................................................................................21
BIBLIOGRAPHIE...........................................................................................22
Introduction
L’eau, ressource vitale pour l’homme, représente plus de 70% de la superficie
mondiale. Cependant, l’eau potable est loin d’être disponible en abondance : en effet,
l’eau douce ne recouvre que 2% de l’eau de notre planète.
Une eau de mauvaise qualité peut provoquer le choléra, la dysenterie, la dracunculose,
la typhoïde et les vers intestinaux responsables de la mort de 1,8 millions de personnes
chaque année, dont 1,6 millions d'enfants de moins de 5 ans.
C’est pourquoi, avant d’être consommée, l’eau produite et distribuée doit répondre à
tout instant aux normes de qualité fixées par la Réglementation Algérienne, elle-même
calée sur les normes internationales.
Le travail de la SEOR consiste à surveiller et contrôler en continu, la qualité de l'eau
d'Oran, destinée à la consommation humaine.
C’est dans ce contexte que s’inscrit ce présent rapport dont l’objectif principal, est de
connaitre les différents paramètres physico-chimiques et bactériologiques qui sont
indispensables à l’analyse et surveillance de la qualité d’eau.
1. Présentation de la SEOR :
a) Historique
La Société de l'eau et de l'Assainissement d'Oran (SEOR), société par actions, dont les
actionnaires sont l'Algérienne des Eaux (ADE) et l'Office National de l'Assainissement
(ONA), mise en place le 1er avril 2008, a pris en charge la gestion déléguée de l'eau et de
l'assainissement de la wilaya d'Oran, avec pour objectif principal, l'amélioration de la
qualité du service d'alimentation en eau potable.
b) Missions de la SEOR
Au titre des missions, la SEOR s’est imposée une plus grande discipline dans la gestion des
services publics de l’eau potable et de l’assainissement, visant à améliorer la qualité de vie
des citoyens, et de développer l’alimentation en eau au niveau des communes de la wilaya
d’Oran.
En plus de l’aspect qualitatif, la mission de la SEOR est de donner une impulsion
quantitative à la gestion de l'eau puisqu'elle doit assurer la disponibilité de l'eau en H/24
dans les robinets en moins de 3 ans, conformément à ses engagements contractuels.
La SEOR est également chargée d’effectuer la maintenance préventive et la remise à
niveau des infrastructures d'assainissement.
Visant l’efficacité du point de vue technique, économique et environnemental, la SEOR,
pour atteindre ses objectifs, s’est proposée de développer les moyens humains et matériels
et d’introduire de nouvelles technologies, ainsi cette mission s'est trouvée complétée par la
formation, dispensée au personnel local, à la technologie apportée par AGBAR, entreprise
espagnole, qui a obtenu, par contrat, la gestion de la SEOR pour une période de 5 ans et
demi.
2. Généralités sur les laboratoires SEOR:
Le laboratoire analyse des eaux de la SEOR a pour vocation le prélèvement et l'analyse
physique , chimique et bactériologique de diverses qualité d'eau (eaux brutes, eaux
portables et eaux résiduaires), sous la responsabilité du directeur du laboratoire, du chef de
service, chefs d'unités et des analystes qui en interprètent les résultats, dans le but d'assurer
la qualité des eaux potables distribuées au niveau de la wilaya d'Oran, ainsi que le suivi et
le traitement des eaux usées.
3. Tâches du laboratoire de production:
SERVICE
LABORATOIRE
Section Section Physico-
Bactériologie chimique
1er étage 2ème étage
Paramètres Paramètres organoleptiques :
microbiologiques : Couleur
Bactéries coliformes Turbidité
Entérocoques Odeur à 12°C
Escherichia coli Saveur à 25°C
Salmonelles Paramètres physico-chimiques :
Bactéries sulfitoréductrices Température
Spores Alcalinité
Demande Biochimique en O2 Chlorures
Concentration en ions hydrogène pH
Paramètres algologiques : Conductivité à 20°C
Algues vertes Dureté
Diatomés Matières en suspension :
Protozoaires Résidu sec
Rotifères Sulfates
Microcystine LR Fluores
Paramètres chimique de pollution :
Taux de saturation en O2
Demande chimique en O2
Oxydabilité
Nitrites
Nitrates
Orthophosphates et phosphore total
Ammonium et Azote KJELDHAL
9
Les normes des paramètres
au sein du laboratoire
central
Groupe de
paramètres Unité Valeurs indicatives
paramètres
Couleur CO 15
Paramètres Saveur / 4
organoleptiques Odeur / 4
turbidité NTU 5
TAC mg/l 500
pH UpH 6.5<pH<9
Calcium mg/l 200
Chlorure mg/l 500
Paramètres physico-
TH mg/l 500
chimiques
Sulfate mg/l 400
Conductivité µS/cm 2800
Magnésium mg/l 150
Température °C <25
Groupe de
paramètres Unité Valeurs limites
paramètres
Ammonium mg/l 0.5
Paramètres Nitrates mg/l 50
chimiques Nitrites mg/l 0.2
Oxydabilité mg/l 5
Eschirichia coli n/100ml 0
Paramètres Enthérocoques n/100ml 0
microbiologiques Clostridium n/100ml 0
Coliformes totaux n/100ml 0
Modes opératoires
1. Paramètres Organoleptiques
Les paramètres organoleptiques sont ceux que le consommateur perçoit
immédiatement en buvant de l'eau : la couleur, l'odeur et la saveur.
Ils font référence à la sensation, bonne ou mauvaise, que le consommateur peut
ressentir.
a) La couleur
La couleur de l’eau peut être d'origine organique et/ou minérale et les différents
composés absorbent à différentes fréquences de la lumière. Elle est mesurée sur une
échelle au platine-cobalt.
Mode opératoire
On utilise le spectrophotomètre pour la détermination de la couleur.
1- Faites passer la solution témoin (eau distillée) sur une cuvette de 500mm.
2- Appuyez sur la touche ZERO.
3- Retirez la cuvette de la chambre de mesure, et la videz.
4- Prélavez la cuvette avec l’échantillon de l’eau.
5- Remplissez avec l’échantillon préparé, et appuyez sur la touche TEST.
R
b) Le goût (saveur) et l’odeur
Il n’existe pas d’eau sans odeur ni saveur, ni d’eau chimiquement parfaite à l’état naturel.
Une eau se déguste comme le vin : sa saveur, son goût et son arôme s'apprécie et se
compare.
Mode opératoire
On met 50ml de l'échantillon dans un verre de dégustation, et on le laisse pendant 15min
dans un bain marie à une température 25°C :
S’il n’y a ni d’odeur ni de goût ON NOTE 1UD
S’il y a une odeur ou/et un goût, on fait la dilution :
1ère dilution : on note 2UD : 25ml d’échantillon + 25ml d’eau distillée
2ère dilution : on note 5UD : 10ml d’échantillon + 40ml d’eau distillée
3ère dilution : on note 10UD : 5ml d’échantillon + 45ml d’eau distillée
c) La turbidité
La turbidité de l’eau est dûe à la présence des matières en suspension finement divisées
qui réduit sa transparence. Elle éveille la méfiance et la répugnance du consommateur.
Mode opératoire
On utilise le turbidimètre pour la détermination de la turbidité.
1- Rincer la cuve par l’eau distillée.
2- Agitez le flacon contenant l’échantillon, et remplissez la cuve avec.
3- Introduisez la cuve dans le compartiment, et refermez le cache.
4- Appuyez sur la touche ENTRER, et notez la première valeur affichée.
Figure N° ?? Turbidimètre
2. Paramètres Physico-chimiques
Ils correspondent aux caractéristiques de l’eau tels que le pH, la température, la
conductivité et la dureté de l’eau, elles délimitent les quantités maximales à ne pas
dépasser pour certains composants comme les chlorures, le potassium et les sulfate…etc.
a) Le pH:
Le pH d'une eau permet de mettre en évidence les espèces chimiques présentes dans un
échantillon. On parle alors de pH acide, de pH neutre ou de pH basique. La mesure du pH
est réalisée par une méthode potentiométrique, en mesurant la différence de potentiel
entre une électrode de verre et une électrode de référence.
Mode opératoire
On utilise le pH-mètre pour la détermination du pH.
1- Remplissez le bécher avec l’eau à analyser.
2- Allumez le pH-mètre qui doit être déjà étalonné.
3- Rincez l’électrode avec du l’eau distillée.
4- Plongez l’électrode dans le bécher.
5- Procédez à une agitation.
6- Faites la lecture de la valeur affichée après sa stabilisation.
b) La conductivité
La mesure de la conductivité est un moyen assez simple de détection d’une anomalie
indiquant la présence probable d’une pollution, par comparaison de la valeur mesurée
avec celle que l’on était en droit d’attendre.
Elle peut permettre de localiser un apport de pollution : une charge importante de
pollution organique augmente la conductivité.
Mode opératoire
On utilise le conductimètre pour la détermination de la conductivité.
On peut la mesurer au même temps avec le pH, en appliquant les mêmes étapes que ce
dernier
Figure N° ??? pH-mètre allumé Figure N° ??? pH-mètre éteint
c) La température
La température de l'eau est un facteur important dans la reproduction biologique. Ceci
vient du fait qu'elle affecte les propriétés physiques et chimiques de celle-ci; en particulier
la densité; sa viscosité; la solubilité de ses gaz et la vitesse des réactions chimiques et
biochimiques.
d) Dosage de chlorure (Clˉ)
La concentration de l’eau en chlorure peut être plus ou moins élevée en fonction de la
géologie des sols et de leur exposition aux pollutions.
Une présence excessive de chlorures dans l’eau la rend corrosive pour les réseaux de
distribution et nocive pour les plantes. Une forte fluctuation des chlorures dans le temps
peut être considérer comme indice de pollution.
Mode opératoire
1- Introduire 100ml d’échantillon dans un bécher et ajouter un barreau magnétique.
2- Ajouter 0.5ml d’acide nitrique.
3- Titrer par la solution AgNO3 à l’aide d’un Metrohm.
4- Lire la valeur indiquée du volume d’AgNO3 et la multiplier par 35,45.
Figure N° ?? Metrohm
e) Dureté de l’eau (Titre Hydrotimétrique)
Une eau est dite douce ou dure selon sa charge en calcium et en magnésium.
Mode opératoire
1- Prélever 10ml d’échantillon.
2- Ajouter 1ml de solution tampon à base d’ammonium (pH=10) et quelques grains de
l’indicateur NET la couleur devient mauve.
3- Titrer avec la solution EDTA N/50, jusqu’au virage au bleu.
4- Prendre le volume d’EDTA indiqué et le multiplier par le facteur (f=100).
Figure N° ??? Dosage du TH
f) Calcium
Le calcium est un élément très répandu dans la nature. On le trouve dans presque toutes
les eaux naturelles.
Des quantités élevées de calcium dans l’eau du robinet ne présentent aucun risque pour la
santé, elles peuvent néanmoins altérer le goût de l’eau et favoriser l’apparition de tartre
dans les appareils électro-ménagers.
Mode opératoire
1- Prendre 50ml d’échantillon et le mettre dans un erlenmeyer.
2- Ajouter 2ml de NaOH et un soupçon de murexide (indicateur coloré) apparition
d’une couleur rose.
3- Titrer avec la solution EDTA, jusqu’au virage au violet.
4- Prendre le volume d’EDTA indiqué et le multiplier par le facteur (f=8,016).
Figure N° ???Dosage du calcium
g) Magnésium :
Le magnésium existe en abondance dans la nature. Avec le calcium, il contribue à la
dureté de l’eau. Le magnésium a de nombreux bienfaits pour la santé humaine, dont celui
de limiter l’anxiété et l’hypersensibilité au stress.
On peut le calculer par cette formule :
[Mg2+]= ((TH(mg/l) – (Ca2+ (mg/l)*2,5))*0,243
h) Dosage de sulfates (SO4²ˉ)
Leur présence dans les eaux est en général liée à la présence de gypse dans les sols. C’est
un composé naturel qui correspond à la présence de soufre dans l’eau.
Mode opératoire
1- Prélever 25ml d’échantillon.
2- Ajouter 1,25ml de la solution de précipitation et un soupçon du réactif chlorure de
baryum.
3- Lire au spectrophotomètre.
Figure N° ??
Spectrophotomètre
i) Titre Alcalimétrique Complet (TAC)
Il représente la concentration en ions carbonates, bicarbonates et hydroxydes présents
dans l’eau, et permet de stabiliser le pH à la valeur recommandée : pouvoir tampon.
Mode opératoire
1- Prélever 100ml d’échantillon dans un bécher et ajouter un barreau magnétique.
2- Titrer avec HCl.
3- Prendre le volume indiqué à pH=4,23, et le multiplier par le facteur (f=1,003).
3. Paramètres Chimiques
a) Oxydabilité (Matière Organique)
La Matière Organique (MO) contenue dans les eaux est la partie non encore décomposée
de la pollution organique (matières vivantes mortes ou déjections des organismes
vivants). Elles sont donc naturellement présentes dans l’eau, mais à faible concentration.
S’il y en a plus, il y a pollution provenant de rejets d’eaux usées domestiques mal
épurées, d’effluents agricoles, etc.
Mode opératoire
1- Prélever 25ml d’échantillon dans un petit ballon à fond plat, et 25ml d’eau distillée
dans un autre petit ballon pour le témoin.
2- Ajouter 5ml d’acide sulfurique H2SO4 (2mmol/l) dans chaque petit ballon.
3- Placer les sur la plaque chauffante.
4- Quand la température atteint 97°C, ajouter 5ml du permanganate de potassium
(KMnO4) (2mmol/l) la couleur devient rose.
5- Laisser les 10min sur la plaque chauffante.
6- Enlever les petits ballons de la plaque et ajouter 5ml d’oxalate de sodium (Na2C2O4)
(5mmol/l) la couleur devient transparent.
7- Titrer avec KMnO4 jusqu’au changement de couleur du transparent à rose pâle, et
noter la valeur du volume en ml.
8- Ajouter 5ml d’oxalate de sodium au témoin puis titrer à nouveau avec le KMnO4, et
noter le volume en ml.
9- On exprime les résultats par :
[MO] (mol/l)= (V-V0)*16/V
V : Volume de KMnO4 mesuré d’échantillon
V0 : Volume de KMnO4mesuré d’eau distillée
V1 : 5ml d’oxalate de sodium+V0
Avant dosage Après dosage
Figure N° ??? Dosage de la matière organique
b) Dosage de l’Ammonium (NH4+) :
En général, l’ammonium se forme sous l’effet de la décomposition naturelle des matières
organiques. La présence d’ammonium est souvent liée à celle du nitrate et du nitrite. Dans
l’eau, il peut apparaître à cause de déchets issus d’activités agricoles, industrielles ou
domestiques.
Mode opératoire
1- Prendre 40ml d’échantillon dans une fiole jaugée, et 40ml d’eau distillée dans une
autre fiole pour témoin.
2- Ajouter 4ml de réactif 1 et 4ml de réactif 2 dans chaque fiole.
3- Ajuster avec l’eau distillée jusqu’au trait de jauge (50ml).
4- Laisser reposer 1 heure à 25°C au bain marie (si la solution devient verte, ça veut dire
que l’échantillon contient beaucoup d’ammonium).
5- Lire les valeurs au spectrophotomètre.
Figure N° ??? Dosage
de l’Ammonium (NH4+)
c) Dosage de Nitrites (NO2-) :
Les nitrites sont les sels de l’acide nitreux qui est un acide instable de formule HNO 2.
La présence des nitrites dans une eau constitue un indice de pollution.
Mode opératoire
1- Prendre 40ml d’échantillon dans une fiole jaugée.
2- Ajouter 4ml de réactif coloré.
3- Ajuster avec l’eau distillée jusqu’au trait de jauge (50ml).
4- Laisser reposer 20min à température ambiante (si la solution devient rose, ça veut dire
que l’échantillon contient des nitrites).
5-Lire les valeurs au spectrophotomètre.
d) Dosage de Nitrates (NO3ˉ) :
Bien que les nitrates soient énormément moins toxiques et nocifs que les nitrites, il ne
doit pas y en avoir plus de 50mg/l. dans l’eau du robinet. En effet une fois consommés, ils
peuvent évoluer en nitrites dans l’estomac puis se transformer en nitrosamines toxiques et
réputées cancérigènes.
Mode opératoire
1- Mettre l’échantillon dans une cuve en quartz, et lire les valeurs sur le
spectrophotomètre.
2- A l’aide d’une feuille de calcul, on obtient la concentration des nitrates, donc on
introduit les 2 absorbances (λ220nm et λ280nm).
4. Paramètres Bactériologiques :
Les analyses microbiologiques réalisées en laboratoire ont pour but de déceler et évaluer
la présence dans les eaux des microbes pathogènes dangereux pour l’homme : eau
potable, eaux de baignade, …
a) Coliformes :
Les bactéries coliformes sont des micro-organismes que l’on trouve notamment dans les
intestins des êtres humains et des animaux. Pourtant, l’origine des coliformes n’est pas
fécale au sens strict puisqu’ils existent aussi dans l’environnement (sols, végétaux). La
présence éventuelle de coliformes dans l’eau peut être due à un dysfonctionnement lors
du traitement de potabilisation de l’eau, à une durée trop longue de stagnation de l’eau
potable dans les canalisations ou encore à l’intrusion de bactéries dans l’eau potable
(exemple : pollution).
Figure N° ??? Coliformes
Recherche et dénombrement des coliformes totaux:
Mode opératoire :
a. Avant d’entamer un contrôle, on doit stériliser la rampe de filtration :Rincer
l’entonnoir par l’alcool après flamber et refroidir avec eau distillée strérilisée
b. Mettre le filtre de 0,45µm à l’aide d’une pince stérilisée.
c. Mélanger bien l’échantillon.
d. Filtrer 100ml d’échantillon
e. Déposer sur un milieu de culture « TTC tergitol ».
f. Incuber les boites de pétri dans une étuve à 36°C pendant 24h.
g. Inverser la boite de pétri au cours de l’incubation pour éviter les bulles d’air.
h. Après la période d’incubation spécifiée, dénombrer les colonies
caractéristiques qui se présentent sous formes de petites colonies Bleue foncée
à violette pour Escherichia Coli et Rose à rouge pour les coliformes totaux.
b) Entérocoques
Les entérocoques sont des bactéries Gram positif qui se présentent sous forme de
diplocoques ou de coques en chaînettes. Ils sont anaérobies facultatifs, immobiles et
dépourvus de capsule.
Figure N° ?? Entérocoques
Recherche des Entérocoques:
Mode opératoire :
a. Mélanger bien l’échantillon.
b. Utiliser un filtre stérile de 0,45µm et le mettre sur la rampe de filtration à
l’aide d’une pince stérile.
c. Placer l’entonnoir stérile sur la rampe.
d. Filtrer 100ml d’échantillon.
e. Déposer sur un milieu de culture « SLANETZ ET BRATLEY ».
f. Incuber les boites de pétri dans une étuve à 36°C pendant 48h.
g. Inverser la boite de pétri au cours de l’incubation pour éviter les bulles d’air.
Transférer aseptiquement la membrane du milieu de SLANETZ ET
BARTLEY sur une gélose Bile Esculine Azoture (BEA). Cette dernière sera
incubée à son tour à 44°C pendant 2h. Les colonies caractéristiques prennent
alors une coloration noire traduisant ainsi l’hydrolyse de l’esculine présente
dans le milieu.
c) Clostridium :
Leur présence dans l’eau peut être utilisée pour détecter une pollution fécale ancienne ou
intermittente.
Ils sont capables de
réduire le sulfite en
sulfure.
Figure N° ?? Clostridium
Recherche des Clostridium:
Mode opératoire
a. Mélanger bien l’échantillon.
b. Mettre 100ml de l’échantillon dans un flacon en verre stérile.
c. Mettre le flacon dans un bain marie à 75°C pendant 15min afin d’éliminer
toutes les cellules végétatives (il reste que les spores).
d. Utiliser un filtre stérile de 0,22µm et le mettre sur la rampe de filtration à
l’aide d’une pince stérile.
e. Placer l’entonnoir stérile sur la rampe.
f. Filtrer 100ml d’échantillon.
g. Déposer sur un milieu de culture « TSC » à l’inverse.
h. Incuber les boites de pétri dans une étuve à 37°C pendant 48h.
i. Inverser la boite de pétri au cours de l’incubation pour éviter les bulles d’air.
Figure N° ??? Rampe de filtration
Conclusion
Pour conclure, j’ai effectué mon stage de 15jours en tant que futur ingénieure
d’environnement marin et côtier au sein du laboratoire central de la SEOR. Lors de ce stage,
j’ai pu mettre en pratique mes connaissances théoriques acquises à l’ENSSMAL et me suis
confrontée aux difficultés du monde du travail, du contrôle et la surveillance de la qualité des
eaux destinées à la consommation humaines.
Bibliographie
[Link]
[Link]
[Link]
[Link]
de-pollutions-et-atteintes/2-qualite-des-eaux-pollutions-etat-des-cours-deau/2-
bonne-qualite-ou-pollution-des-eaux/parametres-physiques-et-chimiques-de-leau-
indicateurs-des-pollutions/les-differents-parametres-physiques-et-chimiques-des-
eaux-et-commentaires/
[Link]
[Link]
analysesBact/colif