TINCION DE PAPANICOLAU
INTRODUCCION
El mtodo Papanicolau para colorear extendidos cervicales es usado desde hace aproximadamente 50 aos en todo el mundo. Consiste en el uso de un colorante nuclear (hematoxilina) y colorantes citoplasmticos que compiten entre si permitiendo una tincin policomatica.
Es el mtodo de tincin mas utilizado para material citolgico. La coloracin de Papanicolaou es la tcnica por excelencia de la citologa general como la hematoxilina eosina lo es para el mtodo histolgico
Tincin Papanicolaou
Tincin de rutina elaborada por el Dr. Georges Papanicolaou, tienen un valor prctico en la diferenciacin celular tanto citoplasmtica como nuclear y sus modificaciones. Para este mtodo se necesitan 3 soluciones especificas: Hematoxilina de Harris Orange 6 (OG6) Eosina Azur 36, 50 65 (EA-50)
Para la Coloracin de Papanicolaou es necesario que los preparados sean previamente fijados en alcohol 96.
La coloracin de Papanicolaou es un mtodo basado en la diferenciacin de color de los diversos componentes celulares, se aplica a los diversos tipos celulares para el diagnstico de cambios malignos y la tipificacin celular. Los ncleos son coloreados con la Hematoxilina de Harris (coloracin bsica), el citoplasma con un colorante de naturaleza alcohlica y policromtica: coloracin de Eosina (coloracin cida); y la queratina citoplasmtica, cuando est presente, se colorea con Orange G.
Colorante de Hematoxilina a. Hematoxilina b. Oxido de Mercurio (amarillo) c. Sulfato doble de Aluminio (Amonio) y Potasio d. Alcohol corriente al 96% e. Agua destilada
Colorante. Elementos celulares. Hematoxilina de Harris. Afinidad por la cromat [Link] el ncleo. OG 6 Tie la [Link] rpidamente al citoplasma. EA 50 Tie el citoplasma de las clulasescamos as cianoflasy [Link] y cilios.
Colorante Orange G 6 - Cristales de Orange G 6 13 INSTITUTO NACIONAL DE SALUD - Acido Fosfotngstico - Alcohol corriente al 96% - Agua destilada
Colorante EA 36 - Eosina amarilla - Marrn Bismark - Verde Claro S.F. - Carbonato de Litio - Acido Fosfotngstico - Alcohol corriente al 96% - Agua destilada
Colorante de Eosina - Eosina amarilla - Dicromato de Potasio - Acido Pcrico - Alcohol corriente al 96% - Agua destilada
RESULTADOS DE TINCION 5.7.1. Ncleos: La cromatina y la membrana nuclear toman el color azul oscuro o prpura mientras el nuclolo obtiene el color rojo, rosado o naranja. 5.7.2. Citoplasma: Adopta el color amarillo o naranja, si hay presencia de queratina. Caso contrario el color vara de verde, azul o gris.
Tincin de Papanicolaou
Hematoxilin a de Harris
Coloracin Tricrmica
Orange G
EA 50
Hematoxilina de Harris
2 soluciones Stock:
Solucin A: Hematoxilina al 10% en alcohol.
Solucin B: Alumbre de potasio al 10% en agua destilada.
+ xido de mercurio
Orange G
Colorante cido debido a la presencia de grupos sulfnicos Bajo peso molecular Tie:
Clulas maduras Clulas con hiperqueratosis
Los citoplasmas sin queratina no retienen el colorante.
EA 50
Compuesto por:
Eosina Verde Luz Pardo bismarck
Tie de rosado (eosinfilas) las estructuras ms diferenciadas de los citoplasmas. Las menos diferenciadas son teidas con el verde luz, desplazando a la eosina y quedando teidas de color azul ( basfilas).
Muestra citolgica cervicouterina. Tincin Papanicolaou observada con un aumento de 4x.
Muestra citolgica cervicouterina. Tincin Papanicolaou observada con un aumento de 10x
