Université de Tlemcen
Institut des Sciences et Techniques Appliquées ISTA
Spécialité : Les huiles essentielles
2ème Année
Travaux Pratiques
(Qualité des huiles végétales)
I. Caractères chimiques :
I.1 Indice d’acide :
Définition : L’indice d’acide est le nombre de milligrammes d’hydroxyde de potassium
nécessaires pour la neutralisation des acides libres contenus dans un gramme de corps gras
(Lion P H, 1955).
Principe : Il consiste à neutraliser les acides libres par une solution alcoolique d’hydroxyde
de potassium titrée.
Mode opératoire :
- Peser 2g d’huile dans un erlenmeyer.
- On Ajouter 5 ml d’éthanol à 95% et 5 gouttes de phénolphtaléine (pp) à 0,2%.
- On neutraliser par ajout d’une solution éthanolique de KOH (0,1mol/) jusqu'à obtention d’une couleur rose
persistante.
Méthode de calcul : L’indice d’acide est calculé selon la formule (Wolff, 1968).
V: volume en millilitres d’hydroxyde de potassium utilisé. P: masse de l’échantillon exprimé en gramme. 56,11:
masse molaire, exprimée en g/mole, d’hydroxyde de potassium. N : normalité de la solution de potasse (0,1N)
I .2 Indice de saponification
Définition : L’indice de saponification est le nombre de milligrammes de potasse (KOH)
nécessaire pour saponifier 1gramme de corps gras. Cette valeur est d’autant plus élevée que
les acides gras sont de plus faible poids moléculaire.
Principe : Si l’on traite un ester par de la potasse suffisamment concentrée à chaud, on
régénère suivant une réaction totale d’alcool et de sel de potassium de l’acide puis on donne
naissance à l’ester : A - R + KOH → A – K + R – OH
Mode opératoire :
- Peser 2 grammes d’huiles dans un ballon puis ajouter 25 ml de potasse alcoolique de concentration 0,5 mol/l.
- Après une heure d’ébullition, le ballon est refroidi sous l’eau de robinet.
- Ajouter 2 à 3 gouttes de phénophtaléine, titrer par une solution de HCl 0,5 N jusqu'à la disparition de la
couleur rose et réapparition de la couleur initiale du mélange.
- Utiliser un témoin selon le même procédé avec une prise d’essai et 2 ml d’eau distillée.
Méthode de calcul : L’indice de saponification est donné par la formule établie ci-dessous
(Wolff, 1968)
V₀ : volume en ml de HCl utilisé pour l’essai à blanc. V : volume en ml de HCl utilisé pour l’échantillon à
analyser. P : prise d’essai en grammes. N : normalité de KOH(0,5). 56,11 : poids moléculaire de KOH.
I.3 Indice de peroxyde :
Définition : L’indice de peroxyde est une mesure permettant d’estimer la quantité de
peroxydes présents dans une matière grasse. Les peroxydes sont des constituants
caractéristiques de l’oxydation des acides gras insaturés et sont déterminés en se basant sur
leur propriété de libérer l’iode de l’iodure de potassium dans les milieux acides. L’iode libre
est mesuré par la réaction avec le thiosulfate, sachant que 1ml de thiosulfate 0,01 N
correspond à une quantité de 80 mg d’oxygène fixé sur les acides gras (Lion P H, 1955).
Principe : Il est basé sur le traitement de l’huile en solution dans de l’acide acétique et du
chloroforme par une solution d’iodure de potassium (KI) et représente donc le titrage de
l’iode libéré par une solution titrée de thiosulfate de sodium (Na₂S₂O₃).
Mode opératoire :
- Dans un flacon peser exactement 2 grammes d’huile.
- Ajouter 10 ml du chloroforme et dissoudre rapidement la prise d’essai en agitant.
- Ajouter 15 ml d’acide acétique, puis 1 ml de la solution d’iodure de potassium.
- Boucher aussitôt le flacon, l’agiter durant 1 mn et le laisser 5 mn exactement à l’ abri de la lumière et à une
température comprise entre 15°C et 25°C.
- Ajouter ensuite 75 ml d’eau distillée.
- Titrer l’iode libéré avec la solution de thiosulfate en agitant vigoureusement en présence de quelques gouttes
d’empois d’amidon comme indicateur.
- Effectuer de la même façon un essai à blanc.
Méthode de calcul :
L’indice de peroxyde est donné par la relation suivante :
V1 : est le volume de thiosulfate de sodium nécessaire pour l’essai à blanc en (ml). V 2: est le volume de
thiosulfate de sodium nécessaire pour la détermination en (ml). N : la normalité de solution de thiosulfate de
sodium utilisée. m : la masse da la prise d’essai en gramme.
I.4 Indice d’iode :
Définition : Cet indice mesure globalement le degré d’instauration d’une matière grasse en
déterminant le nombre de grammes d’iode se fixant sur les doubles liaisons présentes dans
100 grammes de lipides. Les matières grasses animales très saturées ont des indices d’iode
de l’ordre de 45 et, dans les huiles végétales, cette valeur atteint150 (Lion P.H, 1955).
Principe : Additionner une prise d’essai d’une solution de mono chlorure d’iode dans un
mélange formé d’acide acétique et de tétrachlorure de carbone. Après un temps donné de la
réaction de réduction de l’excès de mono chlorure d’iode par addition d’une solution
d’iodure de potassium et d’eau, titrer avec du thiosulfate de potassium.
Mode opératoire :
- Peser la prise d’essai, à1gramme prés et l’introduire dans un flacon de 250 ml.
- Ajouter 15 ml de tétrachlorure de carbone et 25 ml du réactif de Wijs.
- Après avoir boucher et agiter, envelopper avec du papier noir et laisser pendant une heure.
- Ajouter 20 ml d’iodure de potassium à 10% préparé instantanément et 150 ml d’eau distillée.
- Titrer avec la solution de thiosulfate de sodium à 0,1 N jus qu’a ce que la couleur jaune due à l’iode ait
presque disparu.
- Ajouter quelques gouttes d’empois d’amidon et poursuive le titrage jusqu'à la disparation de la couleur bleu
violette, la solution devient alors transparente.
- Effectuer de la même façon un essai à blanc.
Méthode de calcul : L’indice d’iode est donné par la formule établie ci-dessous (Wolff,
1968).
V₀ : Volume en (ml) thiosulfate de sodium à (0,1N) nécessaire pour titrer l’essai à blanc. V : Volume en (ml)
thiosulfate de sodium à (0,1N) nécessaire pour titrer l’échantillon. P : Prise d’essai (g) de l’échantillon.
N : Normalité de la solution de thiosulfate sodium à (0,1N).
I.5 Indice d’ester : L’indice d’ester d’un corps gras est la quantité de potasse exprimée en
milligrammes nécessaire pour saponifier les acides gras combinés présentant 1gramme de
corps gras. Il est donné par la relation : I.E = I.S - I.A
Taux d’impuretés L’altération des corps gras peut être estimée par le calcul du pourcentage
d’impuretés obtenu par la relation suivante : % d’impuretés = I.A / I.S x 100
II. Caractères physiques :
II.1 Densité relative :
Définition : C’est le rapport de la masse d’un certain volume d’huile à 20°C à la masse d’un
volume égal d’eau distillée à la même température (Lion P.H, 1955).
Principe : A l’aide d’une balance analytique, on effectue des pesées successives de volume
égal d’huile et d’eau à la température de 20 °C.
Mode opératoire :
- Nettoyer soigneusement le pycnomètre au moyen d’éthanol puis d’acétone et le sécher en faisant passer un
courant d’air sec si nécessaire.
- Déterminer la masse m₀ du pycnomètre vide.
Déterminer la masse m1du pycnomètre rempli d’eau distillée.
- Nettoyer et sécher le pycnomètre.
Déterminer la masse m2 de pycnomètre contenant d’huile.
- Refaire l’essai pour tous les échantillons.
Méthode de calcul : La densité relative est donnée par la formule si-dissous (Wolff, 1968).
Où : m0 : Masse (g) du pycnomètre vide. m1 : Masse (g) du pycnomètre rempli d’eau.
m2 : Masse (g) du pycnomètre rempli d’huile.
II.2 Indice de réfraction :
Définition : L’indice de réfraction d’une huile est le rapport entre le sinus de l’angle
d’incidence et le sinus de l’angle de réfraction d’un rayon lumineux de longueur d’onde
déterminée passant de l’air dans l’huile maintenue à température constante (Lion P H,
1955).
Principe : Suivant le réfractomètre utilisé, mesurer directement l’huile maintenue dans les
conditions d’iso-tropisme et de transparence.
Mode opératoire :
- Nettoyer la lame du réfractomètre en utilisant du papier Joseph.
- Etalonner l’appareil avec l’eau distillée dont l’indice de réfraction est égal à 1,333.
- Déposer quelques gouttes d’huile dans la lame de réfractomètre et régler le cercle de chambre sombre et clair
dans la moitié et effectuer la lecture en tenant compte de la température.
Appareillage utilisé : Réfractomètre d’Abbe 1T/ 4T.
Figure : Refractomètre (Abbe 1T/ 4T)
Méthode de calcul :