La Republication Algérienne Démocratique Pupillaire
Institut supérieur national de formation paramédicale
–skikda-
Option: 2 éme année License LSP
Module: bactériologie appliquè
Préparé par : Encadré par:
BENGUECHA SELMA
HARARTHIA OUARDA
2024 / 2025 Mr: M. LAIB
Plan De Travail
01 02 03
DEFINITION INDICATIONS
INTRODUCTION
04 05 06
ETUDE AU
PRELEVEMENT CONCLUSION
LABORATOIRE
[Link]
Les diagnostics médicaux des patients dépendent largement des analyses réalisées à
partir des échantillons biologiques, tels que le sang, l'urine et les selles….etc.
Parmi ces analyses, la coproculture (ou culture des selles) joue un rôle essentiel dans
l'identification des agents pathogènes responsables de diverses infections intestinales.
Mais à quel moment un médecin prescrit-il cet examen et quelles sont les spécificités de
cette analyse?
En tant que techniciens de laboratoire, comment devons-nous manipuler ces
échantillons et quels sont les protocoles à suivre pour garantir des résultats fiables et
précis?
02 . Définition:
La coproculture est l'analyse bactériologique des selles, le plus souvent prescrite dans un
contexte de diarrhée. Elle ne doit pas être systématique mais plutôt réservée aux cas de
diarrhée chronique, contrôle après traitement d'une diarrhée bactérienne ou cas résistants
au traitement inhabituel.
03 .INDICATIONS
La coproculture est prescrite en cas de diarrhée aiguë évocatrice d'une infection
bactérienne, en cas de :
au moins trois selles molles ou liquides
retour d'un voyage dans un pays où les
par jour depuis plus de 24 h et moins de 14
diarrhées bactériennes sont fréquentes
jours
(zone d'endémie)
fièvre supérieure ou égale à 40 °C,
toxi-infection alimentaire collective (TIAC)
présence de glaire ou de sang dans les
diarrhée survenant chez un patient
selles,
hospitalisé (risque de diarrhée nosocomiale
due à Clostridium difficile)
douleurs abdominales
[Link]ÉLÈVEMENT
Condition
À tout moment, de préférence avant antibiothérapie et en phase critique. Pour la
recherche de sang dans les selles doit être faite à distance :
• d’un saignement d’hémorroïdes, urinaires, de constipations ou de la période
menstruelle (intervalle d’au moins 3 jours).
• d’une prise d’alcool, d’aspirine, corticostéroïdes, (intervalle d’au moins 7 jours).
• Il est nécessaire d’arrêter certains médicaments pouvant gêner la lecture tels que
charbon, huile de paraffine, baryte et laxatifs
• Le prélèvement s'effectue de préférence au laboratoire.
Le patient transfère l'équivalent d'une noix de selles, à l'aide d'une spatule ou
d'un flacon-cuillère, dans un pot stérile, couvercle vissé, en privilégiant les
éléments glaireux, sanglants ou d'aspect atypique.
• Chez le nourrisson et le petit enfant, on peut réaliser un écouvillonnage rectal.
Volume d’échantillon requis :
• L'examen consiste à effectuer un petit prélèvement (environ 10 à 20 g) de selles
Au minimum une noix de selles.
• Si les selles sont liquides, éviter de remplir le pot à plus d’1/3.
• Parfois 2 à 3 prélèvements chez un patient diarrhéiques.
Conservation et transport :
• Les selles doivent être apportées rapidement dans les 2 heures au laboratoire.
Si c’est impossible, conserver les selles au réfrigérateur à 4°- 8°C 12 heures
maximum.
[Link] AU LABORATOIRE
renseignements cliniques :
* âge du patient
* notion de voyage récent
* antibiothérapie en cours
* toxi infection alimentaire suspectée
Matériel
* Boites pétri
* Tubes d'essai
* Echantillon
* Milieu sfb
* Ecouvillons stériles
* Gants
* Milieux Hektoen/SS
* Eau physiologique
* Pipete pasteur
Examen macroscopique des selles :
• Noter l'aspect de la selle: • Sa consistance:
purulent, présence de liquide, molle, moulée.
mucus, présence de sang.
Couleur
Examens microscopiques des selles:
État frais :
Faire une suspension homogène de la selle dans l'eau physiologique et examiner entre lame et
lamelle à l'objectif X40. À ce propos, la dilution doit être suffisante pour apprécier la mobilité
des bactéries mais pas trop forte sinon les recherches sont plus longues.
- Recherche de Bactéries: abondance et prédominance de la flore, mobilité, Gram
- Cytologie: leucocytes, hématies
- Parasites : œufs, larves, kystes, adulte
coloration:
a) bleu de méthylène: recherche des leucocytes
Présence de leucocytes = germe invasif (présence d'une inflammation)
Absence de leucocytes = germe entérotoxique (absence d'une inflammation).
b)GRAM:
-Flore normale = 60-70% BGN/30-40% BGP
-Apprécier toujours s'il ya un déséquilibre de la flore.
CULTURE:
- La coproculture correspond à l'ensemencement de milieux généralement sélectifs pour
isoler puis identifier l'agent infectieux. De plus en plus nombreux, les milieux chromogènes
sélectifs de dernière génération ont grandement facilité le repérage des agents infectieux
présents au sein d'une flore commensale riche et variée.
- À noter que pour certains germes la recherche se fait après une phase d'enrichissement.
● Elle est orienté surtout pour la recherche de Salmonella et Shigella
(entérobactéries).
● JOUR 1:A partir de bouillant d' enrichissement on va préparer une suspension
de selle. Cultiver 24h dans l'étuve à 37°C.
● JOUR 2: on ensemence avec la culture obtenue, un milieu d'isolement sélectif
des Salmonella (SS, Hektoen ).
LES MILIEUX D'ISOLEMENTS CLASSIQUES (CONVIENNENT POUR
SALMONELLA ET SHIGELLA)
Ces milieux sélectifs inhibent totalement la culture des Gram + et partiellement celle
des Gram -.
Les milieux les plus satisfaisants sont les suivants :
milieu S.S (Salmonella – Shigella):
La gélose Salmonella Shigella (SS)
est un milieu d'isolement sélectif,
inhibant les bactéries à Gram positif
et utilisé pour la recherche
des Salmonella dans les selles.
milieu Hektoen:
● C'est un milieu servant à une meilleur discrimination des bactéries surtout
Salmonella, Shigella, Yersinia.
● Il contient 3 sucres: lactose, saccharose et salicine Indicateur coloré de PH :
Bleu de Bromothymol et fushine acide.
RÉSULTATS ET INTERPRÉTATION:
➤ Lorsque le médecin prescrit une coproculture standard, les agents pathogènes les
plus fréquemment impliqués dans les diarrhées infectieuses sont recherchés de
manière systématique, à savoir:
• Les bactéries des genres Salmonella et Shigella;
• Les bactéries du genre Campylobacter,
• La bactérie Yersinia enterocolitica.
➤ Les techniques d'ensemencement, de culture et d'identification des bactéries
nécessitent un délai de 4 jours, avant de pouvoir obtenir l'ensemble des résultats.
La recherche d'agents pathogènes responsables de diarrhées post-antibiotiques :
• Clostridium difficile, de loin le plus fréquent
• Klebsiella oxytoca
• Clostridium perfringens
• Staphylococcus aureus
• Des levures (Candida).
• Résultat négative: (pas des germes pathogènes) Absence de pousse
bactérienne.
• Résultat positive:
[Link]
La coproculture est essentielle pour diagnostiquer les infections intestinales (diarrhées aiguës
ou chroniques), identifier les bactéries pathogènes et adapter le traitement antibiotique
Bactéries fréquemment recherchées :
•Salmonella
•Shigella
•Escherichia coli (souches pathogènes)
•Campylobacter
La coproculture permet un diagnostic rapide et fiable des infections digestives, contribuant à une
prise en charge efficace du patient.
MERCI POUR
ATTENTION