Coliformes
Coliformes: Son un grupo de especies bacterianas que tienen ciertas
características bioquímicas en común y que colonizan el intestino.
Agrupa a todas las enterobacterias:
Escherichia
Salmonella
Shigella
Klebsiella
Enterobacter
Citrobacter
Yersinia
Serratia
Proteus
Características generales del grupo:
Bacilos Gram (-).
Su tamaño oscila entre 0.5 y 2.0 µm de ancho y de 2.0 a 4.0 µm
de largo.
Bordes rectos y extremos curvos.
Temperatura óptima de crecimiento: 37°C.
Aerobias o anaerobias facultativas.
Móviles o inmóviles
Poseen o no capsula.
Fermentan o no la lactosa.
Salmonella
Clasificación:
Subgrupo 1 Subgrupo 2 Subgrupo 3 Subgrupo 4 Subgrupo 5 Subgrupo 6
• S. typhi • S. salamae •[Link] • S. houtenae • S. bongori S. indica
• S. choleraesuis • S. diarizonae
• S. paratyphi
• S. gallinarum
• S. pullorum
CARACTERÍSTICAS DEL GÉNERO:
Bacilos Gram (-).
Anaerobios facultativos.
Flagelos periticos.
No posee cápsula
No forma esporas
Móviles.
Producen H2S.
Glucosa (+).
Lactosa (-)
MORFOLOGÍA COLONIAL
Colonias transparentes
MacConkey EMB
Salmonella-Shigella Agar Hektoen Enteric Agar
Colonias transparentes Colonias azul-verdosas
con centro negro con centro negro de H2S.
XLD Medium Agar sulfito de bismuto
Colonias rojas con Colonias negras con
centro negro (H2S). brillo metálico.
PRUEBAS BIOQUÍMICAS
GENERO KIA GAS H2S IND CIT MOV LIS ARG ORN URE
Salmonella K/A
+ + - + + + +/- + -
Shigella
Clasificación:
Serogrupo A Serogrupo B Serogrupo C Serogrupo D
• S. dysenteriae • S. flexneri •S. boydii • S. sonnei
CARACTERÍSTICAS DEL GÉNERO:
Bacilos Gram (-)
No forma esporas
Inmóviles
Aerobios-anaerobios facultativos.
Citocromo-oxidasa negativos.
Fermentan la glucosa sin producción de gas.
No decarboxilan la lisina.
No fermentan la lactosa.
No utilizan el citrato como única fuente de carbono.
MORFOLOGÍA COLONIAL
Colonias transparentes
Agar Hektoen entérico
Agar Salmonella-Shigella
Colonias verdosas y Colonias transparentes sin
pálidas en la periferia ennegrecimiento, traslúcidas u
opacas y lisas
XLD Medium
Colonias rojas transparentes
PRUEBAS BIOQUÍMICAS
GENERO KIA GAS H2S IND CIT MOV LIS ARG ORN URE
Shigella K/A - - -/+ - - - - - -
Grupos
A,B y C.
S. sonnei K/A - - - - - - - + -
Klebsiella
Clasificación:
ESPECIES
K. oxytoca K. ornithinolytica K. planticola K. pneumoniae K. terrigena
Subespecies:
K. ozanae
K. rhinoscleromatis
CARACTERÍSTICAS DEL GÉNERO:
Bacilos Gram (-)
Inmóviles
Anaerobios facultativos.
Fermentadora fuerte de lactosa
Fermenta la glucosa
Poseen una prominente cápsula de polisacáridos
Descarboxilan la lisina
No decarboxilan la ornitina (excepto K. ornithinolytica)
Hidrolizan lentamente la urea
Utilizan el citrato como fuente de carbono
MORFOLOGÍA COLONIAL
MacConkey:Colonias grandes EMB:Colonias grandes color
mucoides de color rosa fuerte púrpura, aspecto mucoide, sin
brilo metálico.
XLD: Colonias amarillo
brillante por fermentación
de más de un carbohidrato.
PRUEBAS BIOQUÍMICAS
GENERO KIA GAS H2S IND CIT MOV LIS ARG ORN URE
K. A/A ++ - - + - + - - +
pneumoniae
K. oxytoca A/A ++ - + + - + - - +
Enterobacter
Clasificación:
ESPECIES Y SUBESPECIES
E. aerogenes E. cancerogenus E. cloacae E. gergoviae E. dissolvens
E. amnigenus E. sakazakii E. hormaechei E. intermedius
E. asburiae E. pyrinus
CARACTERÍSTICAS DEL GÉNERO:
Bacilos Gram (-)
Movilidad por flagelos
Anaerobios facultativos.
Fermentadora de lactosa
Fermenta la glucosa
Decarboxilan la ornitina
Indol negativo
Utilizan el citrato como fuente de carbono.
MORFOLOGÍA COLONIAL
E. Aerogenes y E. coli K. pneumoniae y E. coli
EMB
E. Aerogenes K. pneumoniae
XLD: E. aerogenes. Colonias
amarillas de 2-5 mm,
brillantes y prominentes.
PRUEBAS BIOQUÍMICAS
GENERO KIA GAS H2S IND CIT MOV LIS ARG ORN URE
E. A/A ++ - + + + + - + -
Aerogenes
E. cloacae A/A ++ - + + + - + + -/+
Serratia
Clasificación:
ESPECIES Y SUBESPECIES
S. entomophila Gpo: S. liquefaciens S. marcescens S. plymuthica S. rubidaea
S. ficaria S. grimesii
S. Fonticola S. proteamaculans
CARACTERÍSTICAS DEL GÉNERO:
Bacilos Gram (-)
Movilidad por flagelos
Anaerobios facultativos.
Productora de Dnasa, lipasa y gelatinasa
Algunas cepas son productoras de pigmento rojo (S. marcescens).
Resistentes a la cefalotina y colistina.
No fermenta la lactosa.
Fermenta la glucosa.
Productora de gas.
XLD: colonias pequeñas
de borde entero con
pigmentación roja y
halo amarillo.
Brillantes.
Serratia marcescens
Neisseria gonorrhoeae
CUADRO CLÍNICO
Agente causal de la gonorrea
Hombre: uretritis; secreción purulenta , prurito y micción dolorosa.
Mujer: endocervicitis; disuria, leucorrea, prurito genital y dolor
abdominal.
Infecciones no tratadas: bacteriemia gonocóccica; lesiones cutáneas:
pápulas o pústulas hemorrágicas.
Oftalmia neonatal gonocóccica.
Diagnostico en el
laboratorio
Identificación en medios de cultivo
Exigente a nivel nutricional.
Medios selectivos enriquecidos:
Thayer Martin modificado: vancomicina (3 µg/ml), colistina (7,5
µg/ml),nistatina (12,5 µg/ml) y lactato de trimetropim (5 µg/ml) .
New York City.
Agar Mueller Hinton modificado.
Agar Martin Lewis.
Medios enriquecidos:
Gelosa chocolate.
Se caracteriza por ser de difícil cultivo.
Se incuban a 35 °C durante 24- 48 horas.
Atmósfera húmeda con 5% de CO2.
pH: 7.2 – 7.6.
Sensibles a las desecación, luz UV, cambio de temperatura y pH.
Morfología colonial
Colonias pequeñas
Elevadas
Convexas
Brillantes
Aspecto mucoide
Cremosas
Bordes enteros
Color blanco grisáceo
Tamaño de 0.5 a1 mm.
Cultivos clínicos o subcultivos selectivos: T1 y T2: colonias brillantes
y pequeñas (0.5mm). Poseen pili.
Subcultivos no selectivos: T3, T4 y T5: colonias grandes( 1.0 – 1.2
mm), planas y casi incoloras y opacas(no poseen pili).
Morfología microscópica.
Diplococos.
Gram (-).
Lados adyacentes planos .
Tamaño (0.6 – 1 µm) de diámetro.
Dispuestos aisladamente con apariencia de riñón o granos de café.
Tétradas (colonias jóvenes).
Intracelulares (PMN NØ).
Carece de cápsula.
Posee pilis (factor de virulencia).
Inmóvil.
No forma esporas.
Identificación presuntiva: Prueba de la oxidasa
Prueba de oxidasa
Utiliza reactivo de Kovac (una solución al 1% (p/vol) de
N,N,N’,N’–tetrametil-p-dihidroclorofenilendiamina) para
detectar la presencia de citocromo c en la cadena
respiratoria de un microorganismo bacteriano; si el
reactivo de oxidasa es catalizado, se torna color púrpura.
• Método del hisopo.
• Método del papel de filtro humedecido.
• Método directo en placa.
Nota: Deben utilizarse en crecimientos de 24 horas.
los diplococcos gramnegativos, oxidasa positivos aislados en medios selectivos
para gonococos deben identificarse presuntivamente como N. gonorrhoeae.
Pruebas suplementaria enzima-substrato: Prueba de la catalasa
Las cepas de N. gonorrhoeae tienen
una reacción típica muy fuerte
(4+),“explosiva” al contacto con el
reactivo superoxol.
Pruebas suplementarias bioquímicas
Reacción de azúcares en agar cistina tripticasa para la producción de ácido
de los carbohidratos por aislamientos de Neisseria gonorrhoeae.
Chlamydia trachomatis
Espectro clínico
Generalidades
Carecen de mecanismos para la producción de energía (ATP).
Bacterias intracelulares obligadas aerobias e inmóviles.
Poseen membrana interna y externa
Carecen de peptidoglicano.
Replicación a través de un ciclo de crecimiento único.
Poseen un cuerpo elemental de 0.2-0.4 µm (nunca se divide y es infeccioso).
Poseen un cuerpo reticulado de 0.5-1.0 µm (se multiplica al interior de la
vacuolas de la célula hospedera y no es infeccioso).
La replicación intracitoplasmática produce la formación de inclusiones
compactas con una matriz de glucógeno en las cuales están incluidos los cuerpos
elementales (cuerpos de inclusión).
Ciclo de desarrollo
DIAGNÓSTICO EN EL
LABORATORIO
DETECCIÓN DIRECTA DE LAS MUESTRAS:
Los cuerpos de inclusión de C. trachomatis contienen glucógeno, que se tiñen con
yodo y Giemsa, después de incubar 48 a 72 h, los cubreobjetos se extraen y se tiñen.
Las inclusiones se localizan dentro del citoplasma de las células epiteliales, a
menudo su ubicación es perinuclear.
Se requiere de microscopia especializada en las células epiteliales del raspado
conjuntival teñido con anticuerpos fluorescentes o Giemsa. Sensible para el
diagnóstico de infecciones oculares en recién nacidos y en uretritis.
EL CULTIVO
Es el método más sensible considerado como la prueba de oro para el diagnóstico de
infecciones causadas por C. trachomatis, del tracto genital. Sensibilidad de 70-85%.
Muestras uretrales de hombres y mujeres asintomáticas, las nasofaríngeas, rectales,
vaginales.
Las líneas celulares más utilizadas son las células McCoy (fibroblastos de ratón),
HeLa 299 (carcinoma humano), las BHK-21 (células de ovario de hámster) y
recientemente las células BGMK. Inoculación en el saco vitelino de huevos de pollos
embrionados de 6-8 días de edad.
El cultivo se propaga en una monocapa sobre un cubreobjetos inoculado con las
muestras.
Si hay suficiente número de cuerpos elementales de clamidias ellos infectarán las
células y crecerán en forma de inclusiones citoplásmicas, luego de ser infectadas, las
inclusiones pueden observarse después de 48-72 h de incubación y teñidas con
anticuerpos marcados con fluoresceína.
La observación directa de las inclusiones que posee una morfología distintiva
contribuye al 100% de especificidad.
