Université Mohamed El Bachir Ibrahimi
Faculté des sciences
Département de microbiologie
3eme année licence
TP 03 en Microbiologie Industrielle :
Les techniques d'extraction et purification
des molécules
Réaliser par :
Tennache Dounia
Groupe 2
Sous la direction de :
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Introduction :
L'extraction est un procédé de séparation en génie chimique et
en chimie de laboratoire qui consiste à extraire une espèce chimique,
c'est-à-dire prélever une ou plusieurs espèces chimiques d'un
mélange solide ou liquide, il existe de différentes techniques
d'extraction
-Décoction (ou infusion) On laisse le végétal en contact avec l'eau
chaude.
-Macération (Même chose avec l'alcool)
-Hydrodistillation ou entrainement à la vapeur (le but de cette
manipulation est d'extraire par hydrodistillation l'huile essentielle de
l'espèce chimique).
-Distillation.
-Extraction par solvant.
La purification est le fait de séparer, plus ou moins efficacement, la
(les) substance(s) voulue(s) du reste des substances présentes. Dans
l'idéal, on devrait pouvoir isoler n'importe quelle substance du reste
du mélange, Il existe un grand nombre de techniques d’analyse ou de
purification (Ultrafiltration – Electrophorése-Protéomique-
Cristallographie – Chromatographie).
Principe :
Prélever une ou plusieurs espèces chimiques d'un mélange solide ou
liquide.
L’extraction par Hydrodistillation :
L'entraînement à la vapeur d'eau et l'hydrodistillation sont des
procédés d'extraction ou de séparation de certaines substances
organiques non miscible a l’eau.
Hydrodistillation : principe et protocole
Lorsque l'on chauffe le ballon qui contient la solution aqueuse, l'eau
se vaporise, cette vapeur casse les cellules végétales, libérant les
molécules d'intérêt. Les plus volatiles d'entre elles sont emportées
avec la vapeur, celle-ci est ensuite refroidie dans un condenseur et
les différentes substances sont récupérées séparément dans de la
verrerie de laboratoire.
Lorsque la vapeur d’eau est apportée de l'extérieur, on parle non
plus d'hydrodistillation mais d'entraînement par vapeur.
Les avantages de l’hydrodistillation :
Les températures nécessaires à la mise en œuvre de la technique
d'hydrodistillation se situent autour de 100 °C, de quoi protéger les
molécules odorantes qui intéressent le secteur de la parfumerie.
Extraction liquide-liquide :
Elle permet une agitation efficace du mélange, toutes les gouttes du
mélange hétérogène vont se rencontrer et l'espèce à extraire va
rencontrer efficacement le solvant extracteur.
Elle facilite la réalisation de la décantation et de la séparation des
deux phases non miscibles grâce au robinet.
La procédure :
On transfère l’espèce à extraire dans un solvant pour lequel elle a
plus d’affinité. Ce solvant est appelé solvant extracteur.
Ce solvant doit respecter deux critères :
-il doit être non miscible avec le solvant initial.
-l’espèce à extraire doit avoir une plus grande solubilité dans le solvant
extracteur choisi que dans le solvant dans lequel il se trouve initialement.
l’utilisation de l’ampoule à décanter :
- Elle permet une agitation efficace du mélange : toutes les
gouttes du mélange hétérogène vont se rencontrer et l’espèce à
extraire va rencontrer efficacement le solvant extracteur.
- Elle facilite la réalisation de la décantation et de la séparation
des deux phases non miscibles grâce au robine
La purification par chromatographie CCM :
La chromatographie sur couche mince (CCM, en anglais TLC pour
Thin layer chromatography) est une technique
de chromatographie planaire dont la phase mobile est liquide.
Elle est couramment utilisée pour séparer des composants dans un
but d'analyse (CCM analytique) ou de purification (CCM préparative).
La chromatographie est une méthode séparative qui permet
l'identification et le dosage des différents composés d'un mélange.
Cette méthode d'analyse permet l'identification et le dosage de
composés dans un mélange, Elle peut être couplée à un
spectromètre de masse pour l'identification de composés inconnus.