travaux pratiques de chimie Agrégation physique 2024-2025
TP3 :Détermination du pKi d’un indicateur colorée :
Bleu de bromothymol par spectrophotométrie
1 But
1. savoir exploiter un spectre UV-visible.
2. déterminer le pKi d’un indicateur coloré.
2 Étude théorique
Définitions
— Transmittance : rapport de l’intensité résultante à l’intensité incidente, II0 .
— Absorbance : A, autrefois
( ) appelée densité
( )optique D, définie comme le logarithme de l’inverse de
la transmittance, log T1 , c’est-à-dire log II0 . Son intérêt vient de ce qu’elle est proportionnelle à la
concentration du soluté qui absorbe (loi de Beer) et à l’épaisseur de solution traversée (loi de Lambert).
— Coefficient d’absorption molaire : ε, coefficient de proportionnalité entre A et c, il est fonction de
la longueur d’onde, de la température et du pH ; on devrait donc préciser ε(T, pH, λ). Dans la suite du
texte, la mention (T, pH, λ) ne figure pas afin d’alléger l’écriture.
Les indicateurs colorés habituellement utilisés pour les dosages acido-basiques sont des colorants orga-
niques possédant des propriétés acido-basiques. Leurs formes acide HA et base conjuguée A sont de
couleurs différentes.
La couleur est due à la délocalisation des électrons π sur l’ensemble de la molécule
Figure 1 – Couple acido-basique du BBT
Questions
1. sous quelle forme majoritaire l’indicateur se trouve à pH=4 ?
2. donner la formule de l’absorbance à ce pH notée Aa .
3. sous quelle forme majoritaire l’indicateur se trouve à pH=10 ?
4. donner la formule de l’absorbance à ce pH notée Ab .
5. en milieu neutre les deux forme de l’indicateur co-existent , donner la formule de l’absorbance notée An
sachant que elle est une propriété additive des solutions.
6. démontrer cette relation :
An − Aa
pKi = pHn − log
Ab − An
7. Qu’est-ce qu’un point isobestique ?
3 Manipulation
3.1 Produits et matériels
Matériel Réactifs
Spectrophotomètre et cuves appropriées
Pipette de 10 mL solution de Bleu de bromothymol (BBT)
3 fioles de 100 mL Solutions tampons de pH 4,0-7,0 et 10,0
Table 1 – Matériel et Réactifs
I. ZAIDI 1 AGP-Marrackech Première année
travaux pratiques de chimie Agrégation physique 2024-2025
3.2 Mode opératoire
Principe
On trace les spectres d’absorption d’une solution de l’indicateur à trois pH différents.
La mesure de l’absorbance à trois longueurs d’onde différentes permet de déterminer le pKi de l’indicateur.
1. Dans trois fioles de 100 mL, mélanger 1 mL de la solution de BBT, 89 mL d’eau distillée et 10 mL de
chacune des solutions tampons de pH (4,0 - 7,0 et 10,0).
2. lancer le logiciel SYNCHRONE -> Exécuter -> Module de chimie -> ok
3. choisir SPECTROPHOTOMETRE JENWAY 63000 -> COM 1 -> tester
4. Plage de mesure : 400-800 nm -> valeur mesurée : absorbance
5. acquisition -> démarrer
6. cliquer sur oui pour recalculer la ligne de base -> introduire le blanc préparé avec 10 mL des mêmes
solutions tampons de pH et 90 mL d’eau (cas d’un spectrophotomètre « simple faisceau »).
7. cliquer sur démarrer
placer la cuve tel que les faces lisses soient dans l’axe du faisceau
8. Introduire la cuve contenant la solution de l’indicateur coloré préparé dans le tampon 4
9. Lancer l’acquisition en cliquant sur OK.
10. Fermer à la fin de l’opération.
11. répéter les étapes précédentes avec les deux autres de pH=7 et de pH=10 dans la même feuille pour que
les courbes soient superposées
Figure 2 – Spectres visibles du BBT à différents pH.
3.3 Exploitation des résultats
Les valeurs de A et λ ont été obtenues en continu à l’aide d’un spectrophotomètre piloté par ordinateur. Les
solutions tampons de pH utilisées sont pH = 4, 0, pH = 7, 0 et pH = 10, 0.
Le fichier a ensuite été traité sur ordinateur à l’aide du logiciel Excel. Cela permet un calcul de pK pour chaque
longueur d’onde (qu’il serait fastidieux d’effectuer sans cet outil), et de la moyenne résultante.
1. calculer pKi expérimentale et déterminer l’écart relative sachant que la valeur tabulée est 7,4.
2. Déterminer le pourcentage des formes acide et basique en fonction de l’absorbance.
I. ZAIDI 2 AGP-Marrackech Première année