Universidad Autónoma de Nuevo León
Facultad de Agronomía
Ingeniería en industrias alimentarias
Análisis Avanzado de Alimentos
Practica # 2 “DPPH”
Grupo: I5A
INTEGRANTES DEL EQUIPO:
Nena Suilem Ramírez Hernández 1922452
Miranda Abigail Garza Pérez 2058703
Hirany Regina Galván Torres 2057602
Juana Lizeth Amaya Torres 2000989
Diego Patricio Reyna Reyna 2071247
Ana Cristina Armenta Castro 2133270
DOCENTE: Dr. Guillermo Niño Medina
General Escobedo, N.L al 6 de diciembre de 2024
INTRODUCCIÓN
Los antioxidantes se utilizan en una gran variedad de productos alimenticios. Su actividad depende de
factores como la temperatura, la composición y estructura del alimento, así como la disponibilidad de
oxígeno.
Diversas técnicas han sido desarrolladas para evaluar la capacidad antioxidante de alimentos y plantas
medicinales. Una de las más utilizadas es la técnica basada en el radical libre 1,1-difenil-2-picrilhidrazina
(DPPH), ampliamente empleada para determinar la actividad antioxidante de muestras como café, jugos de
frutas, cereales, entre otros.
La práctica DPPH que realizamos en el laboratorio se fundamenta en la capacidad del radical de aceptar un
electrón o un átomo de hidrógeno. Este radical se caracteriza por presentar un color violeta intenso cuando
está en presencia de metanol. Para realizar este análisis, se utiliza un espectrofotómetro configurado a una
longitud de onda de 517 nm, que mide la absorbancia mientras se produce la aceptación del electrón.
Cuando un antioxidante reacciona con la solución de DPPH, donando un átomo de hidrógeno, el color
violeta intenso se transforma gradualmente en amarillo. Este cambio de color indica la reducción del radical
libre por efecto de los antioxidantes y permite evaluar la actividad antioxidante de las muestras analizadas
(Ruiz, 2020).
Figura 1. Estructura del DPPH
Objetivo
1. Evaluar la capacidad antioxidante de la muestra los diferentes tipos de té (verde citrus, blanco
arándano, negro limón y rojo frutos rojo) de la marca Natures Factory, mediante el método
DPPH, con el fin de conocer si el efecto de los diferentes tipos de tés es igual o diferente.
MATERIALES
2. Té verde sabor citrus de la marca Natures Factory
3. Té blanco sabor arándano de la marca Natures Factory
4. Té negro sabor limón de la marca Natures Factory
5. Té rojo sabor frutos rojos de la marca Natures Factory
6. Matraz 125 mL
7. Reactivo
8. Metanol 80 %
9. Micropipetas
10. Pipetas
11. Gradilla
12. Tubos de ensayo
13. Espectrofotómetro
MÉTODOS
Este método se basa en la reducción del radical libre DPPH, que cambia de un color violeta intenso a
amarillo conforme interactúa con antioxidantes presentes en las muestras de Té.
Parte I. Preparación de la Solución
1. Pesamos 0.0024 g del reactivo DPPH y disolvemos en metanol puro.
2. Diluir con metanol al 80 % hasta ajustar la absorbancia inicial a aproximadamente 1.0 a 517 nm.
3. Usar metanol al 80 % como blanco en el espectrofotómetro.
Tabla 1. Preparación de la curva de calibración DPPH.
Trolox Trolox madre Solución DPPH
ppm (μL) (μL)
500 50 1,500
400 50 1,500
300 50 1,500
200 50 1,500
100 50 1,500
0*
Blanco: *200 μL de metanol al 80%
1. Adicionar cada uno de los reactivos en el orden de la tabla 1, de derecha a izquierda.
2. Dejar reposar durante 30 minutos en oscuridad.
3. Leer a una absorbancia de 517 nm.
Parte II. Procedimiento de la preparación de las muestras
1. Tomamos 100 µL de muestra de té y mezclamos con 3 mL de la solución de DPPH para los tres
tubos de ensayo.
2. Preparamos un control negativo mezclando 100 µL de metanol al 80 % con 3 mL de la solución de
DPPH en un tubo de ensayo.
3. Dejamos reaccionar todas las muestras y el control blanco durante 30 minutos.
4. Medimos la absorbancia final a 517 nm en el espectrofotómetro.
5. Calculamos la capacidad antioxidante de las muestras utilizando la curva de calibración.
Figura 3. Metodología del procedimiento.
RESULTADOS
Absorbancia
0.7
y = 0.0032x + 0.0162
0.6 R² = 0.996
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0 50 100 150 200 250
Figura 4. Tabla y grafica de Resultados de las absorbancias.
absorbancia [µmolET/L]
Verde citrus 0.101 565.93
Verde citrus 0.106 562.60
Verde citrus 0.107 561.93 563.49
Blanco arandano 0.140 539.93
Blanco arandano 0.136 542.60
Blanco arandano 0.131 545.93 542.82
Negro Limón 0.127 548.60
Negro Limón 0.123 551.27
Negro Limón 0.122 551.93 550.60
Rojo frutos rojos 0.705 163.27
Rojo frutos rojos 0.700 166.60
Rojo frutos rojos 0.692 171.93 167.27
Tabla 2. Resultados de las tres muestras con su promedio por cada té.
Cuadro 1. Capacidad antioxidante de té verde sabor citrus, blanco arándano, negro limón y rojo frutos rojos de
la marca Natures Factory.
Muestras Cap. Antioxidante [μmolET/L]
Té verde 563.49 ± 2.14 A
Té blanco 542.83 ± 3.01 B
Té negro 550.60 ± 1.76 B
Té rojo 167.27 ± 4.37C
P-value 0.000
El cuadro 1 muestra la capacidad antioxidante de té verde sabor citrus, blanco arándano, negro limón y rojo
frutos rojos de la marca Natures Factory.
El efecto de los diferentes tipos de té es diferente para la capacidad antioxidante.
El efecto de los diferentes tipos de té fue más alto para el té verde.
DISCUSIONES
El té verde Citrus mostró la mayor capacidad antioxidante con un promedio de 563.49 entre las
muestras analizadas, lo que se alinea con investigaciones previas que atribuyen al té verde un
alto contenido de catequinas y polifenoles. Estas moléculas son responsables de neutralizar los
radicales libres, protegiendo las células del daño oxidativo.
El té de Arándano y Limón ocupan una posición intermedia, con una capacidad antioxidante
menor al té verde pero superior al té de frutos rojos. Este resultado podría deberse a su menor
procesamiento, que permite conservar una mayor proporción de compuestos fenólicos.
El té frutos rojos presentó la menor capacidad antioxidante, probablemente debido a la oxidación
de compuestos fenólicos durante su fermentación, lo cual reduce la actividad antioxidante.
Aunque el té frutos rojos presentó la mayor absorbancia promedio (0.699), esto no se convierte
en una mayor capacidad antioxidante. Esto sugiere que la absorbancia inicial no es un indicador
absoluto de la eficiencia antioxidante, ya que otros factores, como el tipo de compuestos
presentes, influyen en la neutralización de los radicales libres.
El resultado del té que nosotros como equipo seleccionamos (verde citrus) demostró que su
menor procesamiento conserva los compuestos antioxidantes en su forma más activa.
CONCLUSIONES
El análisis de la capacidad antioxidante de diferentes tipos de té mediante el método DPPH mostró
variaciones claras en función del tipo de té y el proceso de elaboración al que fue sometido. El té verde
sobresalió por su mayor capacidad antioxidante, lo cual refleja su riqueza en catequinas y otros compuestos
fenólicos. Estos componentes son clave para neutralizar los radicales libres, lo que hace del té verde una
excelente opción para promover la salud y prevenir enfermedades relacionadas con el estrés oxidativo,
como las cardiovasculares y neurodegenerativas. En comparación, el té de Arándano y Limón presentó
una capacidad antioxidante intermedia, lo cual se debe a su menor procesamiento, que ayuda a conservar
muchos de sus compuestos antioxidantes, aunque de manera algo reducida en relación con el té verde. Por
otro lado, el té frutos rojos mostró una capacidad antioxidante más baja, lo que puede explicarse por el
proceso de fermentación que reduce la cantidad de compuestos fenólicos activos.
Estos resultados refuerzan la idea de que los tés menos procesados, como el verde y el negro limón, son más
efectivos a la hora de proporcionar beneficios antioxidantes, mientras que el té frutos rojos, aunque sigue
siendo una buena fuente, pierde parte de su potencial debido a la oxidación durante la fermentación.
BIBLIOGRAFÍA
1. García-González, L. G. (2018). El impacto de los compuestos antioxidantes en la salud humana y su
relación con el consumo de té (Tesis de maestría). Universidad de Valladolid.
[Link]
2. Guerrero, A., & Pérez, R. (2021). Extracción de compuestos fenólicos y actividad antioxidante en té
verde (Camellia sinensis) bajo un diseño factorial 3x3. ResearchGate.
[Link]
actividad_antioxidante_en_te_verde_Camellia_sinensis_bajo_un_diseno_factorial_3x3
3. Chavez, F. R. (2020). Estudio de la actividad antioxidante y compuestos fenólicos en infusiones de
té verde (Camellia sinensis) (Tesis de maestría). Universidad Peruana de Ciencias Aplicadas.
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