21/10/2022
Chromatographie Chromatographie en phase gazeuse (CPG)
en 1- Généralités sur la CPG
phase gazeuse
(CPG) Méthode de séparation de composés
gazeux ou susceptibles d’être
vaporisés par élévation de température
Phase stationnaire
Phase mobile
sans décomposition.
A
les analytes doivent être stables
aux températures exposées dans
B l'injecteur et/ou dans la colonne.
Phase stationnaire liquide ou solide
Phase mobile GAZEUSE
La séparation exige des quantités de
l’ordre de mg seulement ; parfois même
de g. (pg pour certains composés).
Chromatographie en phase gazeuse (CPG) Chromatographie en phase gazeuse (CPG)
2- Principe de la CPG
1- Généralités sur la CPG
ÉCHANGE de molécule GAZEUSE
Phase stationnaire
entre phase stationnaire et phase mobile
Phase mobile
A
Mécanisme de rétention:
B Adsorption
Partage
Séparation d’un mélange de deux composés en CPG
Chromatographie en phase gazeuse (CPG) Chromatographie en phase gazeuse (CPG)
2- Principe de la CPG
3- Types de la CPG
Exemple de séparation d’un mélange de cétones
Chromatographie gaz solide (CGS) :
Chromatographie d'adsorption. Peu utilisée en raison des
traînées dans les pics d'élution provoquées par la non linéarité
du processus d'adsorption.
Chromatographie gaz liquide (CGL) :
Basée sur le partage des constituants à séparer,
les solutés, entre une phase gazeuse mobile inerte appelée gaz
vecteur et une phase liquide fixée sur la surface d'un support
poreux inactif.
Chromatogramme d’un mélange de cétones.
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Chromatographie en phase gazeuse (CPG) Chromatographie en phase gazeuse (CPG)
4- Appareillage 4- Appareillage
Schéma de fonctionnement d'une chaîne chromatographique gazeuse Schéma simplifié d’un chromatographe en phase gazeuse
Chromatographie en phase gazeuse (CPG) Chromatographie en phase gazeuse (CPG)
4- Appareillage 4- Appareillage
4-1- Gaz vecteur 4-2- Système d'injection (Injecteur)
Nature : Gaz inerte Permet l’introduction de l’échantillon dans le
Hélium
chromatographe, par l’intermédiaire d’une micro-
Diazote
Argon seringue dont la capacité varie habituellement de
Dihydrogène… 1 à 10 L.
Propriété : inerte vis-à-vis des solutés et des PS.
Rôle
Il n’y a pas d’interaction entre le gaz et la phase stationnaire Interface permet d'introduire l'échantillon dans
le chromatographe.
Il n’y a pas d’interaction entre le gaz et les solutés
Le gaz doit être d’une très grande pureté Système de vaporisation (dans le cas d'un
échantillon liquide ou solide). Seringue de
Choix du gaz vecteur :
Détecteur utilisé Organe de transfert dans la colonne 10 L, utilisé
Coût de fonctionnement… chromatographique. en CPG.
Chromatographie en phase gazeuse (CPG) Chromatographie en phase gazeuse (CPG)
4- Appareillage 4- Appareillage
4-3- Four 4-3- Four
Enceinte thermostatée dans laquelle se trouve la colonne
possédant un système de ventilation. Élément essentiel dans les chromatographes modernes
Il doit posséder une excellente stabilité thermique (jusqu’à 450°C)
Homogénéité de la température assurée par un ventilateur
Programmateur de température
Doit chauffer et refroidir très rapidement
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Chromatographie en phase gazeuse (CPG) Chromatographie en phase gazeuse (CPG)
4- Appareillage 4- Appareillage
4-4- Colonne (PS) 4-4- Colonne (Phase Stationnaire)
Deux principaux types de colonne en CPG
Il existe plusieurs critères importants pour choisir une phase
• Les colonnes remplies
stationnaire :
Verre, métal
Courte (1 à 10 m) et épaisse (1 à 4 mm) - Elle ne doit pas réagir avec les solutés
- Elle doit être thermiquement stable
• Les colonnes capillaires - Elle doit avoir une faible volatilité
- Elle doit avoir une polarité adaptée aux composants de l'échantillon.
Silice fondue
Longue (10 à 100 m) et très fine (100
à 250 µm)
Chromatographie en phase gazeuse (CPG) Chromatographie en phase gazeuse (CPG)
4- Appareillage 4- Appareillage
4-5- Détecteur 4-5- Détecteur
3 types de détecteurs :
Les détecteurs sont des dispositifs qui rendent compte des
changements de composition de l'éluant en sortie de colonne par 1. Les détecteurs Universels : Détecteur à conductivité
la mesure de propriétés chimiques ou physiques. thermique (DCT) ou catharomètre, Détecteur à ionisation de
flamme (DIF).
La réponse doit être aussi proportionnelle que possible à la 2. Les détecteurs Spécifiques : Détecteur à capture
quantité injectée. d'électrons (DCE), Photomètre de flamme : (F.P.D.) …etc
3. Les détecteurs Couplés :
Détecteur Infrarouge.
Détecteur de masse: GC-MS : spectromètre de basse résolution
Chromatographie en phase gazeuse (CPG) Chromatographie en phase gazeuse (CPG)
4- Appareillage
4- Appareillage
4-5- Détecteur
2 types de réponse
• Proportionnelle au débit massique
• Proportionnelle à la concentration du soluté dans la phase
mobile
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Chromatographie en phase gazeuse (CPG) Chromatographie en phase gazeuse (CPG)
5- Optimisation de séparation 5- Optimisation de séparation
5-1- La température
Plusieurs facteurs influence la séparation d’un mélange analysé
par CPG
La température est un paramètre majeur en GPG
La température
Le volume de rétention VR varie selon la loi :
Le débit du gaz vecteur
Log(VR) = (a/T) + b
La longueur de la colonne
La nature de la phase stationnaire
Si T augmente : le volume de rétention diminue et donc le
temps de rétention diminue
Chromatographie en phase gazeuse (CPG) Chromatographie en phase gazeuse (CPG)
5- Optimisation de séparation 6- Avantages et inconvénients de la CPG
5-1- La température 6-1- Avantages:
Représentation de l’équation Log(VR) = (a/T) + b pour une série
de composés homologues
⁂ Analyse rapide, généralement en quelques minutes
⁂ Efficace, offrant une haute résolution
⁂ Sensible, détectant facilement les ppm et souvent les ppb
⁂ Analyse quantitative très précise, RSD typiques de 1 à 5 %
⁂ Nécessite de petits échantillons, généralement μL
⁂ fiable et relativement simple
⁂ Peu coûteuse
Plus la température est forte, plus la séparation est rapide
A très forte température, il n’y a plus de séparation
Chromatographie en phase gazeuse (CPG) Chromatographie en phase gazeuse (CPG)
6- Avantages et inconvénients de la CPG 7- Domaines d’applications
6-1- Inconvénients : 6-1- Applications quantitatives :
La chromatographie en phase gazeuse est largement utilisée
⁂ Limité aux échantillons volatils pour l'analyse d'un large éventail d'échantillons dans les
⁂ Ne convient pas aux échantillons thermiquement labiles laboratoires environnementaux, cliniques, pharmaceutiques,
⁂ Assez difficile pour les grands échantillons préparatoires biochimiques, alimentaires et pétrochimiques.
⁂ Nécessite une spectroscopie, généralement une spectroscopie
6-1- Applications qualitatives :
de masse, pour la confirmation de l'identification des pics
Identification des composants d'un mélange