Scribd
Importer
5 vues3 pages

TD02

Le document présente un TD sur la chromatographie liquide haute performance, avec des exercices portant sur la séparation d'amphétamines et d'hydrocarbures aromatiques polycycliques. Les exercices incluent des calculs de facteurs de séparation, de résolution, de temps de rétention, et d'autres paramètres analytiques. Les étudiants doivent également évaluer l'impact de différents mélanges de phases mobiles sur la séparation des composés.

Transféré par

dzzinou140
Copyright
© All Rights Reserved
Nous prenons très au sérieux les droits relatifs au contenu. Si vous pensez qu’il s’agit de votre contenu, signalez une atteinte au droit d’auteur ici.
Formats disponibles
Téléchargez aux formats PDF, TXT ou lisez en ligne sur Scribd
5 vues3 pages

TD02

Le document présente un TD sur la chromatographie liquide haute performance, avec des exercices portant sur la séparation d'amphétamines et d'hydrocarbures aromatiques polycycliques. Les exercices incluent des calculs de facteurs de séparation, de résolution, de temps de rétention, et d'autres paramètres analytiques. Les étudiants doivent également évaluer l'impact de différents mélanges de phases mobiles sur la séparation des composés.

Transféré par

dzzinou140
Copyright
© All Rights Reserved
Nous prenons très au sérieux les droits relatifs au contenu. Si vous pensez qu’il s’agit de votre contenu, signalez une atteinte au droit d’auteur ici.
Formats disponibles
Téléchargez aux formats PDF, TXT ou lisez en ligne sur Scribd

Faculté de médecine

Département de pharmacie
Laboratoire de chimie analytique

TD n°= 2 : chromatographie liquide haute


performance

Exercice n°1 :
On procède a une séparation de deux amphétamines sur colonne (phase
stationnaire : C18, 15cm.4,6 mm. Remplie de particules de 5um. Avec
l’acetonitrile (CH3CN) comme phase mobile et a une température de
30C°. On mesure un temps mort de 1,07 min.

Dans ces conditions, on obtient la séparation ci contre entre les 2


Amphétamines :
Amphétamine(A) : temps de rétention =2,40 min, largeur du pic a mi-
hauteur w(A) =5s.
Met amphétamine (M) : temps de rétention=2,85 min, largeur du pic a
mi-hauteur W(M)= 6s.

1- Calculez le facteur de séparation


2- Calculez le facteur de résolution
3- Evaluez le nombre de plateaux théoriques de la colonne
4- Calculez la différence d’énergie libre de dissolution entre ces 2
amphétamines dans la phase stationnaire( R=8,31J .[Link]-1).

1
Exercice n°2 :
On étudie la séparation des hydrocarbures aromatiques polycycliques
suivants :
Naphtalène, anthracène, fluorène, chrysène.

On dispose d’une colonne de silice greffée C18 dont les caractéristiques


sont :

Volume de pores 0.25mL /g


Surface spécifique 96.8m2 /g
Diamètre moyen des particules 3um
Perte de charge maximale 300 bar(30 .106pa)
Gamme de pH 2-7.5
Gamme de température 10-50°C
Longueur 10cm
Diamètre interne 4 .6 mm
Porosité totale 0.8
Resistance a l’écoulement 500

On utilise une phase mobile CH3CN /H2O (80 :20) de viscosité 0,5 cP
(on rappelle que 1P=0 ,1Pas=0 ,1.10-5 bar.s).Le débit est de
2ml /min,VM=1,33ml.
1) Quel est l’ordre d’élution des composes ? Justifier.
2) Calculer le temps de rétention nulle.
3) L’ anthracène et le fluorène donnent deux pics de caractéristiques
suivantes :
tr(mn) Largeur a mi- Largeur a la
hauteur (sec) base w (sec)
Pic 1 1,52 3,6 6,1
Pic 2 1,64 3,9 6,7

a) Calculer pour ces deux composes, le facteur de rétention k’, le


nombre de plateaux théoriques et la HEPT.
b) Calculer le facteur de séparation (sélectivité) α et le facteur de
résolution R.
4) Calculer la pression de refoulement nécessaire pour effectuer cette
analyse.(on donnera le résultat en bars).

2
5) Calculer la longueur de la colonne (même garnissage et même
diamètre interne) qu’il faudrait utiliser pour avoir une résolution
satisfaisante(R=1,5) en utilisant les mêmes conditions d’utilisation
(débit et phase mobile).
6) On utilise la colonne de 10cm mais on décide de changer la phase
mobile par un mélange CH3CN /H2O (70 :30) de viscositè
=0 ,7cP a un débit de 2ml/[Link] ces conditions l’anthracène et
le phenanthrène donnent deux pics de caractéristiques suivantes :

tr(mn) Largeur a mi- Largeur a la


hauteur (sec) base w (sec)
Pic 1 2,1 4,8 8,2
Pic 2 2,32 5,3 9,1

a) Justifier l’évolution des facteurs de rétention k’ quand on


change la phase mobile.
b) Calculer la perte de charge.
c) Calculer la résolution entre ces deux pics.
d) Cette résolution est-elle satisfaisante ? Si elle ne l’était pas,
comment faudrait-il faire varier les proportions d’eau et
d’acetonitrile pour l’améliorer ?

Vous aimerez peut-être aussi