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Sérotypage et test d'urées de Salmonelles

Ce document décrit les procédures pour identifier une souche de Salmonelle, notamment par le sérotypage et le test de l'uréase rapide. Le sérotypage permet de déterminer le sérotype d'une Salmonelle identifiée biochimiquement. Le test de l'uréase rapide identifie la production d'uréase en quelques heures et oriente vers le genre Salmonelle.

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Sérotypage et test d'urées de Salmonelles

Ce document décrit les procédures pour identifier une souche de Salmonelle, notamment par le sérotypage et le test de l'uréase rapide. Le sérotypage permet de déterminer le sérotype d'une Salmonelle identifiée biochimiquement. Le test de l'uréase rapide identifie la production d'uréase en quelques heures et oriente vers le genre Salmonelle.

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Les Entérobactéries (5èmepartie) :

Le sérotypage de Salmonelles et le test de


l’uréase rapide

Objectifs : * Reconnaître des colonies suspectes sur milieu sélectif spécifique


* Mettre en œuvre un test d’orientation rapide vers le genre Salmonella
* Identifier la bactérie suspecte suite au résultat de l’uréase rapide par
ensemencement d’une galerie réduite
* Déterminer le sérotype d’une salmonelle identifiée biochimiquement par la
technique du sérotypage
Vous disposez de colonies isolées
1er jour suspectes d’une souche pure sur
Manipulation : Gélose Hektoën :
Vous disposez d’une souche pure
d’une Salmonelle identifiée
biochimiquement présentée

Souche
numérotée
présentée sur 1 colonie suspecte dans 8
gélose Réalisation à 10 gouttes d’Urée –
nutritive du test de Indole
inclinée l’uréase
Réalisation
du rapide Lecture après 2 heures à
sérotypage 37°C

Uréase
positive ou
Détermination du négative
sérotype de la
salmonelle

Ensemencements des milieux de la


galerie réduite d’identification à
partir du milieu urée-indole
incubée :

Kligler-Hajna

Clarks et Lubs

Urée Indole

Mannitol-Mobilité

Citrate de Simmons
Incuber les tubes 24 h à 37°C
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Compte-rendu :

1. Le sérotypage de la Salmonelle

Montrer sous forme d’un organigramme la démarche ainsi que le résultat de votre sérotypage.
Déterminer le sérotype et le nom de votre Salmonelle.

2. Le test de l’uréase rapide

Décrire l’aspect des colonies suspectes isolées sur gélose Hektoën. Justifier
votre réponse.
Indiquer le caractère biochimique recherché sur ce milieu.
Donner le principe de sa lecture.
Quel est l’intérêt de ce test rapide?

2ème jour

Manipulation :

Lecture des différents milieux ensemencés : tubes.

Réaliser les tests complémentaires nécessaires à la mise en évidence de :


la ! galactosidase
la voie fermentaire du glucose
la tryptophane désaminase et de la tryptophanase

Compte-rendu :

1. Ensemencements

Milieux Observations Interprétations Conclusion


Kligler
Clark et Lubs

Citrate de Simmons

Mannitol- Mobilité

Urée-Indole

2. Conclusion

Proposer une identification jusqu’à l’espèce de la souche initiale sur Hektoën à partir de
vos résultats et du tableau dichotomique.

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