INSTITUTO POLITENICO NACIONAL
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS
«SEPARACIÓN DE FOSFOLÍPIDOS POR CROMATOGRAFÍA EN
CAPA FINA»
ALUMNAS: DIAZ LOPEZ MARIA DEL ROCIO, SANCHEZ PEREZ
PATRICIA.
GRUPO: 4QM1 SECCIÓN: 1
INTRODUCCIÓN
Los fosfolípidos, son lípidos anfipáticos, que se • Extracto lipídico de huevo pato.
1.5 cm
encuentran en todas las membranas celulares de Rf1 = = 0.2542 Rf2 = 0.3728
5.9 cm
plantas y animales, disponiéndose como bicapas Rf3 = 0.4915 Rf4 = 0.6440
lipídicas. Pertenecen al grupo de lípidos
derivados del glicerol, presentando una estructura
similar a la de los triglicéridos (TGs). En este
Placa no. 2
sentido, los fosfolípidos están compuestos por
Revelador: reactivo de bismuto.
una molécula de glicerol a la que se unen 2
Solvente: cloroformo-metanol-
ácidos grasos en las posiciones sn-1 y sn-2,
ácido-acético-agua (68:25:8:4)
estos ácidos grasos pueden presentar distinto
Se observan 3 manchas para los
largo de cadena hidrocarbonada, y variar en el
dos extractos de lípidos (gallina
grado de insaturación según su procedencia. Sin
y pato).
embargo, se diferencian de los TGs ya que en la
posición sn-3 está ligada una molécula de ácido
ortofosfórico, en lugar de un tercer ácido graso.
Cálculos
OBJETIVOS • Extracto lipídico de huevo de gallina.
• Aplicar la técnica de cromatografía en capa Rf1 =
0.9 cm
= 0.15 Rf2 = 0.26
6.0 cm
fina para la separación de los fosfolípidos de
Rf3 = 0.50
yema de huevo.
• Extracto lipídico de huevo pato.
• Discutir las ventajas de la técnica de 1.0 cm
separación respecto a la cromatografía. Rf1 = = 0.16 Rf2 = 0.23
5.9 cm
Rf3 = 0.46
RESULTADOS
Placa no. 1
Revelador: reactivo de Placa no. 3
molibdato. Revelador: reactivo de
Solvente: cloroformo- ninhidrina.
metanol-ácido-acético-agua Solvente: cloroformo-metanol-
(68:25:8:4) ácido-acético-agua (68:25:8:4)
Se observan 3 manchas del Se observan 7 manchas para
extracto de lípidos de huevo los dos extractos lipídicos
de gallina y 4 de extracto de (gallina y pato).
huevo de pato.
Cálculos
• Extracto lipídico de huevo de gallina. Cálculos
2.5 cm
Rf1 = = 0.4237 Rf2 = 0.5084 • Extracto lipídico de huevo de gallina.
5.9 cm
0.1 cm
Rf1 = = 0.017 Rf2 = 0.0517 Rf3 = 0.0862
5.8 cm
Rf3 = 0.7118 Rf4 = 0.2068 Rf5 = 0.2931 Rf6 = 0.4482
Rf7 = 0.7586
• Extracto lipídico de huevo de pato. Se observa en la imagen de la cromatoplaca que
0.1 cm
Rf1 = = 0.017 Rf2 = 0.0517 Rf3 = 0.1034 el extracto de yema de huevo de pato tiene mas
5.8 cm
fosfatidil colina y lisofosfatidil colina que el de
Rf4 = 0.1896 Rf5 = 0.2586 Rf6 = 0.4137
gallina por el color y el tamaño de la mancha .
Rf7 = 0.7068
En la cromatoplaca no. 3, revelamos con reactivo
Placa no. 4 de ninhidrina que nos indica la presencia de
Revelador: cristales de yodo. fosfolípidos Con grupos amino libre como la
Solvente: cloroformo-metanol- fosfatidil serina y la fosfatidil etanolamina.
ácido-acético-agua (68:25:8:4) Con grupos amino. En nuestra cromatoplaca
Se observan 4 manchas para evidenciamos fosfatidil serina, fosfatidil colina,
el extracto lipídico de gallina y fosfatidil etanolamina y esfingomielina pues los Rf
5 para el extracto lipídico de coincidían con los reportados. Se puede notar que
pato. el extracto de yema de huevo de gallina tenia
menor concentración de estos fosfolípidos pues
se observan manchas más grandes.
En la cromatoplaca no. 4 utilizamos como
• Extracto lipídico de huevo de gallina. revelador cristales de yodo que nos evidencian
3.1 cm lípidos con dobles enlaces. Los resultado
Rf1 = = 0.6071 Rf2 = 0.5535 Rf3 = 0.7857
5.6 cm obtenidos nos indican la presencia de lípidos
Rf4 = 0.9642 neutros (Rf =1), fosfatidil colina, fosfatidil serina y
• Extracto lipídico de huevo de pato. fosfatidil etanolamina, esto coincide pues son
2.2 cm
Rf1 = = 0.3928 Rf2 = 0.4821 Rf3 = 0.5714 lípidos que si tienen dobles enlaces en su
5.6 cm
Rf4 = 0.6785 Rf5 = 0.9107 molécula. Se observa que el extracto de yema de
pato fue la que tenía mayor concentración de
DISCUSIONES todos los lípidos encontrados.
En esta practica pudimos determinar el tipo de
fosfolípidos que se encuentran en la yema de huevo
de gallina y de pato mediante una cromatografía en
capa fina.
Para la cromatoplaca no. 1 utilizamos como
revelador reactivo de molibdato que nos indica la
presencia de fosfolípidos en general. Con base a los
resultados, se observa que ambos extractos tienen
Rf similares en 3 manchas, lo cual nos hace pensar
que tienen fosfolípidos iguales que de acuerdo a los
Rf reportados, son fosfatidil etanolamina (Rf=0.71) y
fosfatidil colina o fosfatidil serina (Rf=0.33). Para el CONCLUSIONES
caso de la yema de pato se observo una mancha • Mediante una cromatografía en capa
mas que de acuerdo al Rf seria esfingomielina fina se logró separar los fosfolípidos de
(Rf=0.26). A pesar de que en la yema de huevo de la yema de huevo.
gallina no obtuvimos esfingomielina, si debería de • La yema de huevo de gallina tanto la
haber pero posiblemente no lo pudimos observar de pato contienen distintos tipos de
porque la cantidad que tiene es poca a comparación fosfolípidos.
con la yema de huevo de pato.
REFERENCIAS:
En la cromatoplaca no. 2 revelamos con reactivo de • Torres, G.J. & Durán, A.S. (2015)
bismuto que indica la presencia de fosfolípidos que Fosfolípidos: propiedades y efectos
contienen colina. Los resultados obtenidos nos sobre la salud. Consultado el 19
indican que ambos extractos tiene Rf similares que, Octubre 2019 en:
basándonos en los Rf teóricos, los fosfolípidos que [Link]
se encuentran son esfingomielina, fosfatidil colina y pdf
lisofosfatidil colina (Rf=0.17).
