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Técnicas de Tinción en Microbiología

Este documento describe diferentes técnicas de tinción para bacterias, incluyendo tinción de Gram, tinción acidorresistente, tinción negativa de flagelos, tinción de cápsula y esporas. Las tinciones permiten visualizar estructuras bacterianas bajo el microscopio al combinarse químicamente con componentes celulares.

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Este documento describe diferentes técnicas de tinción para bacterias, incluyendo tinción de Gram, tinción acidorresistente, tinción negativa de flagelos, tinción de cápsula y esporas. Las tinciones permiten visualizar estructuras bacterianas bajo el microscopio al combinarse químicamente con componentes celulares.

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TINCIONES

Josué Rodríguez Longoria


• Se combinan químicamente con el
protoplasma bacteriano
(matan a la célula)

• La mas usuales son sales

• Tinciones básicas: catión coloreado +


anión incoloro (ej. Cloruro–
de azul de metileno +)

• Tinciones acidas: (ej. Eosinato-


de sodio +)
• Los colorantes básicos (+) tiñen a las
células bacterianas al combinarse
con sus ácidos nucleicos (-)

• Los colorantes ácidos no las tiñen,


por eso pueden usarse para colorear
el fondo con un color de contraste
Tinción de Gram
• La reacción a esta tinción, por parte de las
bacterias, se relaciona con muchas
propiedades morfológicas de estas

• Las bacterias que captan el colorante básico


son Gram (+)

• La que captan el colorante de contraste son


Gram (-)
Tinción acidorresistente
• Las bacterias acidorresistentes
captan la carbolfucsina, aun
cuando se usa decolorante

• se cubre el frotis con carbolfucsina


y se calienta en baño de vapor

• Se agrega alcohol acido


• Finalmente se aplica un colorante de
contraste (azul o verde)

• Las bacterias acidorresistentes se


tiñen de rojo:

• Micobacterias
• Actinomicetos
Tinción negativa
• Se tiñe el fondo con colorante de contraste
para dejar a las células incoloras en
contraste

• El colorante mas usado es nigrusina

• Sirve para observar bacterias o


estructuras difíciles de teñir con técnicas
directas
Tinción de Flagelos
• Se logra con una suspensión coloidal
inestable de sales de acido tanico

• Esto forma un precipitado denso en la


pared celular y los flagelos

• Con esto su diámetro aumenta y se tiñen


con fucsina básica, lo que los hace visibles
con el microscopio óptico
• En bacterias peritricas los flagelos se
agrupan en forma de manojo en
durante el movimiento y pueden ser
suficientemente gruesos para
observarse con:

• Microscopia de campo oscuro


• Contraste de fases
Tinción de la capsula
• Coloración negativa o una modificación de
esta

• Método de Welch: solución caliente


de cristal violeta

• Lavado con sol’n de sulfato de cobre (para


remover exceso de colorante). Además
imparte color al fondo
• La célula y el fondo se tiñen de color
azul oscuro

• La capsula aparece de color azul


claro
Tinción del Núcleo

• Tinción de Feulgen

• Especifica para el DNA


Tinción de las Esporas
• Se observan como cuerpos refringentes
intracelulares en suspensiones sin teñir

• O como zonas incoloras dentro de células


tenidas con métodos habituales

• La pared de la espora se puede colorear si


se calienta la preparación
• La impermeabilidad de su pared
evita la decoloración por el alcohol

• Pueden ser contrastadas

• Por lo regular se tinen con verde de


malaquita o carbolfucsina

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