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NE TRAPAG
Date : Jeudi 13/06/2019
e Période : 11H-12H 30min
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es Sciences de la Matigre Chimie Sn
| Sem
lule ; Méthodes d@’ Analyses Chimik
c a imiques
QUESTIONS DE CouRs: 4 Points
2) Dessitier et expliquer le diagrammo dedablonski
2)Quels facteurs ont poussé & Putilisation de la haute pression on chromatographie
liquide
Pour chacun des facteurs de séparation suivants, donner la technique
chromatographique la plus adaptée : Polarité, taille et forme, solubilité, change.
EXERCICE N?1 : 4 Points _ aa
On détermine les temps de rétention (tr) au cours d'une chromatographie sur
Sephadex, des protéines suivantes dont on connait la masse moléculaire (MIM) (Le 7
débit de la colonne est de 5 ml/min): D.
MM tr (min)
Aldolase 145000 10,4
Lactate déshydrogénase 135000 11,4
Phosphatase alealine 80000 18,4
Ovalbumine 45000 26,2
Lactoglobuline 37100. 28,6
ler les volumes d’élution (Vp) correspondanis. »
le log de MM en fonction de Va. 4
se, ty = 21 min. Déterminer sa masse moléculaire & Vaide du
‘Bxiste til une autre méthode pour déterminer la MM©) en déduire les coefficients de distribution K
phase de la colgnne en's 1 et K2 gachant que le rapport de
EXERCICE N°3 - 8 Points
On étudie la séparation de deux sotutés A et B pa
Snthalpies libres standards a une température
= kjmo!" et AGB) =-0.7 kj/mo
1) A Paide de la relation
démontrer que :
chromatographic en phase liquide. Les
'5°C sont:
fondamentale de ta chromatographic et la relation de Vant’Hoff,
AG?
in () = — 5 >= tn)
Ret K’ sont respectivement la constante des gaz parfaits (R= 8,314 SI) et le facteur de rétention
2) On réalise la séparation a une température T; = 25°C
2-1) Lequel des deux soiutés est le plus retenu ? Justifier par un calcul
2.2) Calculer la sélectivité « entre les solutés A et B
2.3) Sachant que les volumes occupés par les phases mobile et stationnaire sont égaux.
Caleuler les facteurs de rétention des solutés A et B
3) On augmente la température de la séparation A T2 = 40°C
3.1) Quelles conditions doit-on imposer sur Venthalpic et entropic du soluté A pour
Pouvoir déterminer le fucteur de rétention de A A cette température Ts
3.2) Calculer le facteur de rétention de A a
a
° :
On donne : AHA) = 1,28 [Link]* hsv BN. we
3.3) Comment varie Ia rétention en fonction de la température ~
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