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Dosage des protéines par méthode Bradford

Le document décrit un protocole de dosage des protéines par la méthode de Bradford. La méthode implique le changement de couleur du bleu de Coomassie lorsqu'il se lie aux acides aminés des protéines, permettant ainsi de mesurer la concentration protéique.

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Le document décrit un protocole de dosage des protéines par la méthode de Bradford. La méthode implique le changement de couleur du bleu de Coomassie lorsqu'il se lie aux acides aminés des protéines, permettant ainsi de mesurer la concentration protéique.

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RépubliqueAlgérienneDémocratique

et P o p u l a i r e
M i n i s t è r e de l ’E n s e i g n e m e n t S u p é r i e u
r
et de la R e c h e r c h e S c i e n t i f i q

Université : Mostapha Ben Boulaid


batna2
Faculté :Science de la nature et de la vie
Département : Biologie des organisme

TP 2 :
Dosage des protéines méthode de
bradford

Dirigé par :

Réalisé par :

FARIEL BENSLIRANE
introduction

La méthode est basée sur un décalage d’absorbance du colorant Coomasie Brilliant Blue
dans lequel, dans des conditions acides, la forme rouge du colorant est convertie en sa forme
bleue pour lier la protéine en cours d’analyse. La formation du complexe colorant-protéine
prend environ deux minutes et reste stable pendant une heure, donc la procédure est très
rapide et le temps d’essai n’est pas limitati

.La méthode de Bradford est une méthode d'analyse spectroscopique utilisée pour mesurer
la concentration des protéines en solution.

le principe :
La méthode de Bradford est un dosage spectrophotométrique, basé sur le changement
d'absorbance après la fixation d'un colorant, se manifestant par le changement de la couleur
du Bleu de Coomassie après liaison (complexification) avec les acides aminés basiques
(arginine, histidine, lysine.) et les résidus hydrophobes des acides aminés (aromatiques)
présents dans la ou les protéines. La forme liée (anionique) du colorant est bleue, et possède
un spectre d’absorption maximal estimé à 595 nm. Les formes libres (cationiques) du
colorant sont rouges et marrons, absorbant à 465-470 nm. Le changement d'absorbance est
proportionnel à la quantité de colorant lié, indiquant donc la concentration en protéines dans
l'échantillon

le protocol :

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