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Chromatographie C18 : Analyse et Calculs

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Salah Eddine Djilani
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Exercice: On dispose d’une colonne de chromatographie de silice greffée octadécyle C18 : de diamètre

intérieur = 4 mm, de longueur = 15 cm, remplie de particules de 5 μm. La colonne offre 15 000 plateaux au
mètre. La phase mobile est constituée d’un mélange eau/méthanol (70/30 v/v).
Lorsque le débit de la phase mobile est de 0.80 [Link] -1, la pression en tête de colonne est de 12.9 Méga
Pascals (MPa), les temps de rétention de deux solutés A et B sont respectivement tRA = 10.5 min et tRB = 14.8
min.
2.1) Quel est le type de chromatographie mise en jeu ? Expliquer.
2.2) Quelle est l’efficacité de la colonne ?
2.3) Sachant que les forces éluantes ε0 (mesurées sur alumine en comparaison avec le pentane) sont
respectivement pour le méthanol ε0 = 0.70 et pour l’acétonitrile ε0 = 0.51, le remplacement dans la phase
mobile du méthanol par l’acétonitrile aura-t-elle une conséquence? Si oui, laquelle ?
2.4) Quelle est la résolution entre les deux pics A et B ? Préciser l’hypothèse faite. Que pensez-vous de cette
valeur ? Expliciter votre réponse.

3.1) Calculer les facteurs de rétention pour le dichlorvos et le mévinphos (deux pesticides) qui éluent à tr1 =
22.84 et tr2 =31.53 s, respectivement, avec un temps mort de tm = 3.80 s dans une séparation rapide avec la
chromatographie à phase gaz (CPG).
3.2) Sur la base de ces facteurs de rétention, pour chaque molécule de chaque soluté dans la phase mobile à
un moment donné, combien sont en phase stationnaire?
3.3) Quel soluté passe plus de temps en phase stationnaire?

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