Seminario biologia celular 4

Transducción de energía y mitocondrias

Origen de las mitocondrias:

Organelas presentes en casi todas las células eucariontes

Se cree que provienen de bacterias aeróbicas que fueron fagocitadas por una célula
eucarionte ancestral anaeróbica. Creándose una relación simbiótica en la cual ambas
células se ayudaron mutuamente para sobrevivir y reproducirse.

Organización estructural de la mitocondria:

Posee 2 membranas:

Membrana externa: contiene muchas porinas, es permeable a moléculas de hasta 5000 Da

(daltons).

Membrana interna: plegada en crestas, impermeable a iones y moléculas pequeñas.

Contiene embebidos complejos proteicos de la cadena de transporte de e- y la ATP sintasa

Espacio intermembrana: contiene enzimas que usan el ATP para fosforilar otros
nucleótidos. pH7

Matriz: está dentro de la membrana interna. Contiene enzimas de oxidación de piruvato y

ácidos grasos, del ciclo ácido cítrico. ADN mitocondrial y maquinaria de síntesis de
proteínas. pH 7,5
Las mitocondrias permanecen fijas en regiones de la célula que demandan mucha energía

Las mitocondrias son organelas con gran movilidad, cambian constantemente de forma y
posición dentro de la célula.

En algunas células permanecen fijas en un punto fijo, impulsando el ATP directamente

hacia un sitio de alto consumo. Por ejemplo, en la célula cardíaca se encuentran cerca del
sarcómero, (aparato contráctil). En los espermatozoides, se encuentran alrededor del
flagelo

El ADN mitocondrial es diferente del ADN nuclear

Estas organelas contienen su propio ADN, que es diferente del ADN nuclear.

Código genético en mitocondrias:

Algunas diferencias entre el código genético universal y el mitocondrial:

Biogénesis mitocondrial:

En respuesta a señales específicas y dependiendo del requerimiento celular, las

mitocondrias pueden sufrir los procesos:

Fisión: a partir de una mitocondria, se divide generando dos mitocondrias pequeñas.

Fusión: dos mitocondrias pequeñas se unen y forman una grande.

Así pueden llegar a formarse hasta redes por todo el citoplasma

Proteínas mitocondriales:

Las proteínas mitocondriales tienen 2 orígenes. Estas organelas tienen su propio ADN, que
puede ser trascripto y traducido dentro de la misma mitocondria, para así sintetizar
proteínas mitocondriales. Sin embargo, la mayor parte de las proteínas mitocondriales, está
codificada en el núcleo, es decir, en el ADN genómico, el cual puede ser transcripto y luego
traducido en el citosol para generar proteínas precursoras que ingresarán a la mitocondria

Las proteínas mitocondriales que son sintetizadas en ele citosol, contienen una secuencia
señal en su “extremo N terminal”, el cual es reconocido por el sector del complejo TOM de
la membrana externa de la organela.
Este complejo, unido a la proteína, difunde lateralmente en la membrana hacia un sitio de
contacto entre la membrana externa e interna, y la proteína es translocada a través de
ambas membranas por medio de los complejos translocadores TOM, en la membrana
externa y TIM en la membrana interna.

Una vez en el interior de la organela, una peptidasa señal cliva la secuencia señal,
generándose así una proteína mitocondrial madura.

Funciones de las mitocondrias:

• Remoción del calcio citosólico

• Participación en la síntesis de esteroides

• Participación en los procesos de apoptosis

• Descarboxilación oxidativa

• Β-Oxidación de ácidos grasos

• Producción de ATP por fosforilación oxidativa

Remoción de Ca++ citosólico

Las células eucariontes mantienen una concentración de Ca libre en el citosol muy baja,
dado que este ión tiene la capacidad de unirse a muchas moléculas en las células y alterar
sus niveles de actividad. Estos niveles de Ca citoplasmático tan bajos, se logran mediante la
remoción del mismo por parte del REL, también por las moléculas de unión al Ca en el
citoplasma, como por ejemplo la proteína calmodulina.

Cuando la concentración de Ca aumenta en el citosol y es peligroso para la célula, se pone

en acción una CaATPasa localizada en la membrana interna de la mitocondria que va a
bombear Ca hacia la matriz mitocondrial retirándolo del citosol.

Síntesis de hormonas esteroideas

En algunos tipos celulares, como células de la corteza suprarrenal, ovarios y testículos, las
mitocondrias se especializan una función esteroideogénica, es decir, en la síntesis de
hormonas esteroideas junto con el REL
Apoptosis: vía intrínseca

Las mitocondrias están involucradas en la vía intrínseca de la apoptosis, es decir, de la

muerte celular programada.

Frente a un estímulo apoptótico, como puede ser la falta de nutrientes o un daño irreparable
en el ADN, se libera “citocromo C”, que es una proteína de la membrana mitocondrial
interna, hacia el citosol. Esta a su vez, junto con proteínas adaptadoras activadas y la
caspasa 9 forman un complejo proteico llamado “poptosoma”, el cual activa caspasas que
son proteasas efectoras y llevan a la muerte por apoptosis de la célula.
Funciones celulares que requieren energía

Una de las funciones mas relevantes de la mitocondria es la producción de e° en froma de

ATP.

Las mitocondrias toman la e° depositada en las uniones covalentes de las moléculas de

alimento y junto con el oxígeno ambiental, la transfieren al ADP para fromar ATP, el cuaol
es utilizado en diversos procesos celulares como los indicados en la foto.

La e° del ATP es liberada en cada uno de estos procesos por hidrólisis de esta molécula,
generando a su vez el ADP, el cual deberá ser transformado en ATP en la mitocondria.
La oxidación gradual controlada del hidrato de carbono conserva la e° útil

Las células necesitan de una provisión constante de e° para mantenerse vivas, la cual
proviene de los enlaces químicos de las moléculas de alimento.

Cuando una molécula de hidrato de carbono se degrada, es decir se oxida a dióxido de

carbono y agua, se libera gran cantidad de e°. Si este proceso ocurriese en un solo paso, se
liberaría una cantidad de e° tan alta que no podría ser almacenada por ninguna mole´cula
transportadora de e° celular, en cambio en las células, la degradación u oxidación del
hidrato de carbono, se lleva a cabo a través de una serie de pasos enzimáticos, liberándose
pequeños paquetes de un tamaño adecuado. Ahora sí, esta energía puede ser transferida a
moléculas transportadoras como el ATP o el NADH y queda disponible para realizar trabajo
útil en la célula.
El NADH y el FADH2 son transportadores de electrones y protones de alta energía

El NADH y el FADH2 (un NAD Y FAD reducidos), son moléculas transportadoras activadas
que participan en reacciones de óxido-reducción celular.

Cuando una molécula de alimento se oxida, transfiere protones y electrones de alta energía
al NAD o al FAD, los cuales a su vez se reducen a NADH o FADH2. Estos electrones y
protones, serán a su vez cedidos con facilidad a otra molécula en una reacción posterior de
óxido-reducción, es decir, el NADH y el FADH2 se comportan como transportadores de e°
celular.
Etapas del metabolismo celular para la obtención de energía de los alimentos

Las proteínas polisacáridos y grasas, que forman la mayoría de los alimentos que ingerimos,
deben degradarse en moléculas más pequeñas, antes de que nuestras células puedan
utilizarlos, ya sea como fuente de e° o como unidades estructurales para otras moléculas.

Este proceso de degradación, que utiliza enzimas para degradar moléculas complejas en
otras más simples, se denomina “catabolismo celular”, e involucra 3 etapas:

1. Etapa 1: Ocurre por fuera de las células. Involucra el desdoblamiento de

macromoléculas grandes en subunidades simples mediante enzimas digestivas

Luego de la digestión, los aminoácidos, azucares simples, ácidos grasos y glicerol, ingresan
al citosol donde comienzan su oxidación gradual

2. Etapa 2: Serie de reacciones llamadas glucólisis, convierte cada molécula de glucosa

en dos moléculas más pequeñas de piruvato, el cual se transporta desde el citosol
hacia la matriz mitocondrial y se oxida a Acetil-CoA, produciéndose también una
pequeña cantidad de ATP y NADH en este proceso.

Desdoblamiento de subunidades simples en Acetil-CoA + producción de pequeña cantidad

de ATP y NADH

En la degradación gradual de ácidos grasos también se producen grandes cantidades de

Acetil-CoA.

3. Etapa 3: Ocurre completamente dentro de las mitocondrias, involucra la oxidación

completa de acetil-CoA y producción de gran cantidad de ATP y NADH
Pasos de la glucólisis

Ocurre completamente dentro del citosol

Paso 1-3: A partir de una molécula de glucosa y con gasto de e° en forma de 2 moléculas de
ATP, se genera una molécula de fructosa 1,6-bifosfato,

Paso 4-5: Ocurre el desdoblamiento de esta molécula de 6 carbonos, en 2 moéculas de 3

carbonos cada uno, (2 moléculas de gliceraldehído 3-fosfato)

Paso 6-10: Las 2 moléculas de gliceraldehído se transforman en 2 moléculas de piruvato, y

se genera e° en la forma de 4 moléculas de ATP y 2 de NADH

Resumen: a partir de una molécula de glucosa, obtenemos: 2 moléculas de NADH, 2

moléculas de ATP y 2 piruvatos
Descarboxilación oxidativa

Ocurre dentro de la matriz mitocondrial

1. El piruvato ingresa a la mitocondria y se oxida a Acetil CoA, generándose también

una molécula de NADH

Entonces, a partir de una molécula de piruvato, vamos a obtener una molécula de NADH y
una molécula de Acetil CoA. Pero, teniendo en cuenta que por cada molécula de glucosa
obteníamos 2 moléculas de piruvato, el resultado final de la descarboxilación oxidativa a
partir de una molécula de glucosa, nos va a dar como resultado, 2 moléculas de NADH y 2
moléculas de Acetil CoA.

El Acetil CoA va a ingresar a un ciclo de 8 pasos enzimáticos dentro de la matriz

mitocondrial, llamado ciclo de Krebs o ciclo del acido cítrico
Ciclo de Krebs

Por cada molécula de Acetil CoA ingresada, vamos a obtener 3 moléculas de NADH, 1
molécula de FADH2 y 1 molécula de ATP y 2 moléculas de CO2.

El resultado final de cada ciclo de Krebs por cada molécula de glucosa va a ser: 6 moléculas
de NADH, 2 moléculas de FADH2, 2 moléculas de ATP y 4 moléculas de CO2
Fosforilación oxidativa

Las reacciones catabólicas finales, tienen lugar en la membrana mitocondrial interna y en

su c0njunto toman el nombre de “fosforilación oxidativa”

La e° que se fue acumulando en los transportadores de e° NADH y FADH2, es transferida a

una serie de proteínas en la membrana mitocondrial interna, que en su conjunto conforman
la cadena de transporte de electrones.

¿Cómo se realiza esta transformación de e°?

El NADH dona sus electrones de alta e° al complejo I o NADH deshidrogenasa y por lo tanto,
se oxida a NAD.

En el caso del FADH2, los electrones de alta e°, entran a la cadena de transporte de
electrones a través del complejo II o succinato deshidrogenasa. Estos electrones van a ir
pasando de un complejo al siguiente de la cadena de transporte de electrones, mediante
reacciones de óxido reducción, y van a ir perdiendo e° en cada paso.

Finalmente, en el complejo IV o citocromo oxidasa, estos electrones se van a combinar con

una molécula de O2 para generar agua.

Los electrones van perdiendo energía a medida que van pasando de un complejo a otro de
la cadena de transporte de electrones. Esta e° es utilizada por los complejos I, III y IV para
bombear protones a través de la membrana mitocondrial interna, hacia el espacio
intermembrana, donde se van a ir acumulando.
Fosforilación oxidativa: fuerza protón-motriz

Este bombeo activo de protones genera:

Gradiente de voltaje: un potencial de membrana, a través de la membrana mitocondrial

interna, en el cual el interior, es decir del lado de la matriz, es negativo, y del lado externo
(espacio intermembrana) es positivo.

Gradiente de concentración de protones: un gradiente de pH, en el que el pH es casi 0.5

unidades más alto en la matriz con respecto al espacio intermembrana

El gradiente electroquímico total consiste en una gran fuerza que responde al potencial
de membrana ΔV y una fuerza más pequeña proveniente del gradiente de concentración de
protones Δ pH. Ambas fuerzas se combinan en la fuerza protón-motriz.
Fosforilación oxidativa: síntesis de ATP

Esta fuerza protón-motriz es la que conduce a los protones devuelta hacia la matriz
mitocondrial a favor de su gradiente electroquímico y es la que impulsa la síntesis de ATP.
Esto es posible gracias a una enzima “ATP sintasa”, que también se encuentra en la
membrana mitocondrial interna y acopla el pasaje de protones a favor de su gradiente
electroquímico con la síntesis de ATP a partir del ADP y le fosforo inorgánico

ATP sintasa

La ATP sintasa es una proteína de gran tamaño formada por varias subunidades. Una
porción enzimática grande o F1, se proyecta hacia la matriz mitocondrial y se adhiere a un
transportador de protones transmembrana o porción F0 a través de una subunidad delgada
con forma de tallo.

El pasaje de protones a través del transportador hace que el tallo gire rápidamente por
dentro de la porción F1, induciéndola a formar ATP. Este mecanismo es capaz de generar
mas de 100 moléculas de ATP por segundo, y es necesario que pasen aprox. 3 protones a
través de la sintasa para sintetizar cada molécula de ATP.
La ATP sintasa es un mecanismo con un acoplamiento reversible, es decir, puede
aprovechar tanto el flujo de protones a favor de su gradiente electroquímico y generar ATP,
(lo cual es su función normal en las mitocondrias), como también puede hidrolizar ATP
para bombear los protones a través de la membrana. En este último caso, la ATP sintasa
funciona como una bomba de protones.

El hecho de que la ATP sintasa genere o consuma ATP, depende de la magnitud del gradiente
electroquímico de protones a través de la membrana en la que se encuentra
El gradiente electroquímico de H+ también se utiliza para el transporte acoplado.

La síntesis de ATP no es el único proceso dirigido por el gradiente electroquímico de los

protones.

Los transportadores molécula, (como el piruvato, el ADP y le fosfato inorgánico), pueden

acoplar su transporte con el flujo energéticamente favorable de los protones hacia el
interior de la matriz mitocondrial.

Por ejemplo, el piruvato y el fosfato inorgánico son co-trasnportados hacia el interior de la

matriz, al mismo tiempo que lo hacen los protones a favor de su gradiente de concentración.
Por otro lado, una proteína “antiporter” aprovecha el gradiente de voltaje para expulsar
ATP hacia el citosol e importar ADP hacia la matriz mitocondrial

Resumen de los productos resultantes de la oxidación de glucosa

Las grasas también se oxidan a acetil CoA: β-oxidación de ácidos grasos

Los ácidos grasos derivados de las grasas, son un combustible alternativo de los azúcares
para la generación de e°. Al igual que el piruvato derivado de la glucólisis, los ácidos grasos
se convierten en Acetil CoA, dentro de la matriz mitocondrial, mediante un proceso cíclico
denominado “β-oxidación”.

Este ciclo es catalizado por una serie de 4 enzimas en la matriz mitocondrial, las cuales
acortan la cadena del ácido graso en 2 carbonos cada vez, generándose una molécula de
Acetil CoA, una de NADH y una de FADH2 en cada vuelta del ciclo.

Dado que los ácidos grasos tienen cadenas carbonadas largas, las grasas aportan mas
energía que los hidratos de carbono por la cantidad de NADH y FADH2 suplementarias que
se generan durante la β-oxidación de los ácidos grasos, los cuales son proporcionalmente
mayor que las producidas por la glucosa durante la glucolisis y la descarboxilación
oxidativa.
La glucólisis y el ciclo de Krebs proveen precursores para la síntesis de muchas
biomoléculas

Las reacciones catabólicas, (como la glucólisis y el ciclo de Krebs), no solo producen e°, sino
también unidades estructurales a partir de las cuales se originan muchas otras moléculas.

Muchos de los intermediarios formados en la glucólisis y en el ciclo de Krebs, se desvían

hacia vías biosintéticas o anabólicas, donde series de reacciones enzimáticas los convierten
en aminoácidos, nucleótidos, lípidos y otras moléculas orgánicas necesarias para la célula.
Oxidación parcial del alimento: fermentación láctica

La mayoría de las células animales y vegetales degradan completamente las moléculas de

alimento, generando grandes cantidades de ATP mediante fosforilación oxidativa en las
mitocondrias con el consecuente consumo de oxígeno.

En ausencia de oxígeno, algunos microorganismos anaerobios, como las levaduras, o

algunos tejidos como el músculo estriado esquelético, pueden seguir funcionando,
obteniendo e° a través de la oxidación parcial del alimento.

En el caso del músculo estriado esquelético, el piruvato generado por glucolisis se mantiene
en el citosol y es transformado en “lactato”. También se genera el NAD que se consumió en
el paso 6 de la glucólisis, dando como consecuencia 2 moléculas de ATP. Es decir, esta vía
brinda mucha menos e° que la oxidación completa, que rinde alrededor de 30 moléculas de
ATP.

Oxidación parcial del alimento: fermentación alcohólica

En el caso de los microorganismos anaerobios como las levaduras, el piruvato generado por
glucólisis se convierte a través de acetil aldehído en CO2 y etanol.

Esta vía regenera NAD a partir de NADH según se necesite para permitir que la glucólisis
continúe.

También, en este caso, se genera como producto neto 2 moléculas de ATP.

Ambas vías de fermentación parcial del alimento (láctica y alcohólica) brindan mucha
menos e° total que la oxidación completa de los alimentos.

Mitocondriopatias:

Sin las mitocondrias, las células eucariotas actuales dependerían de un mecanismo

relativamente ineficiente de la glucólisis para toda su producción de ATP. Por lo que parece
improbable que los organismos multicelulares complejos se hayan mantenido hasta
nuestros días de esa manera.

Los defectos en la función mitocondrial pueden traer graves repercusiones para el

organismo.

Principales mitocondriopatias: afectan principalmente a tejidos que dependen de un alto

requerimiento energético, como el músculo estriado y el tejido nervioso.