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SEDE ORELLANA
INFORME DE LABORATORIO,
TALLERES Y CENTROS DE
SIMULACIÓN DE LA CARRERA
FACULTAD DE CIENCIAS
CARRERA INGENIERÍA AMBIENTAL
INTEGRANTES
CONDO CHIMBORAZO SAIRA ALEXANDRA
MIRANDA VILLACRES JENNIFER TATIANA
SANCHEZ VERGARA MONICA JOSSELIN
TENELEMA MULLO ALICIA NANCY
Fecha de realización: 02/12/2025
Fecha de entrega de informe: 27/12/2025
Periodo Académico
Septiembre 2025 – Febrero 2026
Orellana-Ecuador
Teléfono: 593 (03) 2998-
Gaspar de Carvajal, entre Quito y
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Napo
Extensión: 3601
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PRÁCTICA No. 03
1. TEMA: CARACTERIZACIÓN DE PARÁMETROS MICROBIOLÓGICOS DEL
AGUA
2. OBJETIVOS
2.1. Objetivo General
Evaluar la calidad microbiológica del agua mediante la determinación de coliformes totales
aplicando técnicas microbiológicas estandarizadas con el fin de verificar su potabilidad y el
cumplimiento de la normativa sanitaria vigente
2.2. Objetivos Específicos
Identificar la presencia de coliformes totales en muestras de agua mediante el uso de
técnicas microbiológicas estandarizadas, como el método de filtración por membrana.
Determinar la concentración de coliformes en las muestras de agua a través de
condiciones controladas de incubación y el empleo de medios de cultivo selectivos.
Comparar los resultados obtenidos con los límites establecidos en el libro 6 anexo 1
para evaluar y el nivel de contaminación microbiológica del agua.
3. INSTRUCCIONES
3.1. Materiales
Vidriería estéril (frascos, tubos, placas)
Filtros de membrana
Pinzas esterilizadas, mechero Bunsen
Medio m-Endo agar LES
Papel filtro
3.2. Reactivos
Agua peptonada o buffer fosfato estéril
3.3. Equipo
Estufa de incubación
Autoclave
Lámpara UV o cabina de flujo laminar
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4. PROCEDIMIENTO
DETERMINACIÓN DE COLIFORMES TOTALES
• Esterilizar el equipo de 2 • Preparar una dilucion de
la muestra para evitar
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filtración, incluyendo crecimiento bacteriano
embudo, base, pinzas y • Montar el sistema de excesivo, mezclando 1ml • Colocar cuidadosamente
membranas, con el fin de filtración por membrana de la muestra con 100 ml la membrana filtrante
evitar contaminación de en condiciones asépticas, de agua destilada, y filtrar sobre el medio de cultivo
la muestra. asegurando un correcto a traves de una membrana agar m-Endo LES,
ensamblaje del equipo. de 0.45 µm. evitando la formación de
burbujas.
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6 • Incubar las placas a una
temperatura de 35 °C
• Observar el crecimiento durante un período de 24
bacteriano y cuantificar horas.
las colonias de color rojo
características de los
coliformes totales.
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5. RESULTADOS
La muestra de agua fue recolectada de un río y analizada mediante el método de filtración por
membrana, filtrando un volumen de 100 ml, utilizando el medio de cultivo m-Endo agar LES
e incubada bajo condiciones controladas.
Luego del periodo de incubación, se evidenció crecimiento de colonias bacterianas sobre la
membrana filtrante. Las colonias presentaron coloración rosada a rojiza, con morfología
variable (circulares e irregulares), características propias de coliformes totales.
El conteo de colonias se realizó mediante observación directa y recuento manual,
contabilizando todas las colonias visibles en la membrana filtrante. Se obtuvo un total de 110
colonias, resultado que fue expresado como 110 UFC/100 ml, considerando que el volumen
filtrado fue de 100 ml.
Tabla 1. Resultados del análisis de coliformes totales
Parámetro Volumen Resultado Limite Cumple/ no
analizado filtrado (ml) (UFC/100ml) TULSMA cumple
Coliformes totales 100 110 3000 Si cumple
En la Tabla 1 se observa que la concentración de coliformes totales obtenida en la muestra de
agua de río fue de 110 UFC/100 ml, valor que se encuentra muy por debajo del límite máximo
permisible de 3000 NMP/100 ml establecido por el TULSMA para cuerpos de agua
superficiales.
Estos resultados indican que, aunque existe presencia de coliformes totales, lo cual evidencia
contaminación microbiológica, el nivel registrado no supera los límites ambientales permitidos.
La presencia de coliformes totales en aguas de río puede estar asociada a aportes naturales,
escorrentía superficial o actividades antrópicas, por lo que se recomienda mantener un
monitoreo continuo para evaluar posibles variaciones en la calidad microbiológica del recurso
hídrico.
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6. CONCLUSIONES
La evaluación de la calidad microbiológica del agua permitió determinar su condición
sanitaria mediante el análisis de coliformes totales, aplicando técnicas microbiológicas
estandarizadas.
La identificación de coliformes totales mediante el método de filtración por membrana
demostró ser un procedimiento eficaz para detectar contaminación microbiológica
general en las muestras de agua evidenciando posibles aportes de materia orgánica o
contaminación ambiental.
La determinación de la concentración de coliformes permitió cuantificar
microorganismos de origen fecal, lo cual constituye un indicador directo de
contaminación y de potencial riesgo sanitario asociado al consumo de agua.
La comparación de los resultados obtenidos con los límites establecidos en el libro 6
anexo 1 permitió evaluar el grado de contaminación microbiológica en el rio,
facilitando la interpretación de los resultados y la toma de decisiones relacionadas con
la gestión y control de la calidad del recurso hídrico.
7. RECOMENDACIONES
Verificar que todo el material este completamente esterilizado antes de iniciar. Para
prevenir contaminaciones.
Manipular las membranas con pinzas estériles en un ambiente controlado y filtrar 100
Ml de muestra asegurando el vacío correcto.
Controlar la temperatura (35 °C para coliformes totales en m-Endo LES por 24 h; 44.5
°C para fecales en m-FC agar) y tiempo de incubación, contando colonias rojas o
azules solo al final en área iluminada con lupa.
Usar mandil obligatorio, guantes, esterilizar con autoclave o mechero Bunsen.
Evitar tocar la superficie de la membrana una vez colocada y revisar placas solo al
finalizar la incubación para prevenir contaminaciones secundarias.
Reportar irregularidades al docente inmediatamente y mantener la zona limpia.
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8. ANEXOS
e
C
a
NOTAS: CATEGORIA DEL DIAGRAMA: OBSERVACION DE PARÁMETROS MICROBIOLÓGICOS
a. Materiales y reactivos DEL AGUA
b. Esterilizar el equipo ESPOCH SEDE
c. Incubar los coliformes totales y Aprobado Preliminar
ORELLANA
coliformes fecales Certificado Por aprobar LÁMINA ESCALA FECHA
d. Colocar las membranas
Información Por calificar CARRERA DE ING. AMBIENTAL
e. Colonias rojas y azules
f. Registro de asistencia 1 1:1 2025/12/02
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9. BIBLIOGRAFÍA
PRESIDENCIA DE LA REPÚBLICA DEL ECUADOR. Norma de calidad ambiental y de
descarga de efluentes al recurso agua. Anexo 1 del Libro VI del Texto Unificado de
Legislación Secundaria del Ministerio del Ambiente (TULSMA). Registro Oficial (Edición
Especial). Quito, Ecuador. Disponible en: [Link]
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