INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA
Inmunofluorescencia: Es una técnica de inmunomarcación (inmunoensayos) que
aprovecha la capacidad que tienen los anticuerpos para unirse con alta especificidad a
una determinada molécula blanco; se diferencia de otras técnicas inmunoquímicas en
que aquí la marca unida al anticuerpo es una molécula fluorescente.
La Inmunofluorescencia directa, también conocida por sus siglas IFD, hace uso de un
único anticuerpo que se encuentra químicamente unido a un fluorócromo.
Características
El anticuerpo reconoce la molécula diana y se une a ella directamente.
Reduce el número de etapas necesarias, por lo tanto, es más rápida.
Menos sensible a interferencias debidas a reactividad cruzada de los anticuerpos o a
reacciones no específicas, las cuales tienden a aumentar el ruido de fondo de la
técnica.
Tiene aplicaciones en casos urgentes que necesitan un diagnóstico rápido.
Es mas costosa debido a que utiliza anticuerpos específicos.
Componentes en común (IFD e IFI)
1. Antígeno: sustancia que se quiere detectar
2. Anticuerpo primario: reconoce y se une específicamente al antígeno
3. Anticuerpo secundario (solo en IF indirecta): se une al anticuerpo primario y está
marcado con fluorocromo.
4. Fluorocromo: sustancia fluorescente que emite luz al ser excitada
5. Microscopio de fluorescencia: permite visualizar la fluorescencia emitida por el
fluorocromo
6. Portaobjetos: soporte donde se fija la muestra celular o de tejido
7. Solución buffer (PBS): se usa para diluir muestras y lavar, manteniendo pH y
condiciones estables
8. Montaje con medio antifade: evita que la fluorescencia se degrade rápidamente
9. Incubaciones: paso donde se permite la unión anticuerpo-antígeno
10. Lavados intermedios: se eliminan reactivos no unidos para evitar falsos positivos
Bibliografía
Al Diagnóstico Y Tratamiento, U. D. E. S. (s/f). “GUÍA DE PROCEDIMIENTO:
INMUNOFLUORESCENCIA”. [Link]. Consultado el 26 de junio de 2025, de
[Link]
%20DE%20PROCEDIMIENTO%[Link]