[REF] 20 210 api? 20 C AUX Systéme ddentiication des levures INTRODUCTION ET OBJET DU TEST ‘API 20 C AUX est un systéme didentification précise des levures les plus couramment rencontrées. La liste Compléte des espéces qu'l est possible didentifir avec ce systéme est présente dans Je Tableau didentification enfin de notice. PRINCIPE La galerie API 20 C AUX est constituée de 20 cupules contenant des substrats déshydratés qui permettent deffectuer 19 tests dassimilation. Les cupules sont Inoculées avec un milieu minimum semi-gélosé et les levures poussent seulement si elles sont capables lliser le substrat correspondant La lecture de ces reactions se fait par comparaison aux témoins de croissance et fidentification est obtenue & aide du Catalogue Analytique ou dun logiciel identification. PRESENTATION (coffret de 25 tests) = 28 galeries API 20 C AUX ~ 2 boites dincubation = 25 ampoules ‘API C Medium = 25 fches de résultats ~ A notice COMPOSITION Galerie La composition de la galerie API 20 C AUX est reportée dans la liste des tests c-dessous ‘are Tests SUBSTRATS a 0 “Ruan = Guu. BeGlveose iz — CL¥esro! a 2KG__| _eallum 2-tto-Glusonate 42 APA, L-ARAbinose 12 YL D-xYLose. 12 ADO. ‘ADOnto! 12. XLT XyLiTot 12 ‘GAL BeGALactore 19, iNO— NOI 256 ‘SOR D-SORDiaE 12 | MOG Méthy-aD-Glucopyrancside 42 NAG, NAcéty-Glucosemine az CEL O-CELIobbse. 12 BLACIose = (origine bovine) oe MAL D-MALIoSe, iz ‘SAC! B-SAGcharose 42 | TRE D-TREhalose 12 MZ D-Métezitess: 12 RAF D-RAFInose 18 oro2eG -te- 200719 IVD. Miliow APIG Medium — | Sulfaie ¢ammoniora 39) Tmt Phosphate monopotassique 31g] Phosphate cipotassique 0.45 9| Phosphate disodique 0,929] Chlorure de socium 0.16 Chlorure de calcium 0.05 9 Sulfate de magnesium 025 Listing 0,005 9| Cryptophane 0.029 Ltetnonine 0026) ‘Agent gétfiant 59] ‘Solution de viamines tm Solution ¢oigo-sléments som! Eau démineratsée ‘asp 1000 mi pH final :6.46,8 (a 20.26°0) Bien que contenant de tagent gélifant, API C Medium ne nécessite pas de fusion préalable et se pipette aus: bien quun milieu liquide. i est préférable, afin de ramener les milleux 4 température ambiante, do sortir ampoules du réfiigérateur quelques heures avant utilisation. Ne pas agiter. REACTIFS ET MATERIEL NECESSAIRES MAIS NON FOURNIS. Réactif / Instrumentation = API Suspension Medium, 2 ml (Ref. 70 700) ou ‘API NaCl 0,85 % Medium, 2 ml (Ref. 20 070) + Sabouraud Medium (Ret. 42 026 ou 43 171 ou équivalent) - McFartand Standard (Réf. 70 900), point 2 + Catalogue Analytique API 20 C AUX (Réf. 20 290), logiciel cidentifcation apiweb ™ (Ref. 40011), automate ATB™ ou mini API (consulter bioMerieux) [Link] [Riz Agar Tween] Matériel - Pipettes ou PSipettes + Protége-ampoule + Portoir pour ampoules + Equipement général de laboratoire de bactériologie PRECAUTIONS D'UTILISATION ‘Pour diagnostic in vitro et pour controle micro- biologique. ‘+ Pour usage professionnel uniquement. Ce coffret contient des composants origine animale. La mattrise de Torigine efiou de état sanitaire des ‘animaux ne pouvant garantir de fagon absolue que ces Produits ne contiennent aucun” agent pathogéne lransmissibie, i est recommandé de les manipuler avec les précautions dusage relatives aux produits potentielloment infectieux (ne pas ingérer; ne pas inhaler). «Les préiévements, cultures de tevures et prodi engemencés doivent ire considérés comme poten- tiellement infectioux et doivent étre manipulés de fagon appropriée. Les techniques aseptiques et les précautions usuelles de manipulation des levures doivent étre respectées tout au long de la manipulation se référer A "CLSI M29-A, Protection of Laboratory Workers From Occupationally Acquired Infections; Approved Guideline. - Revision en vigueur. bioMriew® SA Frangais- 1api 20¢ AUK a7eaee -- 200719 Pour informations complémentalres sur les précautions de manipulation, se référer a “Biosafety in Microbiological and Biomedical Labortories - CDGINH = Domiére éaiion’, ou 8 Ia réglementaion en vigueur dane le pays ¢uiisation ‘+ Ne pas utiliser les réactifs aprés la date de péremption. {Avant utiisation, s'assurer de Fintegrité de Fembalage et «dos composants. + Ne pas utiser de galeries ayant subi une ltéation phy- sique : cupule déformée, + Our les ampoises déticatement comme suit ~ Placer fampoule dans le rotégo-ampoule. = Tenir ensemble vericalement dans une main (bouchon bane vers le hau), - Bion enfoncer le Bouchon * Modélo + - = Recouwtir la pare inclnée dis bouchon avec la premiére phalange du pour. ~ Exereer une pression avec le pouce & la base de la parte incinge du bouehon de fagon & cassorFextrémité de Fampoule *Modéle 2 + Exercer une pression horizontale avec le Puce sur la parte sige du bouchon de fagon a casserFextrémité do ampoule, + Relirer Tampoule du protége-ampoule et conserver le. protége-ampoule pour une Utisaton uteieure - Eniover dlicatement le bouchon. ‘+ Les performances présentées sont obtenues avec la méthodologia indiguée dans calle notice. Toute dé ation de méthodologie peut alter es résultats, + Vinterprétation des résuilats du test doit éte fete en tenant compte du contexte chnique ov aire, de Forigine du prélevement, des aspects macro et microscopiques de la souche et éventusloment des résutets dautres tests en partcaller de Fantbiogramme CONDITIONS DE STOCKAGE Les galeries et milieux se conservent & 2-8°C jusqu’a la date limite dutiisation indiquée sur Fembalage. ECHANTILLONS (PRELEVEMENT ET PREPARATION) ‘API20 C AUX ne doit pas étre utilisé directement a partir des prélevements dorigine clinique ou autres. Les microorganiemes a identifier doivent dans un promior {omps étre isolés sur un milieu de culture adapté selon les techniques usuelies de bactériologi. MODE OPERATOIRE Préparation de la galerie + Réunir fond et couvercle dune boite dincubation et répartr environ 5 ml d'eau distilée ou déminéralisée [ou toute eau sans additf ou dérivés susceptibles de libérer des gaz (Ex : Cl, COr ..)] dans les alvéoles du fond pour créer une aimosphére humide. ‘Inscrire la référence de la souche sur ta languette laleraie de la boite. (Ne pas inscrre la référence sur le couvercte, celui-ci pouvant ere déplacé lors de la manipulation.) “+ Retirer la galerie de_son emballage individuel et ta déposer dans la boite dincubation. Préparation de inoculurn + Ouvrir une ampoule ‘API Suspension Medium (2 ml) ou tune ampoule «API NaCl 0,85 % Medium (2 ml) comme indiqué au paragraphe “Précautions diutlisation” de la notice du produ, ou utiliser un tube contenant 2 ml de lamame solution sans addi A Taide une pipette, prélever une fraction de colonie par aspiration ou par touches successives. Utiliser préférentiellement des cultures jeunes (18-24 heures). ‘+ Réaliser une suspension de levures de turbicté égale a 2de McFarland. Cette suspension dot tre ullisée ‘exlemporanément, ‘= Quwrir une ampoule GAPI_C Medium comme indiqué au ‘paragraphe "Précautons uiisation’ ety transférer enviton 1100 pl de la suspension précédente. Homogénéiser avec la pipette en évitant la formation de bules. Inoculation de ta galerie ‘= Rompli tes cupules avec la suspension obtenue dans ‘API C Medium. Eviter a formation de bulles en posant fa pointe de la pipette sur le c6té de la cupule. Veiller & créer un niveau horizontal ou lagerement convexe, mais jamais concave. Des cupules incomplétement remplies ‘ou trop remplies peuvent entrainer des résultats Incorrect. ‘+ Rofermer la boite dincubation et incuber 48-72 heures (46 heures) a 29°C £2°C. LECTURE ET INTERPRETATION Lecture de la galerie Aprés 48 houres incubation, ou 72 heures (si los tests, ‘en particulier le glucose, ne sont pas tres nets apres 48 heures), observer la ctoissance des. levures, comparativement 2 la cupule 0, témoin négatit. Une ‘cupule plus trouble que le témoin indique une réaction positive & noter sur la fiche de résultats, ‘Afin.d'éviter toute contamination lors dune réincubation, ter le couvercle uniquement pendant la période de lecture, Test Morphologique Déterminer ta présence hyphae (mycélium) ou seudohyphae (pseudomycélium) & Iaide du miieu RAT [Riz Agar Tween} Deposer 1 goutte de la suspension obtenue dans API Suspension Medium ou API NaCl 0.85 % Medium sur le mrilieu RAT ou sulvre tes recommandations du fabricant Ge test constitue ie 21" test de la galerie. Il est considéré posi en cas de mise en évidence de hyphae ou pseudotyohae. Intorprétation LLidentfcation est obtenue a part du profil numérique. + Determination du prof numérique : Sur la fiche de résultats, les tests sont s6parés par groupes de trois et une valeur 1, 2 ou 4 est indiquée Pour chacun. En additionnant @ intérieur de chaque groupe es valeurs correspondant a des réactions Postves, on obfient 7 chiffres qui constituent fe profl numérique. + Identification Elle est réalisée a parti de la base de données (V4.0) * aide du Catalogue Analyique Rechercher le profil numérique dans la liste des profs * a Taide de automate ATBT™, du mini API, ou du logiciel cdentfication apiweb ™ + Enirer manuellerient au clavier ie profil numérique & 7 chites. 2764774 Trichosporon asahil bioMariow® SA Frangals 2api 20¢ AUX 076206 -- 2007109 CONTROLE DE QUALITE Les galeries et milicux font robjet de contrdles de qualité systématiques aux différentes étapes de leur fabrication. Un ontidle dacteriologique des tests de Ia galerie est do plus réalisable par lullisateur avec la souche 1. Candida guilliormondil ATCC® 6260 ce préférence ou l'une des souches suivantes 2. Cyptococcus furentt ‘ATCC 188033. Candida glabrata ATC 16126 AATCC: Amercan Type Cuture Collection, 10601 Unverty Boulevard Manassas, VA 20110-2200, USA [SLU Sty [KG TARA VL ADOT AUT [GAL [ NOT [SOR MOG [NAG CEL [TAG HAL SACT IRE [CZ TRAP pears eRee eee epee aa EE CIEE EEE Ee PEC a Geet EEE EEE EEE SSH Profits obtenus aprés 48 heures dincubation aprés culture sur gélose Sabouraud, li est de la responsabilité de Tutiisateur de s‘assurer que le contidle de qualilé est mis en oeuvre conformément a la législation locale en vigueur. LIMITES DU TEST + Le systéme API 20 C AUX est destiné Fidentifcation des levures présentes dans la base de données (voir Tableau didentification en fin de notice) ot a elles seules. Il ne peut étre ullisé pour identifier dauires ricroorganismes ou exciure leur présence. ‘*Seules des cultures pures contenant un seul type de microorganisme doivent étre utilisées, RESULTATS ATTENDUS Se référer au Tableau didentiication en fin do cotte notice pour les résultats atlendus des différentes reactions blochimiques. METHODOLOGIE ‘TABLEAU DIDENTIFICATION BIBLIOGRAPHIE TABLES DES SYMBOLES PERFORMANCES 5156 souches de diverses origines et souches de collection appartenant aux espéces de la base de données ont ét6 testéos = 89,7 % des souches ont été correctement identiiées (avec ou sans tests complémentaires). 6,1 % des souches n’ont pas été identifiées. + 4,2 % des souches ont été mal identifies. ELIMINATION DES DECHETS. Les ampoules API C Medium non ullisées peut étre Gliminges comme déchet non dangereux. Eliminer tous les réaciifs utlsés ou non utlisés (autre que les ampoules ’API C Medium) ainsi que les materials & usage unique contaminés en suivant les. procédures relatives aux produils infectieux ou potentiellement infectioux. IW incombe chaque laboratoire de gérer los déchets et les effluents quil produit selon leur nature et leur dangerosité, et den assurer (ou faire assurer) le traitement et éiimination selon les réglementations applicables. ATCC est une marque utisée, déposée eVou enrenistrée appartenant a American Type Culture Collecton MD erica? au capital de 12 029 370 € 673 620 399 RCS LYON (69280 Marcy-TEtolle / France Tal. 33 (0)4 78 87 2000 Fax 33 (0}4 78 87 20 90 Itp:[Link] Down tego bu, APL ATE DBoMéteo Sh ou ine de es ales siomélpieux bioMérieux, Inc Box 15969, Durham, NO 27704-0969 / USA ‘Tél, (1) 919.620 20 00 Fax (1) 919 620 2211 cE Inmprimé.en France 1 apineb sont des marques ules, pastes eeu ervegetéos appacerant