FECONDATION

I)Migraion des sprtz dans appareil genital feminin

Sprtz déposés au fond vagin trajet à parcourir

Rapport sexuel : environ 250 millions sprtz dans vagin
1 millions arrivent à entrer dans utérus
 10 000 arrivent aux extrémités des trompes (ostium tubaire)
Quelques centaines (≈ 500) arrivent au contact ovocyte (complexe cumulo ovocytaire)

La migration des sprtz vers l’ovocyte se fait par chimiotactisme du liquide

folliculairegradient concentration de progestérone tout le long de la trompe qui attirent
sprtz vers ovocyte.

Vagin =orifice directement ouvert a extérieur donc équipé de protection des agression ext :
acidité sécrétion vaginal pH=5
Ensemble sysytème immunitaire (Ȼ de l’immunité) de la muqueuse vaginale capable de
combatre element potetentiellement pathogène ce qui est deletere pour sprtz.

Dans sperme on liquide séminal qui peut temporairement tamponner ambiance acide dans
le vagin (≈ 10s) : pH 5→ pH 7,2
On a aussi Ȼ qui ont pour but de diminuer agressivité des Ȼ immunitaires vaginal
 Les sprtz on peut de temps pour fuir vagin et se réfugie dans glaire cervicale
(environnement bcp + propice à leur survie).

Traversée de la glaire cervicale (2-3 cm de hauteur) (=Réseau de fibres (=mucines) formant

des mailles (+ / - larges) contrôlées par les hormones ovariennes (dépendante des stéroïdes
ovariens), qui sont en concordance avec le cycle ovarien.
Phase ovulatoire (J14)glaire cervicale possède propriétés favorables à
entrer sprtz
Sous influence œstrogène modifie prop modif pour survie sprtz
(hydratation)

Au niveau du col : quelques jours avant l'ovulation, les glandes cervicales

(de l'endocol) secrètent une glaire cervicale muqueuse. Cette glaire protège les
spermatozoïdes situés à l'orifice externe du col de l'acidité vaginale et facilite la migration
des spermatozoïdes qui se déplacent du fait de leur mobilité propre (flagelle). La migration
sera d'autant facilitée que la glaire aura une viscosité faible (richesse en eau) et un pH alcalin
(6,5-8,5)

Maille plus ou moins large en fonction états hydratation qui dépend lui-
même de l’imprégnation en œstrogène (maille large autour période
ovulation x10)
Maille resserrée tres difficile pour sprtz traversé glaire cervicale sur 2
cm (hauteur)
Autour p. ovulatoire : mucus composé à 95% d’eau
 Mucus cervical à un rôle de :
 Réservoir : protection des spermatozoïdes vis à vis du pH acide du vagin
Migration en vague vers la cavité utérine
Sprtz peuvent vivre dans glaire cervical jusqu’à 3 JOURS (2-3 jours)

 Filtre sélection des sprtz mobiles et de morpho normal (morpho anormal 

difficile de franchir glaire cervicale) (durant période péri-ovulatoire)

 Capacitation des sprtz (=ensemble de phénomène permettant au spermatozoïde

d’exprimer tout ce qu’il a acquis lors de la maturation épididymaire)
→ pas spé de glaire cervical mais bcp sprtz acquiert pouvoir fécondant durant traversé glaire
cervicale
Acquisition réversible du pouvoir fécondant
On assiste à une modification membranaire
-perte de plasma séminal et des protéines de décapitation
-déplétion des membranes en cholestérol (vient sécrétion prostate)instabilité et
réorganisation des prot mbR (découverte des récepteurs)
-Entrée de calcium (inhibition de la pompe à calcium + ouverture des canaux ioniques) et
augmentation de AMPc intraȻR (→ augmentation de la perméabilité membranaire au
calcium)

Variation en cholestérol membranaire influence directement la fonction

acrosomique etles sites de fixation du spermatozoïde sur la zone pellucide de
l’ovocyte Sprtz + LIQUIDE instable fusiogène

Liquide séminale reste dans vagin et ne pénètre pas glaire (car coagule au fond vagin)
modifie mobilité du sprtz qui

La capacitation des spermatozoïdes permet de passer d’un mouvement normal (progressive)

à un mouvement hyperactif (mouvement réversible sinon perte de son énergie).
 Permet de lutter contre le courant des trompes
 Permet de pénétrer l’ovocyte

 Mvt normal  le +souvent curviligne (parfois rectiligne) mvt progressif

 Mvt hyperactif kq sprtz capacité  réversible  sprtz capacité alterne phase mvt
progressif et hyperactif (non régulier)

Rq : Lors d'infertilité dans un couple, on effectue le test post-coïtal de Hühner. (Test à ne

plus faire)
Il s'agit d'analyser la glaire cervicale au lendemain d'un rapport sexuel durant phase
ovulatoire → permet voir d'éventuelles malformations sprtz + étude interaction glaire –sprtz
(prélèvement glaire abondante phase ovulatoire)
Cavité utérine
(≈ 1 millions sprtz)
Traversé cavité utérine  6 à 7 cm de haut
Traversé en ≈ 1h (≈ 1h)

Sprtz aidés par contraction du myomètre (concentration crânio-

caudal : du col vers le fond utérin) + cils vibratiles

Contraction physiologiquement active lors période ovulatoire

Contraction favorisée par liquide séminal par molécule qui a action myocontractante
(absorbé par paroi vaginal et directement transmise à )

Contraction muscles lisses dans trompes + mouvements hyperactifs

Sprtz stockés dans isthme et ampoule.

≈ 10 000 sprtz arrivent aux ostiums tubaires
Replis muqueux muqueuse labyrintique utilité du mvt hyperactif
 Le piège principal des trompes est de s’y perdre
Ambiance favorable a survie des sprtz (nutriment+ Ɛ+ zone ancrage pour sprtz repos
(muqueuse qui contrôle ca)) dans muqueuse trompe sprtz peuvent survivre 2 J dans les
replis de la muqueuse tubaire
→Sprtz peut survivre en tout 5 j dans tractus génital féminin

Quelques centaines vont accéder au complexe imuno-ovocytaire

Ovocyte dans complexes cumulo ovocytaire

Ovocyte pas statique va en sens inverse des sprtz vers utérus
Ovocyte et sprtz se rejoignent dans ampoule tubaire
Fécondation entrée sprtz dans ovocyte

Sprtz rencontre 3 obstacles à franchir :

1. cellules du cumulus oophorus (composées d'acide hyaluronique et de granules
protéiques),
2. zone pellucide (coque rigide de glycoprotéines) pour atteindre l'espace péri-vitellin,
3. membrane plasmique de l'ovocyte

Pour franchir ces 3 obstacle sprtz a 2 outils :

 Flagelle
 Acrosome
Ex : si flagelle immobile ou pas acrosome impossibilité de traverser obstacles
Sprtz sans acrosomes= globozoospermie
 Les grandes étapes de la fécondation :
 La réaction acrosmique (sécrétion des enzymes
de l’acrosome)
 La traversée du cumulus oophorus
 La traversée de la zone pellucide (attachement
sprtz à ZP (possibilité détachement) → fixation
spé si affinité : permet protection espèce → puis
pénétration dans mb ovocytaire)
 La fusion à la mb ovocytaire

1) Réaction acrosomique
Nécessite la capacitation du spermatozoïde + présence Ca++
Capacitaion  condition obligatoire pour réaction acrosomique
Capacitation rend les mb plus fusiogene qui est necessaire pour la future
fusion des mb plasmiques et acrosomiques externe
Mb acrosomique a 2 parties :
 Extérieure : en regard mb plasmique du sprtz
 Intérieure : au contact du noyau
L’acrosome contient des enzymes qui sont libérées lors de la réaction :
 Protéases
 Acrosines = peptidase : casse partie protidique glycoprot, aussi
stock sous forme acrosome e devient active lors réaction
acrosomique et peut cliver zone pellucide
 Hyaluronidases  permet casser pont acide hyaluronique des Ȼ
du cumulus
 Phosphatase acide

Mécanisme : entrée massive de Ca++ par ouverture des canaux calciques

→ entrée d'ions bicarbonates → augmentation du pH intracellulaire →
transformation de la pro-acrosine en acrosine → facilite la fusion des
membranes → libération du contenu de l'acrosome =réaction
acrosomique

Mb acrosomique externe fusionne avec mb plasmique mais seulement au

niveau segment principal et réaction acrosomique n’a pas lieu sur totalité
tête du sprtz mb plasmique au niveau région post-acrosomique reste
intacte pour permettre fusion avec mb ovocyte.

 Membranes forment vésicules (de mb plasmique & acrosomique externe), qui se

dispersent, laissant échapper contenu acrosomecontenu sac acromial déversé à extérieur

 Réaction acrosomique = irréversible

 sprtz acrosomé  recouvert à l’avant par mb acrosomique interne → déterminant pour
suite fécondation→ structures indispensables pour contact avec ovule sont ainsi
découvertes.
Par conséquent des modifications ont lieu en particulier dans la zone membranaire post-
acrosomique (=cape post acrosomique)

 capacitaion sprtz rend mb spermatique instable  permet capacité fusion mb

Acrosine a rôle dans la fusion des mb et dans la réaction acrosomique

2) Traversée cumulus oophorus

-Réaction acrosomique pour les spz de la 1ère vague induit par forte concentration en
progestérone dans cumulus : libération de hyaluronidase favorisée par la progestérone
sécrétée par les cellules du cumulus : coupe les ponts d'acide hyaluronique →rend couche +
lâche & diminue C° en progestérone ce qui permet traversée pour certains sprtz (travail
équipe) qui ne font donc pas leur réaction acrosomique.

-tous les spermatozoïdes ne font pas leur réaction acrosomique mais traverse grâce aux
sprtz qui ont fait leur réaction acrosomique

3) Traversée zone pellucide

(Plus difficile à traverser que obstacles précédents car ZP = coque beaucoup plus dure)

Zone pellucide est une zone composée d’1mélange de 4 glycoprotéines organisée en réseau
(maillage) : ZP1, ZP2, ZP3 et ZP4 (Zona Protéine)

Pour franchir ZP, sprtz doit se fixer à sa surface et modifier la structure de sa tête par la
réaction acrosomique + franchir épaisseur de sa paroi.
La reconnaissance met en jeu système de liaison généraux comme ceux par lesquels les Ȼ se
fixent à des lames basales ou des matrices extra ȻR

-reconnaissance des ZP3 et ZP4 par R de la mb sprtz→ pour sprtz qui n’ont pas fait réaction
acrosomique.
er
- Fixation primaire : 1 contact entre le spermatozoïde et la zone pellucide par les chaînes
glucidiques de ZP3, acrosome n’a pas fait réaction acrosomique
Implique ZP3 ovocytaire + recepteurs spé de la MP recouvrant partie ant de acrosome du
sprtz
→spé d’espèce car sucre différent en fonction ZP des espèces
(Reconnaissance +fixation des sprtz capacités sur ZP ovocyte requièrent spécificité espèce
assuré par les oligosacchariddes pellucidaires.)

Le sysytème le mieux connu concerne la β 1,4-galactosyltransférase ancrée dans la mb

plasmique spermatique qui reconnait la chaine oligosaccharidique β-N
 acétylglycosaminidase de ZP3. → liaison etre ce R et ligand= fixation priamire à la zone
pellucide = spécificié d’espce lié au sucres qui sont spécifiuqe despece

Des données expérimentales (chez certains animaux) suggèrent que ZP4 aurait aussi activité
de fixation du sprtz

- Induction de la réaction acrosomique par ZP3 (partie protéique) → acrosine → coupe

glycoprotéines de la zone pellucide
- Fixation secondaire : après réaction acrosomique →ancrage du sprtz conforté par fixation
à ZP2 de proteines de la mb acrosomique interne : proacrosine et SPAM-1+ enz qui coupe le
sucre de la ZP3
De cette manière sprtz →capable continuer sa progression à travers ZP
→ZP2 reconnait SPAM1 (mb acrosomique int) : permet la protection de l’espèce
Sprtz traverse ZP par trajet oblique en creusant tunnel qui se referme derrière lui.
Pour franchir zone pellucide, sprtz a besoin de 2 actions :
- Une action mécanique : mouvement hyperactif du sprtz → favorise pénétration
- Une action enzymatique : réaction acrosomique →intervention plusieurs enzymes
acrosomiales (β-N acétylglycosaminidase→ rompt liens entre sprtz et ZP2/ZP3,
hyaluronidase → dissout A. hyaluronique occupant espace entre les mailles ZP, acrosine
→rompt localement ponts dissulfures entre ZP1 et ZP2/3 et active protéines fusiogènes)

Des récepteurs de la ZP3 sont sur la membrane plasmique (tête) du sprtz → facilitent traversée ZP
pour se retrouver dans l’espace pé[Link] entre sprtz et ZP nécessite que acrosome
soit intact au niveau de la région post-acrosomique.

Une fois ZP franchis→arrivée dans l'espace péri-vitellin

(Zone traversée pellucide – étendue que celle du cumulus oophorus )
.
4) Fusion avec mb ovocytaire

Après la traversée de la zone pellucide, le spermatozoïde se retrouve dans l’espace péri-

vitellin de l’ovocyte sprtz a obligatoirement fait sa réaction acrosomique ce qui Cape post-acrosomique
démasque certain R au niveau de la cape post-acrosomique .
Sprtz se positionne parallèlement a mb plasmique post ovocytaire possibilité
reconnaissance ligand sur MP du sprtz et récepteur ovocytaire (dont les integrines
et les tétraspanines)
Ex : izumo 1 (sur sprtz) et juno (R ovocyatire )
La fusion avec la membrane ovocytaire se fait au niveau de la cape post-
acrosomique (membrane restée intacte après la réaction acrosomique) : nécessite la Mb ovocytaire
réaction acrosomique (déjà faite)
Cette liaison est le signal de la fusion (mb spermatique et ovocytaire de proche en proche) →
ensemble du sprtz va rentrer dans ovocyte
Inclusion de la totalité du spermatozoïde (y compris les mitochondries mito
spermatque de PI)
 Processus non spécifique à espèces

Le spermatozoïde apporte à l’ovocyte :

- Son patrimoine génétique contenu dans son noyau
- Une protéine, l’oscilline, à l’origine de l’activation ovocytaire (reprise de la méïose)
- Le centriole proximal (au niveau du cou) permettant la formation du fuseau nucléaire
Les granules corticaux subissent une réaction avec pour but :
- Préparer la membrane ovocytaire à la fusion avec la membrane post-acrosomique
- Empêcher la polyspermie

→ Π (dont mito)& flagel (axoneme) rapidement détruit

5) Conséquence pour le spermatozoïde

Centriole proximal va participer et tout le reste et dégradé par ovocyte  génome

mitochondrial d’original paternel n’est pas transmis mais est digéré
ꞥ subit remanimment massif et rapide
- En ≈ 1 heure →Mb (enveloppe) digéré et remplacé par nouvelle enveloppe bcp +
poreuse, lache et perméable → Kne sprtz complètement décondensé (facilite
accés)
Protamine digérée et casser pont disulfure en particulier par glutathion qui a
particularité de casser ponts disulfures
- Protamine remplacée par histone spé ovocyte qui rend génome du sprtz plus
accessible donc possibilité utilisation de se génome pour faite transcrit
- Formation Pronucléus male (Kne décondensé entpuré de nouvelle mb)ꞥ qui
contient nique avec nucléole (utilisable pour la transcription)
 6) Conséquences pour ovocyte : Activation ovocytaire

Activation ovocytaire permet réalisation 1e cycle ȻR qui s’achève par la 1e division de

segmantation.
Se traduit par ≠ modifications moléculaires au niveau cytoplasme et ꞥ ovocytaire :
 Réaction corticale : expulsion des granules → Modification de ZP3 et ZP2 (casser) :
blocage de la polyspermie, conservation de la diploïdie (protection diploïdie)
Libération des granules dans espace péri-vitellin par exocytose
Modifications de la membrane plasmique : perte des microvillosités
ème
Reprise de la méiose : formation du pronucléus femelle et expulsion du 2 globule polaire
Activation du programme de développement de l’embryon : traduction en protéines des
ARNm (adénylation)
++
Mécanisme : mobilisation libération du Ca intracellulaire (stocké dans le RE) par
phospholipase C zeta (PLC ) (ou l’oscilline) contenue dans le cytoplasme du spermatozoïde
→ cascade aboutissant libération IP3 puis libération brutale Ca++ à partir réserve RE.
Formation du zygote avec 2 pro-noyaux (ou pronuclei) + 2 globules polaire dans espaces
péri-vitellin
1e mitose embryonnaire

Synthèse d’ADN (comme avant toute mitose) au sein des pro-noyaux individuellement
d’abord male puis femelle(pour passer à 4 n ADN)
En parallèle pro-noyaux en position sous cortical migrent au centre zygote  enveloppes
nucléaires pronuclei disparaissent
Globules polaires se placent perpendiculairement à l'axe du fuseau.
Mise en place d’un seul fuseau de division à partir du centrosome qui dérive du centriole
proximal du spermatozoïde qui va diriger les MT pour former plaque métaphasique
Une seule plaque métaphasique permettant le mélange des chromosomes paternels et
maternels : amphimixie ou caryogamie (qtt 2n K et 4n ADN)
Les chromosomes gagnent chacun des pôles du fuseau où se reconstitue une cellule.
Cytodiérese : sépration de Ȼ filles → Il en résulte la formation d'un œuf ou zygote à deux
cellules diploïde appelées blastomères.
Dans espèce humaine 1e div survient 25-30 h après fecondation

Remarque
Fécondation uniquement d’ovocyte mature(M2)
Ovocyte immature non fécondable car ne peuvent pas subir effet LH
C déverse direct dans ovocyte certains facteurs qui servent à bloquer reprise méiose qui
bperlettte de couper jonction qui bloque reprise méiose

  Délivre phospholipase C zeta (PLC ) qui provoque cascade qui aboutit à libération
brutale s-de Ca++→entraine augmentation calcique intraȻR (massive et transitoire)

 Activation de l’ovocyte sans fécondation (spontanée ou induite (facteur chimiue qui

provoque ouvertures tock calcique) ou mécanique (influ elctrique)) : c’est la
parthénogenèse (ovocite mature sans sprtz)
Ovocyte expulse 2e globule polaire spontanément et aboutit à embryon parthédote réaction
corticale  parthéonogenese →division conduit à « reproduction monoparentale »`
 non viable (ne peut pas dépasser quelques cycle div)

 Tripoloidie  5 %ovocyte fecondé soit

- 2 sprtz on réussit à entrer : on a + de pro-noyau paternel que maternel
-non expulsion du 2e globule polaire  + de pro-noyau maternel que paternel
 non viable mais bon dvlp embryonnaire
Transfert de noyaux :
 Zygote gynogénotes ( 2 pronuclei femelle) peu de malformation -> placenta peu dvlp et
hypophasique mais retard ou arrêt dvlp embryo et foetal → hypoplasie imp du placenta
 Zygote angrogenotes (2 pronuclei males) dvlpt embryon tres anormal (beaucoup
malformation) & placenta hyperplasique
 geno mat et pat → pas le même rôle
 Certains gènes soumis à emprunte parentale (≈ 100 dans espece humaine)  ne s’exprime
que si il provient expression mono-allélique  centaine connus  fonction qui s’exerce
dans devlp précoce (embryo) ou placentaire
zygote desours : gros pronucléi= femelle et petit = male
Gène capitaux dans le devellopemnt qui e s’exprme que dans l’allele maternelle ou parternel
→pas de compensation si defaut

 Clonage ( ꞥ des Ȼ somatique )

(chez espèce humaine pro-noyau ♀ et ♂ ≈ même taille)

II) 1e remaniements de développement de l’embryon

Suite à la 1e mitose: rythme croissant de mitoses, 1 toutes les 10h environ

1) Aspects morphologiques

2eme div : Stade 4 à 8 cellules a peu près synchrone : mise en place du génome
embryonnaire

3e div : Stade 10 à 16 cellules  embryon à 8 Ȼ  div symetrique mais non synchrone

compaction → apparition de contacts entre les cellules(augmentation contact entre les Ȼ ) :

–jonctions adhérentes  plus de distinction des >Ȼ : créent le lient physique : adhésion ȻR
–jonctions serrées polarisation cellulaire (côté interne embryon) et permet ou empêche que
molécule ou protéine soluble se balade ou ions puisse s’immiscer entre Ȼ → permet création
d’un gradient osmotique e
Jonction sont selectives por le passage de certaine molévues

-gap jonctions communication entre les cellules  échanges de signaux moléculaires

→coordination des Ȼ

Compaction concerne principalement les Ȼ periph et seulement tes peu les Ȼ centrales

Lors compaction Ȼ periph embryon se polarisent

PA : vers ext embryon

PB : ver centre embryon

Entre 2e et la 3e (entre stade 4 & 8 Ȼ) on a activation génome embryonnaire traduction

génome embryonnaire traduit ces propres transcrit  nécessaire au dvlpt

Stade 16 cellules = morula → début de la différenciation cellulaire (on discerne encore Ȼ

indiv)
Stade 32 cellules = morula compactée → fin de la différenciation cellulaire→ aparition cavité
lipdienne

Compaction traduit augmentation des contacts

Compaction phénomène nécessaire pour obtenir stade ultérieur

Stade 100 cellules = blastocyste (4ème jour) → apparition de 2 types de tissus :

 Masse cellulaire interne (=cellules centrales)→embryon proprement dit + trophoblaste

(= cellules périphériques) → annexe : mb fœtales et placenta
 blastocèle (cavité́ liquidienne formée par un gradient osmotique créé par les pompes
Na+/K+ et aquaporines )

5ème jour : blastocyste expansé́ (accumulationV augmente et diametre x2 → augmentation

taille entre 4e et 5e jour de 120 m à 250 m), la ZP s'amincit puis se rompt sous l'action de
protéases du trophectoderme

Implantation dans la muqueuse utérine aux alentours du 6ème jour.

Eclosion blastocyte exopansé et sors ZP et entre en contact avec tissus maternelle 

muqueuse utérine (5e -6e jour)

2) Aspect métabolique et moléculaire

Le génome embryonnaire se met à transcrire Jusqu’au stade 4

cellules : l'embryon se développe avec les transcrits d'origine
ovocytaire (= maternels) → utilisation du pyruvate comme
source d'E (phosphorylation oxydative)
Du stade 4 Ȼ à 8 Ȼ : devlpt d’embryon avec ses propres transcrit ainsi que les transcrits
maternels : mise en place d’un relais

A partir 8 Ȼ : embryon se dvlp uniquement avec ses propres transcrits→ utilisation du glucose
comme source d'énergie (glycolyse anaérobie).

Métabolisme énergétique d’embryon embryon modifie source énergétique

Zygote jusqu’à 8 Ȼ  pyruvate (glucose toxique) (cycle de Krebs)
8 Ȼ (à partir compaction)blastocyste : glucose (- de quantité mais bcp + rapide) glycolyse
anaérobie

2) Migration dans la trompe et relation avec milieu tubaire

Fecondation dans ampoule tubaire (1/3 distal de la trompe)

Migration + dvlpt  synchrones pour qu’il aboutissent à un stadede blastocyte nn e
Expansion du blastocystecavité utérine
Contraction du muscle tubaire
Rôle des cils de épithélium tubaire dans mvt embryon +++  unidirectionnel et synchrone
vers cavité utérine
Implantation se fait face postéro sup de utérus

 Relations avec le milieu tubaire :

Sécrétions tubaires sous dépendance d’hormones ovariennes

Exemple de l’IGFI :
Progestérone permet sécrétion IGFI par épithélium tubaire→ stimulation des mitoses des
blastomères
Récepteurs pour IGFI sur cellules embryonnaires
IGFI augmentation du développement des embryons
(Stéroïdes ovariens régulent les secrétions tubaires → rôle nourricier pour l'embryon.)

4) Clones et chimères

 Clone
A partir de cellules d’embryons avant différenciation Section de blastocystes →individus
génétiquement identiques → vrais jumeaux

 Chimères
Injection de cellules de masse cellulaire interne d’un autre embryon d’espèce proche (caille-
poulet) dans blastocyste → fusion de 2 embryons différents entre eux → rare dans espèce
humaine (≈ 5 cas )
1 individu constitué de 2 génome ≠
Ȼ de MCI d’une espece dans MCI dans son blastocyte d’un utre espece

 Clonage thérapeutique
Clonage, culture in vitro jusqu’au stade blastocyste.
Utilisation des cellules ES (Embryonic Stem Cells) : cellules souches de masse cellulaire
internedifférenciation in vitro
→clonage hétérospécifique : fusion ovocyte énucléé d'animal et ꞥ de Ȼ somatique humaine.