BIOQUÍMICA

INFORME DE LABORATORIO SOBRE

EXPERSIMENTO 3: PRUEBA PARA LÍPIDOS
DMED-1A; GRUPO 1: Alborte, T., Amador, A., Amurao, G., Antonio, A., Ayonque, K., Bandoy,
M., Bartolomé, C., Basilio, H., Boco, J., Borromeo, K., Buencamino, J., Cabrera, M., Cayari, M.
Co, J., Corpuz, M., De Torrez, L.

INTRODUCCIÓN

Los lípidos constituyen un gran grupo heterogéneo de componentes fisiológicos y químicos no relacionados.
sustancias clasificadas juntas porque son sustancias lipídicas que son insolubles en agua
pero son solubles en disolventes orgánicos como el cloroformo, el éter, el tetracloruro de carbono, el alcohol y
benceno. Los lípidos importantes incluyen triacilgliceroles, colesterol y derivados del ácido araquidónico.
ácido. Aparte de ser una rica fuente de energía, los lípidos desempeñan un papel importante como componentes estructurales.
en prácticamente todas las células vegetales y animales. En el cuerpo humano, los lípidos se encuentran principalmente en las células
estructuras como la membrana celular, en órganos vitales como el cerebro y en varios tejidos como el
tejido nervioso.

PROCEDIMIENTOS DE LABORATORIO

A. Pruebas de Solubilidad

La prueba de solubilidad es la prueba preliminar que detecta la presencia de todos los lípidos. Esta prueba
detecta la solubilidad de lípidos en varios disolventes para verificar si es miscible o no
inmiscible en disolventes polares o no polares. Principio: La prueba de solubilidad se basa en la propiedad
de lípidos para disolverse en diferentes disolventes.

Materiales: pipeta, frascos tapados, gotero, papel de bonos de cupón

Solvents: distilled water, ethyl alcohol, ether, chloroform, benzene, 5% HCL, 5%
NaOH
aceite de semilla de algodón

Procedimiento:

1.
Pipete 1 ml de el Agrega 1-2 gotas de
aceite de semilla de algodón en Registra la hora
solventes requeridos
requerido para el
en separado cada vial y aceite para disolver.
viales tapados agitar bien.
Resultados:

MUESTRA DISOLVENTE RESULTADO

Agua destilada Insoluble
Alcohol etílico Insoluble
Éter Soluble
Aceite de semilla de algodón Choloroform Soluble
Benceno Soluble
5% HCl Insoluble
NaOH Insoluble

Razonamiento:

El término solubilidad lipídica también se conoce como lipofilia, un término que generalmente se refiere a
se refiere a la capacidad de una sustancia o compuesto para disolverse en lípidos, grasas o aceites, lípidos.
Los lípidos son solubles en disolventes no polares e insolubles en disolventes polares. Hay más
hidrocarburos en una molécula lipídica que son en gran medida hidrofóbicos en comparación con su lado polar
haciendo que los lípidos sean insolubles en disolventes orgánicos. Por otro lado, los lípidos son solubles en
disolventes no polares debido a la presencia de enlaces débiles.

2. Prepara las siguientes mezclas:

Aceite de semilla de algodón - alcohol etílico
Aceite de semilla de algodón-éter

En diferentes lugares de un
Permitir que los disolventes Compara la solubilidad
pieza de bono cupón
del aceite en los dos
papel, colocar 3 gotas evaporar.
disolventes.
de cada mezcla.
 MEZCLA RESULT EXPLICACIÓN
Aceite de Semilla de Algodón–Etilo Residuo de aceite de semilla de algodón
Evaporarse; miscible
Alcohol permanece en el papel
Aceite de semilla de algodón - Éter Evaporates; miscible porque los lípidos no
evaporar.

Razonamiento:

Cuando ambas sustancias son polares, pueden atraerse entre sí, lo que conduce a
a la mezcla (miscibilidad). En este experimento, tanto el etilo como el éter son sustancias polares, por lo tanto
permitiendo que atraiga los grupos funcionales polares de los lípidos, lo que resulta en miscibilidad.

B. Prueba de Acroleína

La prueba de acroleína se utiliza para detectar la presencia de glicerol y grasa. Esta prueba se basa en
en la “reacción de deshidratación”, donde las moléculas de agua se eliminan del glicerol por
la adición del reactivo sulfato de hidrógeno de potasio. La reacción entre el glicerol y
el sulfato de hidrógeno de potasio da lugar a la formación de "Acroleína" que se caracteriza
físicamente por la liberación del olor penetrante.

Materials: 2 test tubes, dropper

Muestras: glicerol, aceite de semilla de algodón
Reagent: KHSO4
 Procedimiento:

Prepara 2 tubos de ensayo. Coloca en:

Tubo de ensayo 1: 2 gotas de glicerol + un
pizca de KHSO4 Calienta cada tubo de ensayo sobre una llama baja. Observe el olor producido.
Tubo de ensayo 2: 2 gotas de aceite de semilla de algodón
+ una pizca de KHSO4

Results:

MUESTRA REACTIVO RESULTS

Glicerol KHSO4 Olor penetrante
Semilla de algodón KHSO4 Sin olor

Razonamiento:

Si hay glicerol presente en la muestra, dará un olor acre debido a la formación.

de acroleína. Si el glicerol está ausente en una muestra, entonces no producirá un olor acre.

C. Prueba de Rancidez

La rancidez generalmente es la oxidación o hidrólisis completa o incompleta de las grasas

y aceites cuando se exponen al aire, la luz o la humedad o por acción bacteriana, lo que resulta en
sabor y olor desagradables. Hay tres tipos de rancidez:

1. Rancidez Hidráulica. Ocurre cuando el agua separa las cadenas de ácidos grasos de la
esqueleto de glicerol en gliceridos.
 2. Rancidez oxidativa. Ocurre cuando los enlaces dobles de un ácido graso insaturado
el ácido reacciona químicamente con el oxígeno.
3. Rancidez microbiana. Ocurre cuando microorganismos como bacterias utilizan su
enzimas para descomponer las estructuras químicas en la grasa.

Materiales: 6 tubos/viales, gotero

Muestras: aceite de coco fresco, aceite de coco rancio
Reagents: phenolphthalein, methyl orange, pH paper

Procedimiento:

1. Prepara 6 tubos o frascos:

En cada uno de los tubos de ensayo # 1, 2, 3, coloca 5 gotas de aceite de coco fresco
En cada uno de los tubos de ensayo 4, 5, 6, coloca 5 gotas de aceite de coco rancio

2. Prueba la reacción del aceite de coco fresco con:

Fenolftaleína
Naranja metilo
papel para pH

3. Realiza las mismas pruebas de reacción con el aceite de coco rancio.

MUESTRA REACTIVO REACCIÓN

Fenoftaleína Sin reacción; incoloro
Aceite de Coco Fresco Naranja Metílico Orange Color
Papel de pH Sin reacción
Fenolftaleína Sin reacción; incoloro
Aceite de coco rancio Naranja de metilo Color Naranja
Papel pH Sin Reacción
 Razonamiento:

La prueba dio un resultado básico, por lo tanto, hay una oxidación o en esta prueba, un
rancidez oxidativa que ocurrió.

Prueba de Liebermann-Burchard para el colesterol

La prueba de Liebermann–Burchard o prueba de anhídrido acético se utiliza para la detección de

colesterol.

Materials: evaporating dish, dropper

cristales de colesterol
Reagents: chloroform, acetic anhydride, concentrated H2SO4

Procedimiento:

Coloca unos pocos Agregue 2 ml de

cristales de cloroformo y Agrega 2-3 gotas de
10 gotas de ácido acético Nota el color
colesterol en un concentrado
evaporación en seco anhidrido. Mezclar cambios.
H2SO4y sacudir.
plato. a fondo.

Result:

MUESTRA REAGENT REACCIÓN

Cloroformo, Acético
Cristales de colesterol Morado a Azul en Color
Anhidruro, H2SO4

Justificación:

Los resultados positivos de esta prueba darán un color púrpura, azul o verde esmeralda. Dado que
esta es una prueba general para esteroides, es positiva para colesterol y lípidos no polares debido a
condensación de anhidrido acético con C-3-OH y enlaces dobles C5.
PREGUNTAS

1. ¿Por qué son insolubles los ácidos grasos en agua?

Los ácidos grasos son insolubles en agua porque hay más hidrocarburos que son
más hidrofóbico que el grupo carboxilo que es soluble en agua. Cuanto más larga sea la cadena
de ácidos grasos, más insoluble se vuelve.

2. Explica por qué la forma cis- es la configuración más predominante de los ácidos grasos insaturados.

La configuración en forma cis es más predominante en los ácidos grasos insaturados ya que la mayoría
de los ácidos grasos están en forma líquida, y la mayoría de estos ácidos grasos insaturados en forma líquida
tiene esta configuración.

3. ¿Por qué es la Prueba de Acroleína la prueba general para grasas?

La prueba de acroleína se utiliza para detectar la presencia de glicerol o grasa. Cuando se trata la grasa
fuertemente en presencia de un agente deshidratante como el bisulfato de potasio (KHSO4), el
la porción de glicerol de la molécula se deshidrata para formar un aldehído insaturado, acroleína
que tiene un olor irritante y penetrante.

La prueba de acroleína se utiliza porque la acroleína es el producto final cuando una sustancia que
contiene grasa reacciona con el reactivo, bisulfato de potasio, y calor. Si el acroleína es
producido, indica que hay una presencia de grasas en la sustancia.

4. What type of rancidity occurs in vegetable shortening and how can it be prevented?

El tipo de rancidez que ocurre en los acortamientos vegetales es la oxidativa.

rancidez. La rancidez oxidativa está asociada con la degradación por el oxígeno en el aire. La
Los enlaces dobles de un ácido graso insaturado pueden ser rompidos por reacciones de radicales libres.
que involucra oxígeno molecular.

La oxidación ocurre principalmente con las grasas insaturadas. En la rancidez por oxidación, el
las moléculas de oxígeno interactúan con las moléculas del aceite, lo que causa daño o cambios en
la sustancia. Para evitar que esto suceda, las grasas vegetales deben almacenarse en
un lugar oscuro y fresco donde está menos expuesto al oxígeno.

5. Explica la acción limpiadora de los detergentes.

Los detergentes están compuestos principalmente de surfactantes, o "agentes activos de superficie" de

que reducen la tensión superficial del agua al adsorberse en el límite común
entre líquido y gas o un líquido y otro. Los surfactantes se forman en agregados
conocidas como micelas, formaciones de lípidos anfifílicos.
 La acción de limpieza de los detergentes se debe a su estructura molecular.
la parte hidrofóbica de la molécula es atraída por otras sustancias hidrofóbicas como
aceites y similares. La parte hidrofílica se adhiere al agua, por lo tanto, cuando se enjuaga
lejos del agua, la parte hidrofóbica que está unida también se enjuaga.

Los detergentes actúan para limpiar los platos de la misma manera que descomponen las células.
membranas. Los detergentes se unen a la grasa (lípidos), lo que permite que las partículas de grasa sean
llevado por el agua.

6. Escriba la estructura del compuesto padre del colesterol.

7. Explica el efecto solvente cooperativo de la lecitina y la albúmina.

La lecitina y la albúmina son buenos emulsionantes porque ambas tienen un polo y

porción no polar que ayuda a reducir la inmiscibilidad de dos sustancias. Cuando estas
dos disolventes trabajan juntos, estas sustancias son capaces de retener sustancias polares a través de
sus moléculas hidrofílicas, lo que hace posible la inmiscibilidad de dos sustancias.