Cátedra de Química Medicinal. Carrera de Farmacia. Año 2025.
TRABAJO PRÁCTICO N° 11
ENSAYO CUALITATIVO DE UN AINES
Objetivos:
• Conocer y aplicar la técnica de Cromatografía en capa delgada, sus
características y los factores que en ella intervienen.
• Calcular los valores de Rf de las sustancias en cuestión analizando la relación
teniendo en cuenta la polaridad de las sustancias y eluyentes.
• Aplicar la técnica como criterio de pureza e identificación de las sustancias.
Introducción:
La cromatografía en capa fina o delgada (en inglés thin layer chromatography o TLC) es
una técnica analítica rápida y sencilla, muy utilizada en un laboratorio de Química
Orgánica. Entre otras cosas permite:
- Determinar el grado de pureza de un compuesto. Se puede determinar así, por
ejemplo, la efectividad de una etapa de purificación.
- Comparar muestras. Si dos muestras corren igual en placa podrían ser idénticas.
Si, por el contrario, corren distinto entonces no son la misma sustancia.
- Realizar el seguimiento de una reacción. Es posible estudiar cómo desaparecen
los reactivos y cómo aparecen los productos finales o, lo que es lo mismo, saber
cuándo la reacción ha acabado.
La muestra a analizar se deposita cerca de un extremo de una lámina de plástico o
aluminio que previamente ha sido recubierta de una fina capa de adsorbente (fase
estacionaria). Entonces, la lámina se coloca en una cubeta cerrada que contiene uno o
varios disolventes mezclados (eluyente o fase móvil). A medida que la mezcla de
disolventes asciende por capilaridad a través del adsorbente, se produce un reparto
diferencial de los productos presentes en la muestra entre el disolvente y el adsorbente.
Los dos adsorbentes (fase estacionaria) más ampliamente utilizados son el gel de sílice
(SiO2) y la alúmina (Al2O3), ambas de carácter polar.
El proceso de adsorción se debe a interacciones intermoleculares de tipo dipolo-dipolo
o enlaces de hidrógeno entre el soluto y el adsorbente. El adsorbente debe ser inerte
con las sustancias a analizar y no actuar como catalizador en reacciones de
descomposición. El adsorbente interacciona con las sustancias mediante interacción
dipolo-dipolo o mediante enlace de hidrógeno si lo presentan. El orden de elución de un
compuesto se incrementa al aumentar la polaridad de la fase móvil o eluyente. El
eluyente puede ser un disolvente único o dos miscibles de distinta polaridad.
Comisión 1: Solis, Wiernes, Tassiov, Martin
Cátedra de Química Medicinal. Carrera de Farmacia. Año 2025.
La relación entre las distancias recorridas por el soluto y por el eluyente desde el origen
de la placa se conoce como Rf, y tiene un valor constante para cada compuesto en unas
condiciones cromatográficas determinadas (adsorbente, disolvente, tamaño de la
cubeta, temperatura, etc.). Debido a que es prácticamente imposible reproducir
exactamente las condiciones experimentales, la comparación de una muestra con otra
debe realizarse eluyendo ambas en la misma placa. Para calcular el Rf se aplica la
siguiente expresión: Rf = distancia recorrida por el compuesto (X) / distancia recorrida
por el eluyente (Y). La distancia recorrida por el compuesto se mide desde el centro de
la mancha.
Parte Práctica:
Materiales y Reactivos
Cromatofolio Aluminio silicagel 60
Cuba
Capilares de siembra
Lámpara UV
Viales
Alcohol etílico 95%
Acetato de etilo
Ácido acético
1) Solución Patrón: Se prepara 2 ml de disolución patrón 2% (m/v) en etanol de
cada uno de los compuestos. Se guardan en vial convenientemente rotulado.
2) Muestra Problema: A partir de los productos obtenidos en el laboratorio de la
clase anterior, preparar la disolución correspondiente a los cristales obtenidos. Tener en
cuenta la concentración del punto 1.
Técnica Operatoria
1) Activar la placa a 100 -110 ͦC, durante 30 minutos (Fase estacionaria)
2) En la placa trazar una línea con lápiz a 1cm del borde inferior
3) Depositar una microgota de las soluciones, usando capilares individuales para cada
disolución
4) Preparar la Fase Móvil siguiendo la proporción acetato de etilo-ácido acético (99:1)
5) Colocar el cromatograma en la cuba, hasta que el disolvente haya alcanzado una
altura cercana a 0,5 cm del borde superior de la placa, sacar la placa y señalar la
altura alcanzada por el mismo
6) Calcular la relación de frentes (Rf) de cada uno de los productos obtenidos.
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Completar el siguiente cuadro:
Método de obtención Rf de Sol. Patrón Rf Muestra Problema
del A.A.S
EV con H2SO4
EV con CaCO3
EV sin catalítico
INFORME DE LABORATORIO:
Solución Patrón: Se preparó 2 ml de disolución patrón 2% (m/v) en etanol de cada uno
de los compuestos.
Muestra Problema: A partir de los productos obtenidos en el laboratorio de la clase
anterior, se prepró la disolución correspondiente a los cristales obtenidos. Tener en
cuenta la concentración del punto 1.
CALCULOS PARA LA PREPARACION DE LA SN PATRON Y MUESTRAS AL 2%
M/V
2 gr patrón (AAS) 100 ml sn
0,04 gr “ =X 2ml sn
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Se realizaron los mismos cálculos para las muestras y el patrón y se procedió a pesar
en vasos de precipitado previamente rotulados cada uno de los componentes para
preparar las disoluciones al 2% en etanol
Mientras tanto se puso a activar la placa a 100 -110 C ͦ , durante 30 minutos (Fase
estacionaria)
En la placa se trazó una línea con lápiz a 0,5 cm del borde inferior y 0,5 del borde
superior
Se depositó una microgota de las soluciones, usando capilares individuales para cada
disolución. En una placa se sembró el patron junto a la muestra de AAS con
catalizador acido, en otra se sembró el patrón y la muestra de AAS
con catalizador básico y en una última placa se sembró el patrón y la muestra sin
catalítico.
Se preparó la Fase Móvil siguiendo la proporción acetato de etilo-ácido acético (99:1)
Se colocó el cromatograma en la cuba, hasta que el disolvente haya alcanzado una
altura cercana a 0,5 cm del borde superior de la placa, se sacó la placa y se señaló la
altura alcanzada por el mismo.
Se retiraron las placas y se observaron las corridas bajo luz
Ultravioleta y en una cuba saturada con vapores de yodo
Se calcularon la relación de frentes (Rf) de cada uno de los productos obtenidos
obteniéndose los siguientes resultados:
Con catalizador acido:
8,6 7,6
RF patrón= = 0,72 RF muestra= = 0, 63
12 12
Con catalizador básico:
10,6 10,7
RF patrón= = 0,87 RF muestra= = 0,88
12,2 12,2
Sin catalizador:
10,5 10,5
RF patrón= = 0,875 RF muestra= = 0,875
12 12
Método de obtención Rf de Sol. Patrón Rf Muestra Problema
del A.A.S
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0,72 0,63
EV con H2SO4
EV con CaCO3
0,87 0,88
EV sin catalítico
0,875 0,875
Conclusión: al observarse valores similares de Rf entre el patrón y las muestras se
puede decir que lo obtenido en las síntesis es AAS.
También se pudo observar puntos intermedios bajo la luz UV lo que nos lleva a indicar
que existe presencia de impurezas.
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