Dosage de l'Alanine Aminotransférase
Dosage de l'Alanine Aminotransférase
fr
AMINOTRANSFERASE
7D56-21
B7D5G2
48-8983/R1
ALANINE
AMINOTRANSFERASE
Cette notice contient des informations relatives à l'utilisation du dosage Alanine Aminotransferase sur les
analyseurs ARCHITECT c Systems et AEROSET.
REMARQUE : Lire attentivement cette notice avant d'utiliser le dosage et suivre scrupuleusement les
instructions. La fiabilité des résultats du dosage ne peut pas être garantie si ces instructions ne sont pas
strictement respectées.
Pour de plus amples informations, contacter le Service Clients Abbott.
Concentration Réactif 2
Contenu Référence
Mandataire au sein de la
Numéro de série
Communauté européenne
Composants Consulter les instructions d'utilisation
Dispositif médical de diagnostic
Fabricant
in vitro
Numéro de lot Conserver à
Juillet 2009
©2009 Abbott Laboratories
1
DENOMINATION 4. ATTENTION : Ce produit nécessite la manipulation d'échantillons
ALANINE AMINOTRANSFERASE humains. Il est recommandé de considérer tous les composants d'origine
humaine comme potentiellement infectieux et de les manipuler selon
DOMAINE D'APPLICATION les règles "OSHA Standard on Bloodborne Pathogens".1 Les produits
Le dosage Alanine aminotransférase (ALT) est utilisé pour la détermination contenant ou susceptibles de contenir des agents infectieux doivent
quantitative de l’alanine aminotransférase dans le sérum ou le plasma être manipulés selon les règles de sécurité biologique de niveau 22 ou
humain. autres règles de sécurité biologique en vigueur.3,4
RESUME ET EXPLICATION DU TEST PRELEVEMENT ET MANIPULATION DES ECHANTILLONS
L'alanine aminotransférase (ALT), également appelée transaminase
Echantillons à utiliser
glutamo-pyruvique (GPT), est une enzyme intervenant dans le métabolisme
des acides aminés. Elle est présente dans de nombreux tissus, mais les Les échantillons de sérum et de plasma sont appropriés pour cette
concentrations les plus élevées se trouvent dans le foie et les reins. La analyse.
destruction tissulaire entraîne la libération de l'enzyme intracellulaire ATTENTION : Les érythrocytes contiennent environ 3 à 5 fois plus d'ALT
dans la circulation sanguine. Des concentrations en ALT sérique très que le sérum.5
élevées peuvent être observées dans un certain nombre de maladies L'hémolyse d'un échantillon de sérum ou de plasma peut provoquer une
impliquant le foie, telles que l'hépatite, la mononucléose et la cirrhose. Ces augmentation des résultats d'analyse.
concentrations en ALT très élevées ne sont généralement pas observées
pour d'autres maladies, comme par exemple l'infarctus du myocarde ; • Sérum : Utiliser du sérum prélevé selon les techniques standard de
aussi l'ALT est-elle considérée à juste titre comme l'indicateur spécifique ponction veineuse dans des tubes en verre ou en plastique avec ou
d'une maladie hépatique. sans gel séparateur. S’assurer que la coagulation est terminée avant
d’effectuer la centrifugation. Lors du traitement des échantillons,
PRINCIPES BIOLOGIQUES DE LA METHODE
séparer le sérum des globules rouges ou du gel selon les
L'ALT présente dans l'échantillon catalyse le transfert du groupe aminé instructions du fabricant des tubes de prélèvement des échantillons.
de la L-alanine vers l'α-cétoglutarate en formant du pyruvate et du
L-glutamate. En présence de NADH et de lactate déshydrogénase (LD), La coagulation de certains échantillons, notamment de ceux provenant
le pyruvate est réduit en L-lactate. Au cours de cette réaction, le NADH de patients sous traitement anticoagulant ou thrombolytique, peut durer
est oxydé en NAD. La réaction est contrôlée en mesurant la vitesse de plus longtemps. Des caillots de fibrine peuvent se former dans ces
diminution de la densité optique à 340 nm, provoquée par l'oxydation du sérums et engendrer des résultats erronés.
NADH en NAD. • Plasma : Utiliser du plasma prélevé selon les techniques standard de
Méthodologie : NADH (sans P-5'-P) ponction veineuse dans des tubes en verre ou en plastique. Se référer
au tableau ci-dessous pour connaître les anticoagulants pouvant être
REACTIFS utilisés. S'assurer que la centrifugation est adéquate pour éliminer les
Kit de réactifs plaquettes sanguines. Lors du traitement des échantillons, séparer le
Le kit de réactifs ALT, 7D56, contient deux réactifs liquides prêts à plasma des globules rouges ou du gel selon les instructions du fabricant
l'emploi conditionnés comme suit : des tubes de prélèvement des échantillons.
10 x 70 ml Pour connaître le volume total d'échantillon requis, se référer au
10 x 21 ml paragraphe PARAMETRES DE DOSAGE de cette notice, spécifique à
l'analyseur utilisé et au Chapitre 5 du Manuel Technique correspondant.
Le nombre de tests réalisables par kit est estimé à 3 621.
Ce calcul est fondé sur le volume minimum de réactif dans chaque kit. Récupération de l'analyte
La récupération de l'analyte dans les échantillons de sérum/plasma a été
Composants réactifs Concentration déterminée comme étant le pourcentage moyen de récupération dans le
β-NADH 0,16 mg/ml sérum recueilli dans des tubes en verre.
Lactate déshydrogénase 2,57 U/ml Anticoagulant Récupération (%)
L-alanine 392 mmol/l Héparinate de lithium (avec ou sans gel séparateur) 100,3
Acide-α-cétoglutarique 77 mmol/l Héparinate de sodium 100,1
L-alanine 1 000 mmol/l EDTA 97,1
MANIPULATION ET CONSERVATION DES REACTIFS Citrate de sodium 80,2
Tube en plastique/sérum 99,9
Manipulation des réactifs
Si des bulles d'air sont présentes dans la cartouche de réactif, les éliminer Tube avec gel séparateur de sérum/sérum 100,8
à l'aide d'un bâtonnet neuf. Il est également possible de laisser les réactifs Ne pas utiliser d'héparinate d'ammonium.6
reposer à la température de conservation appropriée pour permettre aux
bulles de se dissiper. Afin de limiter la perte en volume, ne pas utiliser de Conservation des échantillons
pipette de transfert pour éliminer les bulles. Sérum et plasma : Il est recommandé d'analyser les échantillons le jour
ATTENTION : La présence de bulles d'air dans les réactifs peut même du prélèvement.7,8 Les échantillons séparés sont stables pendant
compromettre la détection correcte du niveau de réactif dans la cartouche, 3 jours s'ils sont conservés à 30 °C, pendant 7 jours s'ils sont conservés
entraînant une aspiration insuffisante de réactif pouvant influencer les entre 2 et 8 °C ou pendant 60 jours s'ils sont conservés à une température
résultats. inférieure ou égale à -40 °C.5,9-17 Une réduction de l'activité de l'ALT de
11 % a été observée dans les échantillons conservés à -20 °C pendant
Conservation des réactifs 8 jours et de 20 % dans les échantillons conservés à -20 °C pendant un
Les réactifs non ouverts sont stables jusqu'à leur date d'expiration s'ils mois.18
sont conservés entre 2 et 8 °C. REMARQUE : Vérifier l'absence de particules en suspension dans les
Les réactifs ouverts conservés à bord de l'appareil sont stables pendant échantillons conservés. En cas de présence de particules, homogénéiser et
27 jours. centrifuger les échantillons afin d'éliminer les particules avant l'analyse.
MISES EN GARDE ET PRECAUTIONS
Précautions d'emploi
1. Pour diagnostic in vitro.
2. Ne pas utiliser les composants au-delà de leur date d'expiration.
3. Ne pas mélanger des composants provenant de kits portant des numéros
de lots différents.
2
PROCEDURE RESULTATS
Matériel fourni Pour de plus amples informations sur le calcul des résultats, se référer
au Manuel Technique correspondant.
7D56 ALT Reagent Kit
• Manuel Technique ARCHITECT — Annexe C
Matériel nécessaire mais non fourni • Manuel Technique AEROSET — Annexe A
• Contrôles Des données de performance indicatives sont indiquées dans les
• Solution saline (0,85 à 0,90 % de NaCl) pour les échantillons nécessitant paragraphes VALEURS ATTENDUES et CARACTERISTIQUES
une dilution SPECIFIQUES de cette notice. Les résultats peuvent varier d'un laboratoire
Procédure de dosage à l'autre.
Pour obtenir la description détaillée de la réalisation d'un dosage, consulter LIMITES DE LA METHODE
le Chapitre 5 du Manuel Technique correspondant. Se reporter aux paragraphes PRELEVEMENT ET MANIPULATION et
Procédures de dilution des échantillons CARACTERISTIQUES SPECIFIQUES de cette notice.
Les analyseurs ARCHITECT c Systems et AEROSET possèdent des VALEURS ATTENDUES
fonctions de dilution automatique ; pour de plus amples informations, se
Plage de référence
référer au Chapitre 2 du Manuel Technique correspondant.
Sérum et plasma : Les échantillons dont les concentrations en alanine Sérum19, 20/Plasma
aminotransférase sont supérieures à 942 U/l (4 113 U/l pour la linéarité
Flex Rate) sont accompagnés d'une annotation et peuvent être dilués à Plage (U/l)
l'aide du protocole de dilution automatique ou de la procédure de dilution Adulte 0 à 55
manuelle. Il est recommandé à chaque laboratoire de déterminer sa propre plage de
référence en fonction des caractéristiques locales et de population.
Protocole de dilution automatique
En cas d'utilisation du protocole de dilution automatique, l'analyseur CARACTERISTIQUES SPECIFIQUES
effectue une dilution de l'échantillon au 1/5 et corrige automatiquement Linéarité
la concentration en multipliant le résultat par le facteur de dilution Le dosage ALT est linéaire jusqu'à 942 U/l.
approprié. La linéarité Flex Rate est de 4 113 U/l. Pour utiliser la linéarité Flex Rate,
Procédure de dilution manuelle l'utilisateur doit régler la valeur de linéarité haute sur 4 113 dans l'écran
La dilution manuelle doit être effectuée comme suit : correspondant.
• Utiliser une solution saline (0,85 à 0,90 % de NaCl) pour diluer • ARCHITECT c Systems - fenêtre Configuration des paramètres de
l'échantillon. dosage - Résultats
• Saisir le facteur de dilution dans l'écran des demandes patient ou • AEROSET - écran Paramètres de dosage, page Généralités
de contrôles. Le système utilise ce facteur de dilution pour corriger
automatiquement la concentration en multipliant le résultat par le facteur La linéarité a été vérifiée à l'aide du protocole NCCLS EP6-P du CLSI
saisi. (Clinical and Laboratory Standards Institute).21
• Si le facteur de dilution n'est pas saisi, le résultat doit être multiplié par Limite de détection (LD)
le facteur de dilution utilisé avant d'être communiqué. La LD est de 2,0 U/l pour le dosage ALT. La LD correspond à la concentration
REMARQUE : Si un résultat d'échantillon dilué est accompagné d'une moyenne d'un échantillon sans analyte + 2 E.T., où E.T. représente l'écart
annotation indiquant que sa valeur est inférieure à la limite linéaire basse, type intra-série global de l'échantillon sans analyte. Une étude réalisée sur un
ne pas rendre le résultat. Réanalyser l'échantillon en utilisant une dilution analyseur ARCHITECT c System et sur l'AEROSET a fourni une LD de 1,3 U/l
adéquate. Pour de plus amples informations sur les demandes de dilutions,
se référer au Chapitre 5 du Manuel Technique correspondant. pour le dosage ALT.
Limite de quantification (LQ)
CALIBRATION
La calibration est stable pendant environ 27 jours (648 heures) et doit être La LQ pour le dosage ALT est de 5,1 U/l. La LQ est la concentration
effectuée à chaque changement de numéro de lot de réactifs. Vérifier d'analyte pour laquelle CV = 20 %.
la calibration avec au minimum deux niveaux de contrôles, selon les Substances interférentes
procédures de contrôle de qualité établies dans votre laboratoire. Si les
résultats du contrôle se situent en dehors des limites acceptables, une Des études d'interférence ont été menées conformément au protocole
nouvelle calibration peut s'avérer nécessaire. NCCLS EP7-P du CLSI.22 Les effets des substances interférentes ont été
étudiés par les méthodes de dose-réponse et des différences appariées,
Un facteur de calibration doit être saisi. Pour toute information sur la
au seuil de décision médicale de l'analyte.
valeur à saisir, se référer aux sections PARAMETRES DE DOSAGE de
cette notice. Valeur
• ARCHITECT c Systems - fenêtre Configuration des paramètres de Substance Concentration de la Cible observée
dosage - Calibration n
interférente substance interférente (U/l) (% de la
• AEROSET - écran Paramètres de dosage, page Calibration valeur cible)
Pour obtenir une description détaillée de la calibration d'un dosage,
30 mg/dl (513 μmol/l) 4 53,1 95,3
consulter le Chapitre 6 du Manuel Technique correspondant. Bilirubine
60 mg/dl (1 026 μmol/l) 4 53,1 88,1
CONTROLE DE QUALITE
La procédure suivante est recommandée par Abbott pour le contrôle de 750 mg/dl (7,5 g/l) 4 47,4 107,9
qualité. Consulter les procédures de fonctionnement standard et/ou le Hémoglobine
1 000 mg/dl (10,0 g/l) 4 47,4 111,0
programme d'assurance de qualité du laboratoire pour connaître les autres
exigences en matière de contrôle de qualité et les mesures correctives 550 mg/dl (5,5 g/l) 4 50,6 97,2
éventuelles à appliquer. Intralipid
625 mg/dl (6,25 g/l) 4 50,6 96,8
• Deux niveaux de contrôle (normal et haut ou bas) doivent être analysés
toutes les 24 heures. Les concentrations de bilirubine ont été obtenues par addition de bilirubine
• Si des contrôles plus fréquents sont nécessaires, suivre les procédures à des pools de sérum humain. Les concentrations d'hémoglobine ont été
de contrôle de qualité en vigueur dans le laboratoire. obtenues par addition d'hémolysat à des pools de sérum humain. Les
• Si les résultats des contrôles de qualité se situent en dehors des concentrations d'Intralipid ont été obtenues par addition d'Intralipid à des
limites définies par le laboratoire, il se peut que les valeurs obtenues pools de sérum humain.
pour les patients soient erronées. Suivre les procédures du contrôle de
qualité en vigueur dans le laboratoire. Une recalibration peut s'avérer Les interférences provoquées par des médicaments ou des substances
nécessaire. endogènes peuvent avoir une incidence sur les résultats.23
• Vérifier les résultats du contrôle de qualité et les critères de validation
à chaque changement de lot de réactifs.
3
15. Wilding P, Zilva JA, Wilde CE. Transport of specimens for clinical
CARACTERISTIQUES SPECIFIQUES (suite) chemistry analysis. Ann Clin Biochem 1977;14:301–6.
Reproductibilité 16. Schwartz MK. Interferences in diagnostic biochemical procedures.
L'imprécision du dosage ALT est ≤ 5,2 % (CV total). Des données Adv Clin Chem 1973;16:10.
représentatives d'études réalisées selon le protocole NCCLS EP5-A24 du 17. Mosley JW, Goodwin RF. Stability of serum glutamic pyruvic
CLSI sont résumées ci-après. transaminase activity on storage. Am J Clin Pathol 1985;44:591–5.
Contrôle Niveau 1 Niveau 2 18. Donnelly JG, Soldin SJ, Nealon DA, et al. Stability of Twenty-five
Analytes in Human Serum at 22°C, 4°C, and -20°C. Pediatr Pathol Lab
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Moyenne (U/l) 29,9 82,8 19. Kaplan LA, Pesce AJ, editors. Clinical Chemistry Theory, Analysis, and
Correlation, 2nd ed. St Louis, MO: CV Mosby; 1989:895–8.
E.T. 0,44 0,39 20. Sherman KE, Dodd RY, et al. Alanine aminotransferase levels among
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CV (%) 1,5 0,5
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Inter-séries of Quantitative Analytical Methods; Proposed Guideline (EP6-P).
CV (%) 1,3 0,7
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Inter-jours 22. Powers DM, Boyd JC, Glick MR, et al. Interference Testing in Clinical
CV (%) 4,8 1,8
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E.T. 1,55 1,65 Committee for Clinical Laboratory Standards, 1986.
Total 23. Young DS. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests, 4th ed.
CV (%) 5,2 2,0
Washington, DC: AACC Press; 1995:3-6–3-16.
Comparaison des méthodes 24. Kennedy JW, Carey RN, Coolen RB, et al. Evaluation of Precision
Performance of Clinical Chemistry Devices; Approved Guideline
Des études de corrélation ont été menées à l'aide du protocole NCCLS (EP5-A). Wayne, PA: The National Committee for Clinical Laboratory
EP9-A du CLSI.25 Standards, 1999.
Les résultats sériques obtenus avec le dosage ALT sur l'AEROSET ont été 25. Kennedy JW, Carey RN, Coolen RB, et al. Method Comparison and
comparés à ceux obtenus avec un dosage disponible dans le commerce, Bias Estimation Using Patient Samples; Approved Guideline (EP9-A).
utilisant la méthode d'oxydation du NADH. Wayne, PA: The National Committee for Clinical Laboratory Standards,
Les résultats sériques obtenus avec le dosage ALT réalisé sur un 1995.
ARCHITECT c System ont été comparés à ceux obtenus avec le dosage MARQUES COMMERCIALES
ALT réalisé sur l'AEROSET. La famille des analyseurs ARCHITECT c System est constituée des
AEROSET vs. méthode ARCHITECT analyseurs c 4000, c 8000 et c 16000.
de comparaison vs. AEROSET AEROSET, ARCHITECT, c 4000, c 8000, c16000, c System et SmartWash
sont des marques commerciales d'Abbott Laboratories dans plusieurs
n 74 83 pays.
Ordonnée à l'origine -4,356 -3,683 Toutes les marques commerciales sont la propriété de leur détenteur
Coefficient de corrélation 0,989 1,000 respectif.
Pente 0,870 0,940
Plage (U/l)* 4,8 à 130,0 7,0 à 3 935,2
*Limites AEROSET
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4
PARAMETRES DE DOSAGE ARCHITECT c SYSTEMS
Configuration des paramètres de dosage – Général Configuration des paramètres de dosage – SmartWash
● Général о Calibration о SmartWash о Résultats о Interprétation о Général о Calibration ● SmartWash о Résultats о Interprétation
Dosage : ALT Type : Photométrique Version : † Dosage : ALT
Numéro : 1021
Composant Réactif / Dosage Lavage Volume Répliques
● Définition de la réaction о Réactif / Echantillon о Contrôles validité Cuvette Trig Détergent B à 10 % 345
Mode de réaction : Cinétique décroissante
Primaire Secondaire Temps de lecture
Longueur d'onde : 340 / 380 Principale : 21 – 33
Dernière lecture requise : 33 Flex : 18 – 22
Limites d'absorbance : 0.5000 – 1.5000 Correction couleur : 14 – 16 Configuration des paramètres de dosage – Résultats
Type blanc échantillon : Aucun о Général о Calibration о SmartWash ● Résultats о Interprétation
Dosage : ALT Numéro du dosage : 1021
Plage de dilution par défaut : Unités résultat : U/L
о Définition de la réaction ● Réactif / Echantillon о Contrôles validité Linéarité basse : 6 ‡
R1 R2 Linéarité haute : 942
Réactif : ALT00 Volume de réactif : 160 40 Limites spécifiques à l'âge et au sexe :
Diluant : Saline Volume d'eau : ___ ___
Sexe Age (unités) Normales Extrêmes
Mode distribution du diluant : Type 0 Mode de distribution : Type 0 Type 0 Indifférent 0 – 130 (A) 0 – 55
Echantillon Dilution
Nom dilution Echantillon dilué Diluant Eau Facteur dilution par défaut
STANDARD : 5.3 ___ ___ ___ = 1:1.00 ● Configuration des unités de résultat
1:5 : 20.0 5.3 80 ___ = 1:5.00 о Dosage : ALT
_________ : ___ ___ ___ ___ = о Version : †
Unités résultat : U/L
Décimales : 0 [Plage 0 – 4]
о Définition de la réaction о Réactif / Echantillon ● Contrôles validité Facteur de corrélation : 1.0000
Vérif. réaction : Point final Diff Abs
A B Ordonnée à l'origine : 0.0000
Temps de lecture : 1–1 2–2
Limites de calculs : 0.0001 – 9.9999
% Linéarité ratio : 10
Répliques : 3 [Plage 1 – 3]
† Les numéros de version peuvent varier en raison de différences au niveau des appareils et des configurations utilisés.
†† Le facteur de calibration est 8141 pour les analyseurs c 4000 et c 8000 et 8492 pour l'analyseur c 16000.
‡ La valeur linéaire basse (Linéarité basse) est la LQ arrondie au nombre de décimales défini dans le champ des décimales.
5
PARAMETRES DE DOSAGE AEROSET
Pour de plus amples informations, se référer au paragraphe Paramètres de dosage au Chapitre 2 du Manuel Technique AEROSET.
* Valeur définie par l'utilisateur ou l'analyseur.
** La valeur linéaire basse (B-Plage Lin.) est la valeur LQ arrondie au nombre de décimales défini dans le champ des décimales.