Análisis de Semen: Procedimientos y Resultados
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Traducido por
ScribdTranslationsANÁLISIS DE SEMEN EN EL LABORATORIO
SOP
MACROSCOPIA
APARIENCIA
El semen normal tiene un color gris-opalescente, es homogéneo y se liquefacta en un plazo de 60 minutos.
temperatura ambiente. La muestra puede parecer clara si la concentración de esperma es demasiado baja o marrón
cuando están presentes glóbulos rojos (hematosperinia).
CONSISTENCIA (VISCOSIDAD)
Se puede estimar mediante aspiración suave en una pipeta de 5 ml y luego permitir que el semen caiga.
por gravedad y observando la longitud del hilo formado.
VOLUMEN
El volumen del eyaculado debe medirse ya sea con un cilindro graduado o por aspiración.
el semen completo en una pipeta de boca ancha.
PH
El pH está determinado por las secreciones ácidas de la próstata y las secreciones alcalinas del semen.
vesícula. Debería estar normalmente en el rango de 7.2-8.0.
MICROSCOPÍA
AGGLUTINACIÓN
La aglutinación significa que los espermatozoides móviles se adhieren entre sí de cabeza a cabeza, de medio a medio,
cola a cola, o mezclado. En caso de aglutinación, se debe realizar un cultivo de semen con el fin de
excluir infección por E. coli.
MOTILITY
Se entrega una gota de semen sobre un portaobjetos microscópico y se cubre con un cubreobjetos de 22X22 cm.
El campo del microscopio se escanea sistemáticamente con un objetivo de X40 y un total de 100
se cuentan los espermatozoides. La motilidad de los espermatozoides se califica en porcentaje si es
muestra
1. Motilidad progresiva lineal hacia adelante activa
2. Motilidad progresiva lenta o lenta
3. Motilidad no progresiva
4. No motilidad
VIABILIDAD DEL ESPERMATOZOIDE
La tinción vital de los espermatozoides permite cuantificar la fracción de células vivas.
independientemente de su motilidad. Los espermatozoides vivos y muertos se distinguen añadiendo una gota
de 0.5% de tinte eosina Y a una gota de semen a temperatura ambiente y extender la mezcla sobre el
portaobjetos de microscopio. Usando el objetivo X40, se clasifican 100 espermatozoides como coloreados.
naranja-rojo, si la mancha ha pasado a través de la membrana y, por lo tanto, la célula está muerta, o no-
manchado, la célula siendo considerada viva.
CUENTA DE ESPERMATOZOIDES
En el método del hemocitómetro, se prepara una dilución 1:20 de una muestra bien mezclada mediante
diluyendo 50µl de semen licuado con 950µl de diluyentes. El diluyente se prepara añadiendo 50g de
carbonato de sodio, 10 ml de formalina al 35% (v/v) y completando la solución a un volumen final de
1000ml.
Usando una pipeta de Pasteur, carga una solución de cámara Neubauer mejorada bien mezclada
solución. Espere de 3 a 5 minutos para que los espermatozoides se sedimenten. Utilizando el objetivo X10, cuente los
número de las células espermáticas en un área de 2 milímetros cuadrados (2 cuadrados grandes). Calcular el
número de espermatozoides en 1 ml de fluido multiplicando el número contado por 100,000
ANÁLISIS DE LAS CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS DE LOS ESPERMATOZOIDES
Haga una delgada extensión de semen licuado y bien mezclado en un portaobjetos. Mientras esté húmedo, fije la extensión.
con etanol al 95% v/v durante 5-10 minutos, y dejar secar al aire.
Lave la lámina con solución de bicarbonato de sodio y formalina para eliminar cualquier moco que
puede estar presente.
Cubra la mancha con diluyentes (1 en 20) fucsina de carbono y deje que tiña durante 3 minutos.
Contracolorante, cubriendo la extendida con azul de metileno Loeffer diluido (1 en 20) durante
2 minutos
Lava la mancha con agua. Escurre y deja que la mancha se seque al aire.
STAINING RESULTS
Núcleo de la cabeza – Azul oscuro
Citosol de la cabeza - Azul pálido
Parte media y cola – rosa-rojo
TERMINOLOGÍAS PARA LA CLASIFICACIÓN EN ANALISIS DE SEMEN
NORMOSPERMIA Recuento normal de espermatozoides, motilidad y morfología
OLIGOZOOSPERMIA Recuento de espermatozoides menor a 20 millones/ml
ASTHENOZOOSPERMIA Menos del 5% de los espermatozoides con movimiento hacia adelante
movimiento progresista
TERATOZOOSPERMIA Menos del 50% de los espermatozoides con normalidad
morfología
OLIGOASTENOTERATOZOOSPERMIA Recuento de espermatozoides, movimiento progresivo hacia adelante
y la morfología están alteradas (>50%)
AZOOSPERMIA Sin espermatozoides en el eyaculado
ASPERMIA No eyacular