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Techniques d'Analyses Biologiques TD 2

Le document contient des exercices sur des techniques d'analyses biologiques portant sur la détermination de coefficients de diffusion, de masses moléculaires et le seuil de coupure de membranes à partir de données expérimentales.

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Université A.

Mira de Bejaia

Faculté des Sciences de la nature et de la vie

Département de Microbiologie

3ème année Licence Microbiologie

TD 2 de Techniques d’Analyses Biologiques

Exercice 1

Afin de déterminer le coefficient de diffusion d’une protéine fibreuse d’un volume de 70,65
nm et d’une hauteur de 100A ; une centrifugation de la solution protéique à 25 °C a été
réalisée à 20 000g.

Calculer le coefficient de diffusion de cette protéine sachant que η =5,7 X 10-2 g/cm.s

Exercice 2

Quelle est la masse moléculaire de l’albumine si S=4,24 X 10-13 s et D = 6,32 . 10-11 m2/s

La masse volumique de l’eau à 20 °C =0,9982 g /cm3 et le volume partiel spécifique de


l’albumine 0,773. 10-3 m3/ kg

Exercice 3

Lors d’une manipulation de biologie moléculaire, un échantillon d’acides nucléiques a été


contaminé par une protéine globulaire (PG) qui s’avère être très intéressante.

Afin de déterminer la masse moléculaire de PG, une ultracentrifugation a été effectuée à


16 785 g, à la fin de la centrifugation PG aurait parcouru 10 cm en 20 min.

Quelle serait la masse moléculaire de PG ?

Exercice 4

Un extrait enzymatique commercial solide (poudre) contient 2 g de glucose contaminant.


L’enzyme présente une masse moléculaire de 25 000 Da. On souhaite éliminer le glucose par
dialyse.
1. On dispose de deux types de membranes de dialyse dont les seuils de coupure sont de
10 KDa et 50 KDa. Quelle membrane allez vous choisir et pourquoi ?
2. La totalité de l’extrait est dissoute dans un volume final de 3 ml d’un tampon,
introduite dans la membrane de dialyse contre 500 ml du même tampon. L’ensemble
est mis sous agitation une nuit à 4°C.
Combien de glucose aura- on éliminé au terme de cette dialyse ?
3. L’élimination du glucose aurait-elle été meilleure ou moins bonne si on avait dissout
l’extrait protéique dans des volumes de 100 µl et 10 ml ? Expliquez.

Exercice 5

Une firme vient de lancer une nouvelle génération de membranes d’ultrafiltration et veut
confirmer leur seuil de coupure. En utilisant les données suivantes, déterminer le seuil de
coupure de cette membrane.

Molécule Masse moléculaire Concentration Concentration


KDa totale (mg/cm3) restante (mg /cm3)
A 5 19 10
B 10 9 5
C 15 34 20
D 25 3 2
E 35 39 30
F 47,5 21 20

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