Antioxidantes y Antimicrobianos de Kramecina
Antioxidantes y Antimicrobianos de Kramecina
Trimestre 25-I
ALUMNA MATRÍCULA
1
1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA Y JUSTIFICACIÓN
La salud pública enfrenta diversas problemáticas dentro de las que se
encuentran las enfermedades relacionadas al estrés oxidativo (como diabetes,
hipertensión y cáncer) y la resistencia a los antimicrobianos, en ese sentido, es
indispensable la búsqueda de nuevas moléculas bioactivas.
2
2. OBJETIVOS
3
3. MARCO TEÓRICO
4
[Link]. Asociación del estrés oxidativo con patologías
[Link].1. Cáncer
Las especies reactivas de oxígeno generadas por fuentes tanto endógenas
como exógenas pueden causar daño al ADN generando productos modificados,
como el radical hidroxilo causante de daño directo produciendo lesiones de cadena,
entrecruzamientos con proteínas o ciclaciones intramoleculares (Aranda et al.,
2022), una de las lesiones mutagénicas más estudiadas es la 8-oxoguanina
(Kasherman et al., 2021) porque la guanina es mayormente susceptible al ataque
de especies reactivas de oxígeno, y está asociado al cáncer y envejecimiento
prematuro (Hahm et al., 2022).
3.2. Antioxidantes
Los antioxidantes son compuestos que protegen a las células frente al daño
provocado por los radicales libres, su acción consiste en neutralizar estos radicales,
ayudando a prevenir del estrés oxidativo y sus efectos negativos en el organismo
(Rivera et al., 2024). Se pueden clasificar en:
5
Endógenos enzimáticos: Superóxido dismutasa (SOD), Catalasa (CAT),
Glutatión reductasa (GR), y la Glutatión peroxidasa (GPx).
Los ácidos fenólicos constituyen uno de los grupos más abundantes en las
plantas y su capacidad antioxidante está ampliamente confirmada. Los flavonoides
también actúan como compuestos antioxidantes, su estructura está conformada por
dos anillos aromáticos externos con tres anillos de carbono. Los taninos tienen la
capacidad de donar átomos de hidrógeno o electrones y de esa forma pueden
actuar como antioxidantes (Abeyrathne et al., 2022).
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Por su parte la organización mundial de la salud (OMS) ha publicado una lista
de bacterias conocidas como “ESKAPE” las cuales son: Enterococcus faecium,
Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumonae, Acinetobacter baumanni,
Pseudomonas aeruginosa, Enterobacter spp; estas son las responsables de la
mayoría de las infecciones nosocomiales (Zonta et al., 2020).
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3.4. Krameria cytisoides
3.4.1. Kramecina
8
En cuanto a sus propiedades físicas se reporta en la patente que es un sólido
vítreo de color café obscuro, su temperatura de descomposición es a los 172 °C y
es soluble en metanol, etanol y dimetilsulfóxido.
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4. MÉTODOS
10
La capacidad de captación de radicales (%RSA) de las muestras, tanto en el
método ABTS como en el DPPH, se calculó utilizando la siguiente fórmula, según
lo descrito por Palacios et al. (2014):
𝐴𝑐 − 𝐴𝑚
%𝑅𝑆𝐴 = ( ) ∗ 100
𝐴𝑐
Donde:
11
Las cepas microbianas se ajustaron a 0.5 de absorbancia de la escala de
McFarland (aproximadamente 1 ∗ 108 UFC/mL), de esta suspensión se añadieron
20 µL por pozo, excepto en los controles de esterilidad.
12
5. RESULTADOS
5.1. Evaluación de la capacidad antioxidante
50
40
30
20
10
0
0 2 4 6 8 10
Concentración de Trolox (µg/mL)
60
50 y = 3.7693x + 0.7037
R² = 0.996
40
%RSA
30
20
10
0
0 5 10 15 20
Concentración de Trolox (μg/m)
13
A partir de las curvas de calibración se determinó el 𝐼𝐶50 del Trolox, que
correspondió a 6.06 ± 0.09 µg/mL en DPPH y 18.33 ± 0.23 µg/mL en ABTS.
50
40
30
y = 1.6491x + 11.849
20
R² = 0.851
10
0
0 10 20 30 40 50
Concentración de kramecina (µg/mL)
100
90
80
70
60
%RSA
50
40
30
y = 0.4266x + 5.5666
20 R² = 0.983
10
0
0 50 100 150 200
Concentración de kramecina (µg/mL)
14
A partir de las Figuras 3 y 4 se determinó el 𝐼𝐶50 del kramecina para los dos
métodos siendo de 23.13 ± 0.58 µg/mL para DPPH y 104.16 ± 1.20 µg/mL para BTS.
Por otro lado, se determinaron los Equivalentes de Trolox (TE) que son una
medida utilizada para expresar la capacidad antioxidante total de una muestra
(Christodoulou et al., 2022)
La Tabla 1 resume los resultados obtenidos junto con los equivalentes de
Trolox para cada método.
Tabla 1. Capacidad antioxidante del compuesto kramecina evaluada por los métodos DPPH y
ABTS.
TE
𝑰𝑪𝟓𝟎 Compuesto 𝑰𝑪𝟓𝟎 Trolox
Método (µmol TE/g
(µg/mL) (µg/mL)
compuesto)
DPPH 23.13 ± 0.58 6.06 ± 0.09 815.26 ± 0.90
ABTS 104.16 ± 1.20 18.33 ± 0.23 15378.22 ± 1.31
15
Tabla 2. Concentración de kramecina requerida para inhibir el 50% del crecimiento de las cepas
Gram positivas
Concentración para inhibir el 50%
Bacterias Gram positivas
de crecimiento (µg/mL)
E. faecalis 25
S. aureus -
S. epidermidis -
Tabla 3. Concentración de kramecina requerida para inhibir el 50% del crecimiento de las cepas
Gram negativas
Concentración para inhibir el 50%
Bacterias Gram negativas
de crecimiento (µg/mL)
E. coli -
K. pneumoniae -
P. mirabilis 25
P. aeruginosa 200
S. typhi 25
S. dysenteriae 50
Tabla 4. Concentración de kramecina requerida para inhibir el 50% del crecimiento de las
levaduras
Concentración para inhibir el 50%
Levaduras
de crecimiento (µg/mL)
C. albicans -
C. glabrata -
C. krusei 200
C. tropicalis -
16
6. DISCUSIÓN
La capacidad antioxidante del compuesto kramecina aislado a partir de
Krameria cytisoides se evaluó mediante los métodos DPPH y ABTS, en DPPH
mostró un coeficiente de correlación (𝑅 2 =0.857) y un 𝐼𝐶50 de 23.13 µg/mL, mientras
que en ABTS presentó un coeficiente de correlación (𝑅 2 =0.983) y un 𝐼𝐶50 de 104.16
µg/mL. El valor del 𝐼𝐶50 en DPPH indica una alta actividad antioxidante mientras
que el mismo valor en ABTS corresponde a una actividad moderada (Fatmawaty et
al., 2019) a pesar de ser valores mayores en comparación con el Trolox (Tabla 1),
los resultados, especialmente en DPPH confirman un notable potencial como
agente antioxidante, así mismo, la capacidad expresada en equivalentes de Trolox
indican lo mismo (Rumpf et al., 2023).
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Por su parte kramecina no mostró actividad antimicrobiana comparable con
los controles positivos, la concentración de los controles positivos se determinó de
acuerdo con los MIC reportados en la literatura, Ciprofloxacino resulta tener una
buena susceptibilidad en concentraciones iguales o menores a 1 µg/mL (Esquivel
et al., 2024; Shealy et al., 2020), y para fluconazol se reporta un MIC igual o menor
a 8 µg/mL para diversas especies de Candida (incluyendo C. albicans, C. glabrata,
C. krusei y C. tropicalis), (Fahriye et al., 2022)
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7. CONCLUSIÓN
El presente proyecto evaluó la capacidad antioxidante y actividad
antimicrobiana del compuesto kramecina. Los resultados indicaron que el
compuesto posee una alta capacidad antioxidante evidenciada por un valor de 𝐼𝐶50
de 23.13 µg/mL y un coeficiente de determinación (𝑅 2 =0.857), esta capacidad se le
puede atribuir a la estructura del compuesto ya que presenta grupos hidroxilo que
podrían donar átomos de hidrógeno.
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