BACILOSCOPIA
La Baciloscopia es la búsqueda microscópica
de bacilos ácido alcohol resistentes (baar)
mediante la coloración de Ziehl Neelsen en
cualquier espécimen clínico.
BIOSEGURIDAD
• Instruir al paciente de cubrir su boca cuando tosa.
• Nunca recolecte la muestra de esputo en el laboratorio.
• Recolecte la muestra de esputo en lugares aislados y bien ventilados.
• La mejor muestra es la que viene de los pulmones.
• La saliva o secreciones nasales no son muestras adecuadas.
• Las muestras no deben contener alimentos u otras partículas que pueden
interferir en el resultado.
• TOMA DE MUESTRA DE ESPUTO:
RECIPIENTE:
Capacidad para 30 - 50 ml
Material claro o transparente
De un solo uso
Material plástico
Tapa rosca y boca ancha
NÚMERO DE MUESTRAS Y MOMENTO DE LA RECOLECCIÓN:
Se recomiendan la obtención de 2-3 muestras por SR, y lo ideal es que se debe
recolectar 1-4ml de esputo en cada toma.
• La primera muestra: tomada en el momento de la consulta (muestra inmediata).
• La segunda muestra: la debe recolectar el paciente en su casa por la mañana al
despertar.
• La tercera muestra: puede ser tomada en el servicio de salud, cuando el paciente
concurre a entregar la segunda muestra o también puede ser recolectada por el
paciente en su casa por la mañana al despertar.
OBTENCIÓN DE UNA BUENA MUESTRA:
1. Lave su boca con agua limpia para eliminar alimentos y otras partículas.
2. Inhale profundamente 2 o 3 veces y exhale fuertemente cada vez.
3. Tosa profundamente para producir el esputo.
4. Coloque el recipiente de la muestra cerca a su boca para recolectar la
muestra, evite la contaminación fuera del recipiente.
5. Posterior a la toma de muestra, lave sus manos.
PROCEDIMIENTO BACILOSCOPIA
• Lavarse las manos y colocarse los elementos de protección personal. (tapabocas
N95)
• Colocar el material necesario para el montaje
• Colocamos las muestras en el orden en que aparecen en el registro diario (no
maniobrar más de 6 muestras a la vez)
• Trazamos una línea en la lámina que divida el primer tercio para la identificación y los
dos últimos tercios para el extendido de la muestra
• Seleccionar la partícula mas purulenta
• Extender homogéneamente con baja lenguas suficiente cantidad de la partícula útil,
sin exceso, en un pequeño ovalo centrado en el portaobjetos (2 cm x 1 cm)
• Si la muestra es saliva se debe hace el extendido de la misma forma, se
deja secar y se repite dos veces más el extendido sobre los anteriores.
• Dejamos secar al aire.
• Una vez seco el extendido lo fijamos pasándolo rápidamente sobre la
llama del mechero, este paso lo repetimos en 3 oportunidades.
• Procedemos a colorear los extendidos por el método de Ziehl Neelsen.
COLORACION DE ZIELH NEELSEN
Es una tinción diferencial utilizada para la identificación de bacterias acido-alcohol
resistentes (BAAR) como M. tuberculosis.
FUNDAMENTO:
Las paredes celulares de ciertas bacterias contienen ácidos grasos (ácidos micólicos)
de cadena larga que les confieren la propiedad de resistir la decoloración con alcohol-
ácido, después de la tinción con colorantes básicos. Por esto se denominan ácido-
alcohol resistentes.
• La fucsina fenicada tiñen de rojo todos los microorganismos que se encuentran en el
esputo.
• La mezcla ácida decolora todos los microorganismos y elementos celulares, excepto
los bacilos ácido alcohol resistente.
• El azul de metileno tiñe de azul todos los microorganismos y elementos decolorados,
pero los bacilos ácido alcohol resistentes se conservan de color rojo.
PROCESO:
[Link] la lámina con fucsina fenicada, calentamos hasta la emisión de
vapores durante 5 minutos, sin llegar al punto de ebullición.
[Link] con abundante agua.
[Link] con el alcohol ácido hasta decolorar (1 minuto).
[Link] con agua.
[Link] con azul de metileno y lo dejamos 30 segundos a 1 minuto.
[Link] con agua y dejamos secar.
LECTURA E INTERPRETACIÓN
Observamos la lámina con objetivo de 100X
Los bacilos tuberculosos son de color rojo fuerte, que se destacan sobre un
fondo azul, son de forma recta o ligeramente curva y se disponen en
grupos.
REPORTE:
RECOMENDACIONES:
EN CASO DE HALLAZGOS DE MENOS DE 9 BAAR:
• Debido a que pueden ser artefactos de coloración, se debe ampliar la lectura a 200 campos.
• Si con esa lectura no se encuentran más bacilos, hacer otro extendido de la misma muestra,
tratando de elegir partículas purulentas.
• Si la lectura del segundo extendido no modifica el resultado del anterior la muestra debe
informarse con el número exacto de bacilos observados y solicitar una nueva muestra
AL REALIZAR LA LECTURA SE DEBE TENER EN CUENTA:
• Descartar y volver a preparar frotis que por accidente se hayan superpuesto o resulten mal
coloreados
• Limpiar el lente del microscopio con alcohol al 70% luego de leer cada lámina
• Dedicar 10 minutos a la lectura de cada lámina, en especial cuando es negativa
• Cuantificar bacilos en el extendido utilizando la escala semicuantitativa
• Encaminar para cultivo las muestras de los casos que lo requieran
GRACIAS
