ESPERMOGRAMA
LABORATORIO PROSALUD
ESPERMOGRAMA
OBJETIVO
El espermograma tiene como objetivo evaluar la calidad del semen, se analizan
parámetros macroscópicos, como el volumen y el pH, y microscópicos, como la
morfología, movilidad y concentración de los espermatozoides.
Este se realiza con el fin de estudiar el grado de fertilidad masculina.
DEFINICIÓN
Es un examen para medir la cantidad y calidad del semen y de los espermatozoides
de un hombre. El semen es el líquido espeso y blanco liberado durante la eyaculación
y que contiene espermatozoides.
TIPO DE MUESTRA
Muestra seminal obtenida por masturbación
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El semen es una mezcla de espermatozoides suspendidos en una secreción del
testículo y epidídimo, que en el momento de la eyaculación se combina con
secreciones de la próstata, vesícula seminal y glándulas anexas al tracto reproductor
masculino.
Por lo tanto es una prueba fundamental utilizada en los estudios de fertilidad
masculina.
El semen contiene virus de VIH, hepatitis B y Herpes por lo tanto se debe manipular
con todos los EPP
ESPERMOGRAMA
ESPERMOGRAMA
PREPARACION DEL PACIENTE
• Abstenerse de tener relaciones sexuales entre 3 a 5 días antes de la recolección de la muestra.
No tener ninguna actividad que provoque eyaculación en los 3 días previos a la toma de
muestra.
• No ingerir alcohol previo 3 días.
• Informar si ha presentado fiebre 3 días antes del examen.
• Debe orinar antes del examen.
• Limpiar los genitales con agua y jabón y secarse con una toalla sin usar.
• Recolectar la muestra en recipiente estéril y de boca ancha.
• Recolectar mediante masturbación el total de la muestra, ya que la primera parte contiene la
tercera parte del numero de espermatozoides
• Idealmente la muestra debe recolectarse en el laboratorio, caso contrario debe ser llevada en un
tiempo inferior a 1 hora a temperatura corporal .
• Al llegar al laboratorio anotar la hora de recolección y la hora de recepción de la muestra.
• Anotar estos datos en el recipiente: código, hora de recolección y hora de recepción de la
muestra
DESPUES DE EXPLICARLE AL PACIENTE SOBRE LA RECOLECCION DE LA
MUESTRA SE LE DEBE ENTREGAR LAS INSTRUCCIONES ESCRITAS
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Sistema excretor o de expulsión que esta formado por varios tubulos que por medio de
contracciones rítmicas expulsan el eyaculado.
El producto final del eyaculado suele tener un volumen de 3 a 4 ml,variando según el individuo y
según la frecuencia eyaculatoria.
Así cuanto mas frecuentes sean las eyaculaciones, menor es el volumen, por lo tanto mayor va a
ser la concentración, y no seria una muestra representativa. El volumen también puede verse
disminuido.
Los días de abstinencia solo interfieren en el volumen del eyaculado y la concentración de
espermatozoides ,no interfieren en la movilidad, morfología, vitalidad y pH.
EN CASO DE NO RESPETAR DICHO PLAZO,LA PRUEBA PERDERA SU VALOR DIAGNOSTICO
PARA RESULTADOS FIABLES SE RECOMIENDA REPETIR EL ESPERMOGRAMA UNA SEMANA
DESPUES .
ESPERMOGRAMA
No hay que olvidar que aunque el espermograma nos aporta información sobre la calidad seminal, pero una
muestra de semen que sea diagnosticada como normal, no nos asegura que la fertilidad este garantizada,
mientras que una muestra diagnosticada como anómala, tiene mayores probabilidades de tener fertilidad
disminuida.
IMPORTANCIA DE LA ABSTINENCIA.
El aparato genital masculino consta de:
• Sistema Secretor que esta formado por los Testículos que es donde se producen los
espermatozoides(espermatogenesis).Su función es la maduración y concentración de
espermatozoides ,los almacena hasta 42 días y los destruye luego de una larga abstinencia. Aporta entre
el 10% a 15 % del volumen eyaculado.
• Glándulas Accesorias(vesículas seminales, próstata, glándulas bulbo uretrales y uretrales):Forman el
plasma seminal (entre el 80% y 90% del volumen eyaculado) cuya función es ser medio nutritivo, vehículo
de transporte y protección del tracto urinario.
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La importancia de un espermograma es para confirmar el diagostico de : Varicocele
El varicocele no suele manifestar síntomas, pero puede causar una disminución en la
producción y calidad de los espermatozoides lo que lleva a la infertilidad
Varicocele es la dilatación de las venas dentro de la piel flácida que sostiene los
testículos(escroto)Estas venas transportan sangre sin oxigeno desde los testículos. Un
varicocele se produce cuando la sangre se acumula en las venas en lugar de circular hacia el
exterior del escroto.
Sintomas_ a menudo el varicocele aparece en el lado izquierdo del escroto enter elos posibles
síntomas están_ dolor
Testiculos de diferente tamaño
Infertilidad
El varicocele se forman en la pubertad
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RECEPCION DE LA MUESTRA
AL RECEPCIONAR LA MUESTRA SE DEBE HACER LO SGTE:
1) Anotar los datos del paciente
2) Días de abstinencia
3) Si recolecto toda la muestra
4) Preguntar si esta tomando algún medicamento
5) Preguntar si tuvo fiebre
6) Hora de recolección de la muestra
7) Hora de recepción de la muestra
8) Informar a la bioquímica a cargo de realizar la prueba y luego llevar la muestra a la
estufa(o en su caso entregar la muestra a la bioquímica)
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Examen macroscópico y microscópico
Al recepcionar la muestra primero se lleva a estufa ,luego proceder:
1.- Examen macroscópico inicial
Este consta de verificar las sgtes características:
• Licuefacción
• Aspecto
• Viscosidad
• pH
• Color
• Coagulación
• Olor
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1.1.-Licuefacción .-Se la realiza con una chupeta, se debe aspirar y expulsar la muestra ,observar si ya
esta liquida y anotar el tiempo de licuefacción.
Una muestra de semen normal se licua dentro de los 60 minutos de la eyaculación a temperatura
ambiente, aunque esto suele ocurrir dentro de los primeros 15 minutos. En algunos casos, la licuefacción
no es completa a los 60 minutos, y esto debe ser informado. Una vez licuada la muestra debe ser
mezclada cuidadosamente en el recipiente original. evitando batirla vigorosamente. Durante el tiempo de
licuefacción, un mezclado continuo mediante la rotación del recipiente contribuye a disminuir errores en la
determinación de la concentración de los espermatozoides.
La licuefacción se debe controlar cada 15 [Link] informa completa o incompleta y tiempo de
licuefacción si esta fuera incompleta
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1.2.-Volumen .-El volumen del eyaculado puede ser medido usando un cilindro
graduado de base cónica. Las jeringas plásticas no deben ser utilizadas para este
propósito pues pueden alterar la motilidad de los espermatozoides y las agujas
hipodérmicas no son seguras.
Después de medir el volumen devolver la muestra al frasco y mantenerlo en la estufa
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1.3.- Aspecto.-La muestra de semen debe ser examinada inmediatamente después
de su licuefacción o dentro de los 60 minutos de emitida, por simple inspección a
temperatura ambiente. Una muestra normal tiene una apariencia homogéneo gris-
opalescente. Puede aparecer menos opaca cuando la concentración de
espermatozoides es muy baja, marrón cuando contiene glóbulos rojos o amarillenta en
el caso de un paciente con ictericia o que consume algunas vitaminas.
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1.4.- Viscosidad.- La viscosidad de la muestra licuada (a menudo denominada
"consistencia") puede ser estimada aspirando la muestra en una pipeta de 5 mL y
permitiendo la libre caída de las gotas, en las que se observa la longitud del filamento
formado. En una muestra normal se observan gotas pequeñas y bien definidas,
mientras que en una muestra de viscosidad anormal se formara un filamento mayor de
2 cm. Como método alternativo, la viscosidad se puede evaluar introduciendo una
varilla de vidrio en la muestra y observando la longitud del filamento que se forma al
retirarla. Este no debe exceder los 2 cm. Una viscosidad elevada puede interferir con
la determinación de la motilidad y la concentración de espermatozoides Los métodos
para reducir la viscosidad son los mismos utilizados para la licuefacción retardada
Se informa viscosidad Normal
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1.5.-pH .-El pH debe ser medido dentro de una hora de la eyaculación. Se distribuye
una gota se semen sobre el papel de pH (rango pH: 6,1 a 10,0 6 6,4 a 8,0), al cabo de
30 segundos el color de la zona impregnada debe ser uniforme .Cuando el pH es
menor de 7,0 en una muestra con azoospermia se debe sospechar obstrucción de las
vías eyaculatorias o ausencia bilateral congénita de los vasos deferentes.
1.6.- Color.- El color normal del semen es blanco grisáceo.
Si hay una coloración amarilla o verdosa puede significar infección (presencia de
leucocitos) , bilirrubina o puede estar mezclado con orina.
Si tiene color rosado o marrón es debido a la presencia de sangre o hematíes
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1.7.-Coagulacion.- El esperma es eyaculado en estado liquido, pero inmediatamente
después de la eyaculación el semen se vuelve una masa semisólida coagulada.
Si el semen se licua y no persiste el coagulo se debe informar como : Ausente o
normal.
1.8. Olor.- Normalmente tiene un olor parecido al cloro debido a que su composición
tiene un pH similar al del cloro, que es superior a 7. Si este tiene ese olor se debe
informar suigeneris
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Examen microscópico del semen
Se lo realiza colocando 20 ul de semen liquido en un portaobjeto
El examen microscopico incluye:
• Agregacion
• Aglutinacion
• Motilidad
• Morfologia
• Vitalidad
• Concentracion o recuento espermatico
• Otras Celulas
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2.- Examen microscópico del semen
Se coloca 10 ul de muestra en un portaobjeto y observar
2.1.- Agregación.- . La adherencia de espermatozoides inmóviles o móviles a filamentos de
moco, a células que no son espermatozoides o a detritos es considerada agregación
inespecífica y debe anotar como tal. Se informa agregación : ausente
2.2 Aglutinación .- La aglutinación de los espermatozoides significa que los espermatozoides
móviles se adhieren entre ellos, cabeza con cabeza, cola con cola o de un modo mixto, por
ejemplo, cabeza con cola. La presencia de aglutinación sugiere la existencia de una causa
inmunológica de la infertilidad, pero no es evidencia suficiente para probarla. La aglutinación
es evaluada en el momento de determinar la motilidad de los espermatozoides. El tipo de
aglutinación debe ser informado, por ejemplo, cabeza con cabeza, cola con cola o de formas
mixtas. Se puede utilizar una escala semicuantitativa desde aglutinación :ausente (sin
aglutinación) a+++ (agrupamiento masivo en el cual todos los espermatozoides móviles estan
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AGREGACION /AGLUTINACION
1 2 3 4 5 TOTAL
2/5 = 0,5
VALOR NORMAL < 5
AGREGACION 1 0 1 0 0 2 Resultado
Agregación : ausente
AGLUTINACION Aglutinación : ausente
0 0 0 0 0 0
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AGLUTINACION
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2.4.-MOTILIDAD
Se coloca 20 ul de semen en un portaobjeto
Tenemos 3 tipos:
1. Motilidad Progresiva.- Los MP son aquellos espermatozoides que se mueven y se
desplazan.
2. Motilidad no progresiva.- Los NP en cambio, hace referencia a los espermatozoides que
se mueven, pero no son capaces de desplazarle.
3. Inmovilidad.- Espermatozoides inmoviles
espermograma
Espermograma
MOTILIDAD
Se cuentan un total de 200
TOTAL % espermatozoides y el total se
lleva a %
1 2 3
Progresiva 80 75 70 225 64 VALORES DE REFERENCIA:
No progresiva 35 28 20 83 24 MP:≥ 32 %
MP + NP ≥ 40%
Inmoviles 15 16 13 44 12
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MORFOLOGIA
Se hace un extendido y se tiñe con panóptico
1. Morfología Normal.- Los espermatozoides normales tienen la cabeza ovalada y la
cola larga.
2. Morfología Anormal : La morfología espermática anormal significa que
los espermatozoides presentan defectos en alguna de las tres partes que lo conforman
o en las tres. Estos defectos pueden afectar la capacidad del esperma de llegar al
óvulo y penetrarlo.
• Defecto de cabeza: una cabeza grande o deformada este defecto puede afectar la
capacidad del esperma de llegar al óvulo y penetrarlo: puede ser grande, pequeña,
acintada, piriformes, amorfa y vacuolada
• Defecto de pieza intermedia :Defectos en el cuello del espermatozoide producen
alteraciones en la fecundación, cuello doblado, grueso ,irregular o fino
• Defecto de cola: puede ser corta, múltiple, en horquilla, rota, doblada (> 9oº), de
espesor irregular, arrollada y toda combinación entre estos. Afectan a su movimiento.
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%
MORFOLOGIA 1 2 TOTAL
90 80 170 85
NORMAL
ANORMAL 22 8 30 15
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Del porcentaje de
espermatozoides anormales
ANORMALES 1 2 TOTAL 15 %
(15%) se debe a su vez sacar
porcentaje de cada
4 10 espermatozoide anormal o sea :
CABEZA 6 6 % cabeza anormal
ANORMAL
% cuello anormal
CUELLO 5 3 8 5 % cola anormal
ANORMAL Y el total debe llegar a % total de
espermatozoides anormales
COLA 4 3 7 4 encontrados
ANORMAL
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Modo de llevar a cabo un contaje morfológico de espermatozoides: Con preparaciones
teñidas, con panoptico se debe utilizar un objetivo de inmersión 100 x.
La evaluacion morfológica debe ser llevada a cabo en varias áreas del portaobjeto
seleccionadas sistemáticamente
A medida que el portaobjetos es examinado se evalúan y registran todos los espermatozoides
normales, y se anotan los defectos de los espermatozoides anormales
Se deben contar al menos 200 espermatozoides consecutivos (es mejor evaluar 200 una vez
que 100 dos veces). Aunque es preferible contar 200 espermatozoides dos veces para reducir
la variabilidad y los errores de contaje
Espermograma
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Espermograma
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PRUEBA DE VITALIDAD
Se realiza con eosina, ya que este colorante tiñe solo las células muertas.
1.- En un portaobjeto colocar una gota de muestra y una gota de colorante eosina.
2.- Mezclar con un aplicador de madera y colocar el cubreobjetos.
3.- Observar en un aumento de 40 X,realizar un conteo de espermatozoides no teñidos(vivos) y
teñidos(muertos) dentro de las dos primeras horas. Reportar en porcentaje %
Se cuentan 200 espermatozoides con el microscopio óptico, diferenciando aquellos que están vivos
(no coloreados) de las células muertas (coloreadas). Las evaluaciones de la vitalidad espermática
sirven para verificar la exactitud de la evaluación de motilidad, ya que el porcentaje de células muertas
no debe ser mayor (dentro de los errores de contaje) que el de espermatozoides inmóviles. Además,
la presencia de gran proporción de células vivas, pero inmóviles puede significar que existen defectos
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La vitalidad también se informa en %:
Valor de referencia
Espermatozoides vivos 58 %
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OTRAS CELULAS
En un espermograma se pueden ver :
• Células redondas: Se cuentan por campo VR: < a 5 cel. Por campo
• Leucocitos: Observar por campo VR: < 1 célula por campo
• Eritrocitos: No se encuentran
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2.3.- Concentración (recuento Espermatico).-Explorando el portaobjeto y estimando
el numero de espermatozoides por campo, o por parte de un campo, equivalente a 1
nL se obtiene la concentración aproximada de espermatozoides en 106 /mL. Esta
estimación es utilizada para decidir la dilución a utilizar en la determinación de la
concentración de los espermatozoides en el hemocitometro: < 15 espermatozoides,
dilución 1:5; 15-40 espermatozoides, dilución 1:10; 40-200 espermatozoides,
dilución 1:20; > 200 espermatozoides, dilución 1:50 véase cuadro sgte
Cuando el numero de espermatozoides varia considerablemente entre campos
visuales significa que la muestra no es homogénea y que el semen debe ser mezclado
cuidadosamente
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Factores de dilución y conversión para el hemocitometro mejorado de Neubauer.
Factores de conversión
Número de cuadrados
Espermatozoides Dilución grandes contados
por campo de 400 x (semen+ diluyente) 25 10 5
< 15 1:5 (1 + 4) 20 8 4
15-40 1:10 (1 + 9) 10 4 2
40-200 1:20 (1 + 19) 5 2 1
> 200 1:50 (1 + 49) 2 0,8 0,4
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PREPARACION DE LA SOLUCION DE DILUCION
Se realiza en cámara de Newbauer y se hace la dilución con la solución de
Macomber y Saunders.
Componentes:
• Agua destilada = 100 ml
• Bicarbonato de sodio = 5 gramos
• Formol al 40 % = 1 ml
La solución preparada tiene una duración de 1 año
El formol del reactivo inmoviliza a los espermatozoides, mientras que el bicarbonato al
fluidificar el moco facilita la observación.
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Haciendo una dilución de 1/20 (20 ul de semen + 380 ul de solución de Macomber
Saunders) Transfiera aproximadamente 10 ul de cada espécimen diluido y mezclado
(duplicado) en cada una de las cámaras de contaje del hemocitometro. Esto se puede
hacer tocando cuidadosamente el borde del cubreobjetos con el extremo de la pipeta y
permitiendo que cada cámara se Ilene por acción capilar. Las cámaras no deben estar
demasiado llenas ni demasiado vacías y el cubreobjetos no debe ser movido. El
hemocitometro se deja en reposo por aproximadamente cinco minutos en una cámara
húmeda para prevenir la desecación.
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El procedimiento para el contaje de los espermatozoides en la cámara del
hemocitometro es el siguiente: el cuadrado central de la rejilla del hemocitometro de
Neubauer mejorado contiene 25 cuadrados grandes, cada uno de los cuales contiene
16 cuadrados mas pequeños Para las muestras que contienen menos de 10
espermatozoides por cuadrado grande se debe contar toda la rejilla, es decir, 25
cuadrados; para las que contienen de 10 a 40 espermatozoides por cuadrado pueden
estudiarse 10 cuadrados, y para las que contienen mas de 40 espermatozoides por
cuadrado es suficiente analizar 5 cuadrados. Si un espermatozoide esta en la linea
que divide a dos cuadrados adyacentes, solo se debe contar si esta en el lado superior
o izquierdo del cuadrado que se estudia. Se deben realizar contajes por duplicado de
200 espermatozoides para obtener un error de contaje aceptablemente bajo.
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Ejemplo:
Los contajes de diez cuadrados en cada cámara dan 247 y 213 espermatozoides. La
suma es 460 .
Se debe calcular el contaje promedio (460/2 = 230) y estimar Ia concentración a partir
de los factores de conversión del Cuadro de factores Para poder determinar la
concentración de espermatozoides en la muestra de semen original en millones/mL, el
promedio de espermatozoides se divide por el factor de conversión apropiado, como
se muestra en el Cuadro de factores.
Por ejemplo, para un contaje promedio de 230 en una dilución 1:20 y con diez
cuadrados contados por cámara, el factor de conversión es 2 y la concentración
espermática es 115 x 106 /ml
230 (promedio de espermatozoides = 115 x 106/ml
2 (factor establecido para 10 cuadrados contados)
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Cuando el numero de espermatozoides es muy bajo (< 12/campo magnificacion de
400 x), es posible determinar su concentracion después de centrifugar la muestra con
el fin de concentrarla. Un milímetro de semen (o el máximo que permita el eyaculado)
es centrifugado a 600 g durante 15 minutos. Luego se retira un volumen conocido del
plasma seminal y el restante es mezclado nuevamente y se cuenta como se describe
en el recuento espermático . La concentración final es corregida al volumen inicial
espermograma
Se saca promedio del conteo de ambos
cuadrantes y este resultado se divide por el
factor de conversión de acuerdo al numero de
cuadrados contados esto seria la cantidad de
espermatozoides por ml de muestra.
Este valor se multiplica por el volumen medido y
se obtiene el valor total de espermatozoides en
la muestra esto seria espermatozoides por
eyaculación o espermatozoides en total de
eyaculado
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PARAMETROS CARACTERISTICAS VALORES ESPERADOS
MACROSCOPICAS
Volumen ≥ 1.5 ml
Color Blanco grisaceo
pH ≥ 7.2
Coagulacion Ausente
Aspecto Opalescente
Olor Suigeneris
Viscocidad Normal
Licuefaccion Completa
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PARAMETROS CARACTERISTICAS VALORES ESPERADOS
MICROSCOPICAS
Agregación ausente
Aglutinación ausente
Concentración por ml ≥ 15 millones ∕ml
Concentración por eyaculación ≥ 39 millones/ml
Movilidad progresiva ≥ 32 %
Motilidad Progresiva 32 %
Motilidad no progresiva MP+NP= 40%
Morfología Normal ≥4%
Vitalidad espermática ≥ 58 %
Celulas < a 5 cel /campo
Leucocitos < a 1 cel/campo
Eritrocitos
I A S
AC
G R