“Compuestos bioactivos del canelo”
y sus aplicaciones
Dr. Iván José Montenegro
Facultad de Medicina
Universidad de Valparaíso
Curauma 04 de abril de 2021
Canelo árbol sagrado
Medicina tradicional
sanar tumores
erupciones de la piel
afecciones como úlceras
absesos y acumulación de pus
Febrífugo
Diurético
contra el reumatismo
antiescorbútico,
Jonh Winter 1579
Genero Drimys en Chile
Drimys confertifolia, (endémica de las islas de Juan Fernández)
Drimys winteri
Drimys andina
Corteza Hojas Flores
Semillas Frutos
Metabolitos secundarios aislados desde
Drimys winteri forst.
OH O O
O O O
O O
H H H H
Drimenol Confertifolina Isodrimenina Winterina
HO O
CHO O
O
CHO
OH
H H
H
Poligodial Fueguin Drimenina
Moléculas aisladas desde Drimys winteri Forst.
OH
H. Appel
Drimenol
1948
Síntesis de compuestos carbonílicos y
derivados de importancia biológica.
• Desde el descubrimiento del primer sesquiterpeno drimánico “drimenol” en
la corteza del Drimys winteri forst por Appel en 1948, se han obtenido
derivados hemisinteticos a partir de este sintón natural.
• Drimenol a nivel biológico tiene una función similar a una heteroauxina
comportándose análogamente al ácido indolacético (Jansen et al, 1991).
Sin embargo el factor más importante desde el punto de vista de la síntesis
orgánica, es su utilidad como compuesto de partida en la síntesis de
drimanos y nordrimanos biológicamente activos.
OH
Drimenol
Síntesis de nordrimanos
OH
CHO
i ii,iii iv,v
O OAc OH
H H H H
(11) (12) (13) (14)
Esquema.1 (i) CrO3, Piridina (20%) ; (ii) LiAlH 4, THF ; (iii) Ac2O, piridina (97%); (iv) SeO2 (Cat.), (p-MeOC6H4)2SeO, dioxano; (v)
K2CO3, MeOH (95%)
Cortes et al, 1993 J. Nat .Prod. Letter., 21, 37.
síntesis de warburganal
OAc
OAc OH
OH
OH CHO
OH
OH CHO
OH
i ii
iii
H
H H
H
(18) (19) (20) (21)
warburganal
Esquema 3 i) SeO2 , dioxano, 45%, ii) KOH, MeOH 100%, iii) DMSO, (CF 3CO)2O 64%
Jansen et al, 1991 Nat. Prod. Rep. 8, 309-318.
OH
CHO O O O O
ii CHO
i iii
H H
H H
(11) (22) (23) (24)
v
iv
OAc CHO
CHO
(18)
H
H
(5)
iii OAc vii
OAc
OH OH
OH
OH + vi
OH
H (27)
H
(25) (26) H
Esquema.3 (i)PCC, CH2Cl2, 75.4%; (ii) CH(CH2OH)2, H+, 88.5%; (iii) SeO2 (cat), (p-MeOC6H4)2SeO, 45%; (iv) TsOH, acetona,
100%; (v) Ac2O, Py, 98%; (vi) K2CO3, MeOH, 100%; (vii) Oxidación de Swern
Cortes et al, 1985 Chemistry and Industr. 735.
Moléculas aisladas desde Drimys winteri Forst.
OH O O
O O O
O O
H H H H
Drimenol Confertifolina Isodrimenina Winterina
HO O
CHO O
O
CHO
OH
H H
H
Poligodial Fueguin Drimenina
Principales metabolítos desde Drymis
Diego Muñoz-Concha, et al, Biochemical Systematics and ecology, 35 (2007, 434-438.
Poligodial, importancia biológica
CHO
CHO
Polygonum hydropiper Dendrodoris limbata
Actividades biológicas Referencia bibliográfica
Actividad antibacteriano Kubo et al. 2005 Phytother Res 19:1013–1017
Actividad antialérgica Cunha et al. 2001 Life Sci 70:159–169
Actividad antiinflamatoria Lago et al. 2010 J Braz Chem Soc 21:1760–1765
Actividad antifúngica Derita et al. 2009 J ;Ethnopharmacol 124:377–383
Actividad larvicida Montenegro et al. 2013 Molecules 18:4192-4208
Mecanismo de acción
Mecanismo propuesto por Kubbo
H+ R R
HO
O H R N
CHO N
N
CHO
NH2R
H
OH
H2O
Mecanismo de acción
Mecanismo propuesto por Fritz
CHO N Lys
H2N Lys
CHO
Cys
HS Cys S
Mecanismo de acción
CHO CHO CH2OH O
CHO CHO
O
1 2 3 4
HO
CH2OH O O CHO
CH2OH
5 6 7 8
CH2OH CH2OH CH2OH CH2OH
CH2OH CH2OH CH2OH
O OH
9 10 11 12
CH2OH CHO O
O
13 14 15 16
CH2OH
17
Mortality percentage of D. melanogaster larvae, after 168 h of the application of
the compounds at different concentrations in larvae’s diet D. melanogaster til-til
Compounds % Mortality EC50 (mg/L)
1 15.0 ± 0.3 >100
2 50.0 ± 0.4 60.0 ± 4.2
3 4.10 ± 0.9 >100
4 100 ± 0.2 4.5 ± 0.8
5 0.0 >100
6 4.2 ± 1.2 >100
Mortality percentage of D. melanogaster larvae, after 168 h of the
application of the compounds at different concentrations in larvae’s diet
D. melanogaster til-til
Compounds % Mortality EC50 (mg/L)
7 33.3 ± 1.1 57.8 ± 2.3
8 0.0 >100
9 0.0 >100
10 0.0 >100
11 0.0 >100
12 12.5 ± 1.2 83.2 ± 3.5
13 0.0 >100
14 0.0 >100
15 46.2 ± 1.3 45.0 ± 2.8
16 35.3 ± 0.2 70.0 ± 2.6
17 35.0 ± 1.1 70.9 ± 3.7
18 0.0 >100
Safrole * 20.0 ± 1.6 18.0 ± 1.5
Metabolitos del canelo
con
Aplicaciones en Síntesis Orgánica
Aplicaciones en Síntesis Orgánica
OH O OCH3 OCH3
O O O O
O O
O O OH O
puupehenone puupehedione spongiaquinone cyclospongiaquinone
O HO HO O
O OH OH O
OH
H H H H
zonarone zonarol yahazunol cyclozonarone
Actividades biológicas de sesquiterpenquinonas
Antitumoral
Antiviral
Antimalárica
Sesquiterpen-
quinonas
Inhibidora
Antialimentaria
enzimática
Antiparasitaria
Aplicaciones en Síntesis Orgánica
O • Aislada en 1996 por Suzuki y
colaboradores.
• Actividad antialimentaria
O
contra abalones.
• 2003 se sintetizó su
enantiómero, el cual fue activo
contra trypanosoma cruzi.
H • Actividad frente líneas
celulares: HM02, HepG2 y
MCF-7.
Cortés, M., Valderrama, J. A. Cuellar, M. Armstrong, V., Preite, M.; J. Nat. Prod., 2001, 64, 348.
Aplicaciones en Síntesis Orgánica
OH OH
CHO O O
CHO
a OH b OTBDPS c OTBDPS d OH
14 15 16 17 18
O e
O O
OH
i, j h g f OH
11 12 20 13 19
Conditions and reagents: a) NaBH4/MeOH; b) ClTBDPS, imidazole, DMF; c) Jones reagent,
acetone; d) TBAF, THF; e) H2, PtO2; f) Jones reagent, acetone; g) vinylmagnesium bromide, THF;
h) thionyl chloride, Py; i) p-benzoquinone, Bz, reflux, 12 h; j) DBU, Bz, 2 h.
Table 1. Cytotoxicity (IC50 µM) of (+)-10 and 11.
Aplicaciones en Síntesis Orgánica
O
O
ent-ciclozonarona (+) 10 isómero angular 11
Compound DU-145 HT-29 PC-3 DHF
(+)-10 6.4 ± 0.8 9.5 ± 1.2 25.0 ± 0.9 48.0 ± 2.3
11 13.3 ± 1.4 14.9 ± 1.8 45.0 ± 0.5 91.0 ± 7.8
Cytotoxicity (IC50 µM) of (+)-10 and 11.
Aplicaciones en Síntesis Orgánica
Aplicaciones tecnológicas
INDUSTRIA DE CULTIVO DE OSTION INDUSTRIA DEL SALMON
CORFO 07-CT9D-68 CORFO 09MCSS-6683
Saprolegnia
(A) (B) (C)
(D) (E)
Morfología oogonial de Saprolegnia spp. mediante microscopio invertido. (a y b)
Oogonia esférica terminal (cepa 11), (b) Oogonia piriforme termina Morfología
zoosporangial de Saprolegnia spp. mediante microscopio invertido (D)
Zoosporangio cilíndrico intercalar (cepa 11710), (E) Zoosporangio claviforme
terminal
Proyecto Corfo Saprolegnia
(A) (B) (C)
(D) (E) (F) (G)
.A) Alevín (4 gr) de Salmo salar afectado de saprolegniasis. B) Cultivo puro cepa 11701. C) Ovas
sanas de Salmo salar . D) Morfología del oogonio y anteridio. E y F) Alevín en saco (0,3 gr) de Salmo
salar afectado de saprolegniasis. G) Colonización semilla cáñamo y arroz. H) almacenamiento de los
cultivos a 4 ºC.
Compuestos evaluados
OH
O
CHO O O
CHO
O
O
H H H H H
(1) (2) OH
(3) (4) OH
(5) OH
OAc
O
OH OH
H H H H H
(6) (7) (8) (9) (10)
(A) (B)
(C) (C)
[Link] poligodial en etanol contra saprolegnia parasitica. 1) control AcOEt.(2-6) Poligodial
25, 20,15, 10 y 5 µL a concentración 50mg/mL. B) Ensayo poligodial en Pluronic F-68 Contra
saprolegnia parasitica 1) Control Pluronic F-68.(2-5) 25, 20,15, 10 µL poligodial Pluronic 1mg/mL
C) Ensayo de inclusión de poligodial 10 mg/mL en agar saburaud n= 3.D) Ensayo de inclusión de
drimenol 25 mg/mL en agar saburaud n= 3.
Poligodial v/s bronopol
48hrs 96 hrs.
(A) (B)
Ensayo poligodial versus bronopol A) Inhibición a 48hrs. B)
Inhibición a 96hrs. R = resistente. S= sensible.
(A) (B)
(A) Ensayo poligodial en micela pluronic F-127 0.03mg/mL
contra cepa 113 de Saprolegnia parasitica c) control (1-5) 25,
20,15, 10, 5 µL (B) Ejemplo de ensayo con productos
naturales (Drimenol)25mg/ml. Placa de elisa con distintas
cepas de Saprolegnia fijadas ara determinar CIMs
Ensayo de Viabilidad
72 horas
Células de Cáncer Extractos
Control –
Cultivar 24 h DMSO 0,1%
Poligodial Fijar con TCA 10%
Drimenol
Confertifolina
Teñir con SRB 0,1%
Lavar con AA 1%
TRIS/
BASE
Resultado Leer Absorbancia
s 540nm
Actividad citotóxica de los compuestos 1 y 74 .
DU PC-3 CT MCF7 MDA CT HT-29 DHF CT
CHO
CHO >100 >100
IC50 71.4 >100 >100 >100 0.19 14.3
1
H
0,06
DST ± 6,2 - -- - 0,01
DU PC-3 CT MCF7 MDA CT HT-29 DHF CT
O O
CHO
74 IC50 >100 >100 14,3
70.6 65.4 >100 >100 0.19
H
DST 7.4 6.2 - - - 0.01 0,06
Evaluación de citotoxicidad de poligodial en copolímeros: C1 (poligodial en DMSO) como control; C2
(poligodial en Pluronic F-68 (inyección)); C3 (poligodial en Pluronic F-68 (ultrasonido) y C4 (poligodial
Pluronic F-127 (ultrasonido)) sobre línea celular DU-145. Se realizaron 4 ensayos por cada línea celular y
cada concentración se evaluó por cuadruplicado. Los resultados se expresan como promedio +/-
coeficiente de variación.
Evaluación de citotoxicidad de poligodial en copolímeros: C1 (poligodial en DMSO) como control; C2
(poligodial en Pluronic F-68 (inyección)); C3 (poligodial en Pluronic F-68 (ultrasonido) y C4 (poligodial
Pluronic F-127 (ultrasonido)) sobre línea celular PC-3 . Se realizó 4 ensayos por cada línea celular y cada
concentración se evaluó por cuadruplicado. Los resultados se expresan como promedio +/- coeficiente de
variación.
Actividad citotóxica de Poligodial en copolímeros F-68 y F-127 contra dos líneas de cáncer de mama,
MCF-7 y MDA-MB231 y dos líneas de cáncer de próstata DU-145,PC-3
Compuesto Líneas prostáticas Líneas mamarias Fibroblastos humanos
IC50 μM IC50 μM IC50 μM
Nº Estructura IC50 μM DU PC-3 MCF- MDA CT DHF CT
7
CHO
0,19
CHO DMSO 71.4±6,2 >100 70 >100 >100 14,3±0,06
±0,01
H F-68(i) 60±2,8 70±5,6 >100 >100 0,19 ±0,01 >100 14,3±0,06
1
F-68(s) 50±4,2 55±3,4 55±3,4 50±3,4 0,19 ±0,01 60±2,9 14,3±0,06
F-127(s) 58±4,4 55±3,4 55±3,4 60±4,7 0,19 ±0,01 65±3,8 14,3±0,06
Antifeedant
Ensayos de elección
Tabla de actividad antifeedant de compuestos drimánicos
Compuesto E. paenulata S. frugiperda
1 *93,23 *98,88
2 33,03 *87,74
3 *81,67 68,60
4 *100 *89,08
5 63,63 *82,02
6 66,89 47,95
7 *74,44 *79,58
8 -144,74 26,47
9 *80,31 43,62
10 *100 *85,71
11 *100 *93,94
12 *100 *93,94
13 *76,42 *74,24
14 -36,17 69,14
15 26,72 0
16 60,87 26,22
17 -4,52 0
18 0 0
azaradichtin *100 *100
AI (%) = antifeedant index; AI = [(C−T)/(C+T)] × 100
Tabla de EC50 Compuestos drimánicos (nmol/cm2)
Compuesto S. frugiperda
E. paenulata (nmol/cm2)
(nmol/cm2)
1 133,1 23,84
2 >250 124
3 142 175
4 59 25,63
5 104,1 104,1
6 105,7 >250
7 83,99 182,7
8 > 250 > 250
9 83,99 > 250
10 64,57 ND
11 50,5 23,28
12 ND 54,24
13 104,1 142,6
14 > 250 160,1
15 > 250 > 250
16 > 250 > 250
17 > 250 > 250
18 > 250 > 250
Azaradichtin 0,819 0,138
Agradecimientos
Dr. Joan Villena Universidad de Valparaíso
Dr. Luis Espinoza Universidad Federico Santa Maria
Dr. Cristian Salas Pontificia Universidad Católica de Chile
Dra. Susana Zacchino. Universidad Nacional de Rosario (Argentina)
Dr. Enrique Werner. Universidad del Bio-bio
Dra. Sara Palacios Universidad católica de Córdoba
CorfoInnova
Dirección de Investigación UV