Universidad Politécnica de
Universidad Politécnica de Zacatecas Zacatecas
Medios de Cultivo (Virología)
Docente: Dra. Mayela de San Juan Robles Huizar
ING. BIOTECNOLOGIA
INTEGRANTES:
CLARA EDITH SIFUENTES TREJO
LUIS FERNANDO SARMIENTO MALDONADO
HAXEL EMMANUEL SALAS RECENDEZ
MEDIOS DE CULTIVO
EL CULTIVO CELULAR SE REALIZA EN MEDIOS
ARTIFICIALES PREPARADOS MEDIANTE LA MEZCLA DE
COMPONENTES PURIFICADOS O DE SOLUCIONES
ORGÁNICAS, EN EL INTERIOR DE INSTRUMENTOS QUE
MANTIENEN LAS CONDICIONES FÍSICO-QUÍMICAS
ADECUADAS Y SOBRE SOPORTES O RECIPIENTES QUE LOS
CONTIENEN Y AÍSLAN DEL MEDIO EXTERIOR.
Los medios de cultivo son sustratos tanto líquidos como sólidos que aportan los
nutrientes necesarios y las condiciones abióticas ( pH, concentración de
sales, humedad, etc.)apropiadas para el crecimiento de uno o varios
organismos.
Uno de los componentes comunes en los medios ricos suele ser albumina de
suero bovino. Para conseguir medios ricos y complejos, son los indicados
para crecer patógenos, se encuentran entre los ingredientes sangre ovina.
Los parásitos mas especializados y los virus son difíciles de crecer en el
laboratorio, ya que muchas veces han eliminado todo o parte de su sistema
replicativo de ADN para ahorrar espacio y energía.
MEDIOS PARA CULTIVAR HOSPEDADORES DE
PROPAGACIÓN
Para la propagación de un virus adaptado a un cultivo de tejidos
es importante mantener la línea de células en un lugar
apropiado.
Todos los medios recomendados para la células se indican en la
hoja de producto.
LOS MEDIOS COMÚNMENTE UTILIZADOS EN LA PROPAGACIÓN DE
CEPAS ADAPTADAS AL CULTIVO DE TEJIDOS INCLUYEN LOS
SIGUIENTES:
Medio mínimo esencial de Eagle
(EMEM)
Es un medio simple, a menudo se
fortifica con suplementos adicionales o
niveles más altos de suero.
RPMI-1640 ATCC'S
Fue modificado para contener
cantidades más altas de glucosa,
piruvato sódico
EL MEDIO L-15 DE LEIBOVITZ
Está formulado para el intercambio de gas libre
con aire atmosférico.
SUPLEMEMTOS DEL MEDIO
Para los medios de crecimiento para lo propagación de invitados deben ser adicionados
suplementos que no están presentes en el medio de cultivo
Los cuales pueden ser
Hormonas
Factores de crecimiento
Suero
SUERO
El suero puede ser suplementado como un factor de crecimiento,
proteínas, hormonas, carbohidratos, lípidos, aminoácidos,
minerales
Desafortunadamente, es derivado naturalmente de animales, por lo
cual es propenso a contener gran variedad de microorganismos
contaminantes
ALMACENAMIENTO
No almacenar el suero Dispensando y
a temperaturas Durante un periodo
almacenando sueros en
superiores a 20°c prolongado
alícuotas
Asegurarse de que los sueros
estén almacenados de la luz
directa
DESCONGELAR
Se coloca el suero congelado
Se coloca en botella en un
en un refrigerador a una
baño de agua de 37°c se Tienden a concentrarse en
temperatura de 2°c a 8°c
agita suavemente para el fondo de la botella
durante la noche
mezclar los solutos
No mantener el suero a
Sin mezclar puede conducir a Descongelar el suero en 37°c mas de lo necesario
una formación de un un baño a mas 40°c
precipitado dentro de la
botella
TURBIDEZ Y PRECIPITADOS
En estos sueros pueden retenerse algo de fibrinógeno.
Se puede formar un precipitado en el suero cuando de incuba a 37°c o mas
durante periodos prolongados.
Este precipitado puede incluir cristales de calcio.
Fosfato pero esto no afecta al rendimiento del suero como suplemento.
ADITIVOS Y CRIOPROTECTORES
Para preservar estas sepas virales por crioprecervacion se puede
usar una mezcla de FBS Y DMSO glicerol.
Algunos virus requieren una mezcla especializada de
crioprotectoreso aditivos.