Proteínas
plasmáticas
Importancia biomédica
• El papel de la sangre en el mantenimiento de la
homeostasis.
• Cambios en concentraciones de proteínas
plasmáticas ocurre en varias patologías
• Proteínas plasmáticas están involucradas en
una serie de funciones celulares.
Sangre
Es un tejido que circula dentro de un sistema
virtualmente cerrado (vasos sanguíneos).
Funciones de la sangre
Bioquímica Ilustrada de Harper, 28 e
Sangre
• La volemia es de aproximadamente 5 litros en
función del sexo y del peso.
• Está compuesta de:
• Células (GR y GB), plaquetas, plasma,
proteínas plasmáticas, sustancias inorgánicas,
sustancias orgánicas, secreciones internas.
Sangre, suero y plasma
• Plasma: agua, electrolitos,
metabolitos, hormonas,
nutrientes y proteínas.
• No posee elementos celulares:
glóbulos rojos, glóbulos blancos y
plaquetas.
• Suero: No posee fibrinógeno.
Proteínas plasmáticas
Clasificación de acuerdo a su función
1. Proteínas con función de transporte y asociados a
sistemas buffer (amortiguadores).
2. Proteínas reactantes de fase aguda (se llaman así
porque en situaciones de estrés, procesos
inflamatorios o traumatismos aumentan su
concentración y así compensar esos estados).
3. Proteínas sintetizadas por el sistema
inmunocompetente.
Proteínas plasmáticas
(%)
Métodos para analizar/separar
proteínas plasmáticas
• Método “salting-out”: ante altas concentraciones
de sales, la solubilidad de las proteínas disminuye y
precipitan. (sulfato de amonio/sodio)
• Fibrinógeno, albúmina y globulinas.
• Electroforesis:migración de proteínas por acción
de un campo eléctrico
Electroforesis
• Es una técnica de laboratorio que permite la
separación física de moléculas basada en su
carga iónica.
• La magnitud y dirección de la migración depende
del pH y fuerza iónica del buffer, el voltaje, peso
molecular, carga eléctrica, tamaño de la proteína,
punto isoeléctrico de la proteína y tipo de soporte
a utilizar.
Proteínas plasmáticas
Muestra: suero libre de hemólisis
proteinograma por
electroforesis
Proteínas plasmáticas
Electroforesis
1. Albúmina
Electroforesis con
2. Fracción alfa 1
acetato de celulosa o
3. Fracción alfa 2 agarosa se observan
5 bandas
4. Fracción beta (1 y 2)
5. Fracción gamma
Proteínas plasmáticas
• El contenido de proteínas totales en plasma
depende de:
a) Estado nutricional
b) Función hepática
c) Función renal
d) Errores metabólicos
Síntesis de proteínas
plasmáticas
• La mayoría se sintetiza en hígado, otras en células
endoteliales.
• Las gamma globulinas en células plasmáticas.
• Son sintetizadas como preproteínas.
• Vía secretora: REr →REl→ aparato de Golgi→
vesícula secretora→ plasma
• Modificaciones postraduccionales: proteólisis,
glucosilación, fosforilación, etc.
Proteínas plasmáticas
Casi todas las proteínas plasmáticas son glucoproteínas
(excepto la albúmina), poseen oligosacáridos que
desempeñan muchas funciones:
1. Modulan solubilidad, viscosidad, carga eléctrica, conformación y
sitios de unión a bacterias y virus.
2. Protegen contra la proteólisis (desde el interior y exterior de la
célula)
3. Afectan la inserción en las membranas, migración intracelular,
clasificación y secreción.
Proteínas plasmáticas
• Muchas proteínas plasmáticas muestran
polimorfismo
• Polimorfismo: rasgo mendeliano o monogénico
que existe en la población en al menos dos
fenotipos, ninguno de los cuales es raro.
• alfa-1-antitripsina,haptoglobina, transferrina,
ceruloplasmina e inmunoglobulinas.
• De interés genético, antropológico y clínico.
Polimorfismo
• El polimorfismo genético hace referencia a la existencia
en una población de múltiples alelos de un gen. Es
decir, un polimorfismo es una variación en la secuencia
de un lugar determinado del ADN entre los individuos de
una población.
• Un gen es una secuencia de ADN que codifica para un
producto: un ARN o una proteína
• Un alelo es cada una de las formas alternativas que
puede tener un gen
Funciones de las proteínas
plasmáticas
Función Proteína plasmática
Antiquimotripsina, alfa1-antitripsina,
Antiproteasas
alfa2-macroglobulina, antitrombina
Coagulación sanguínea Factores de coagulación, fibrinógeno
•Función en sangre (facts de
Enzimas coagulación, colinesterasa)
•Células o tejidos (aminotransferasas)
Hormonas Eritropoyetina
Funciones de las proteínas
plasmáticas
Función Proteína plasmática
Inmunglobulinas, proteínas del
Defensa inmune
complemento, beta2-microglobulina
Proteínas de respuesta de fase
Respuesta inflamatoria aguda (proteína C reactiva, alfa1-
glucoproteína ácida)
Oncofetal alfa1-fetoproteína (AFP)
Transporte o unión
Funciones de las proteínas
plasmáticas
Función Proteína plasmática
• Albúmina
• Ceruloplasmina (contiene cobre)
• Transcortina o CBG: cortisol
• Haptoglobina: Hb extracorpuscular
•Lipoproteínas (QM, VLDL, LDL, HDL)
Transporte o unión •Hemopexina: grupo hemo
• RBP: retinol
• SHBP: testosterona, estradiol
•TBG: T4 y T3
•Transferrina: Fe
•Transtiretina: T4
Utilidad clínica
Algunas patologías modifican el perfil de la
electroforesis sobre acetato de celulosa o agarosa
7.0- 7.5
3.4- 4.7
Utilidad clínica
1. Inflamación aguda
Patologías donde hay
2. Inflamación crónica modificación en el perfil de
proteínas plasmáticas
3. Enfermedades hepáticas
4. Síndrome nefrótico
5. Hipogammaglobulinemia y agammaglobulinemia
6. Gammapatías monoclonales y biclonales
7. Pérdida de proteínas por el sistema digestivo
8. Disminución de la alfa 1- antitripsina
Proteínas de la fase aguda
• Involucradas en la respuesta del organismo a la
inflamación
• Estados inflamatorios agudos o crónicos (px con
cáncer) o daño tisular.
• ProteínaC reactiva activa la vía clásica del
complemento.
• alfa1-antitripsina neutraliza ciertas proteasas.
• Haptoglobina, alfa1-glucoproteína ácida y
fibrinógeno, alfa-2-macroglobulina y
ceruloplasmina
Proteínas de la fase aguda
• IL-1 es el principal estimulador de la síntesis por el
hepatocito. (también IL-6)
• IL-1 se produce en inflamación, infección y radiación.
• IL-1 estimula NF-kB que es un factor de
transcripción: síntesis de citoquinas, quimioquinas,
facts de crecimiento y moléculas de adhesión celular
involucrados en fenómenos inmunológicos.
PCR
De acuerdo con la American Heart Association (Asociación
Americana de Cardiología):
Bajo riesgo de desarrollar enfermedad cardiovascular si su
nivel de PCR de alta sensibilidad está por debajo de 1.0
mg/L.
Riesgo promedio de sufrir enfermedad cardiovascular si sus
niveles están entre 1.0 y 3.0 mg/L.
Alto riesgo de desarrollar enfermedad cardiovascular si su
nivel de PCR de alta sensibilidad está por encima de 3.0
mg/L.
Albúmina
• Principal proteína del plasma humano (3.4-4.7 g/dL)
• Mr= 69 kDa
• Hepatocitos producen 12 g/día
• Vida media de 20 días
• Funciones:
• Responsable del 75-80% de la presión oncótica del plasma
• Unión a varios ligandos: AG libres, Ca++, algunas Hh
esteroideas, transporte de Cu++ y Zn++, unión a fármacos
como sulfonamidas, penicilina G, dicumarol y aspirina
Albúmina
• La proteína madura consiste en una cadena de 585
AA y posee 17 puentes disulfuro
• Tiene una forma helicoidal (no produce cambios
importantes en la viscosidad del plasma)
• Función importante en el mantenimiento del volumen
sanguíneo y la distribución de fluidos corporales.
[Link]
mber=1
Albúmina
• No se encuentra glicosilada ni presenta otro tipo
de grupo prostético
• Presenta 67 % de alfa hélice y nada de hoja beta
plegada
• Se trata de una proteína monomérica con tres
dominios (I, II, III), que se dividen a su vez en
subdominios (a, b)
Albúmina
Albúmina: degradación
Albúmina: funciones
• Transporte
• Nutrición: reservorio de AA para la síntesis proteica
especialmente en ayuno
• Amortiguadora: balance ácido-base
• Viscosidad: en menor proporción
• BHE: complejos albúmina-AG no cruzan la BHE
Albúmina
• Disminuye en:
• inflamación aguda, infecciones bacterianas,
necrosis tisular, enfermedad hepática, desnutrición
proteica, quemaduras
• Aumenta en:
• deshidratación, en el LCR en meningitis bacteriana,
y trauma
Concentración de proteínas y la
presión coloidosmótica del plasma
Valores típicos de presión transcapilar para el movimiento de
fluidos en tejidos no encapsulados
Concentración de proteínas y la
presión coloidosmótica del plasma
• Determina la distribución de fluidos entre la sangre y los
tejidos.
• Si PNF es positiva, el mov de fluido se da desde el
capilar hacia el intersticio
• Si PNF es negativa, el mov se da desde intersticio al
capilar
• ¿Qué sucede si disminuye la concentración de proteínas
plasmáticas?
• Ejemplo: Desnutrición proteica, insuficiencia hepática o
renal
Haptoglobina
• Glucoproteína que se une a la Hb
extracorpuscular, evita que la Hb libre entre al
riñón (conserva el Fe).
• De la Hb degradada por día, el 10% es liberada a
circulación y el 90% restante permanece en los
RBCs senescentes.
• Concentración: 40-180 mg de capacidad de unión a
Hb libre por cada dL.
• Vida media de 5 días
Haptoglobina
Bajos niveles se encuentran en px con anemia hemolítica, la
vida media del complejo Hb-Hp es de 90 min.
Su concentración plasmática está elevada en estados
inflamatorios.
Transporte del hierro
• Transferrina transporta el hierro por todo el
organismo hasta sitios donde se requiere.
• El hierro está presente en Hb, Mb, y
citocromos.
• En la dieta se ingiere hierro hémico y no
hémico.
Revisar metabolismo del hierro
Metabolismo del hierro
Absorción del hierro
HT: transportador hemo, HO: hemo oxidasa, FP: transportador de
Fe+2, TF: transferrina, HP: hefaestina, DMT: transportador de
metales divalentes
Metabolismo de Hierro
Metabolismo del hierro
Hepcidina
• Peptido de 25 aminoacidos
• Se une a la ferroportina.
• Causa internalización de la ferroportina
• Anemia inflamatoria o cronica
• Sintetizada en el Higado
Distribución del hierro
Transferrina (Tf)
• Es una beta-2-globulina
• Mr aprox de 76 kDa
• Glucoproteína que se sintetiza en el hígado
• Alrededor de 20 formas polimórficas de Tf
• Transporta 2 moles de Fe+3 por cada mol de Tf en
circulación
Receptores de Tf
• Hay receptores de Tf sobre la superficie de la
célula: TfR1 y TfR2
• La Tf se une a estos receptores y se internaliza por
medio de endocitosis mediada por receptor
• pH ácido hace que el Fe se disocie de la proteína
Cuál es el papel de los receptores solubles de Tf
como indicador bioquímico de deficiencia de
hierro?
Anemia por deficiencia de
hierro
• Hierro es importante en mujeres, embarazo, y
adultos mayores
• Anemia debido a ingestión inadecuada, utilización
inapropiada o pérdida excesiva de hierro es una
enfermedad prevalente.
• Enfermedad de gran prevalencia
Anemia por deficiencia de
hierro
• Conc de transferrina es de 300mg/dL (300 ug
Fe/dL, capacidad de unión de hierro total del
plasma).
• En anemia, la proteína está menos saturada
En condiciones de almacenamiento excesivo de
Fe (hemocromatosis), la saturación es mucho
mayor que 1/3.
Almacén de hierro
Ferritina: Apoferritina + hierro
• La ferritina está compuesta de 24 subunidades de
18.5 kDa
• Contiene aprox 23 % de hierro
• En condiciones normales, hay poca ferritina en el
plasma (aumenta en pacientes con hierro excesivo)
Relación recíproca entre la síntesis de ferritina y la síntesis del receptor de transferrina
Cuando las cifras de Fe
son altas, se sintetiza
ferritina (NO TfR)
Cuando las cifras de Fe
son bajas, NO se
sintetiza ferritina (sí TfR)
Ceruloplasmina
• Es una alfa-2-globulina, de 160 kDa.
• Posee actividad oxidasa dependiente de cobre
• Transporta el 90% de cobre presente en plasma
(10% albúmina).
• Cada molécula de ceruloplasmina une 6 átomos de
Cu (fuertemente, no es fácilmente
intercambiable).
• Su concentración plasmática está disminuida en
enfermedad hepática
Ceruloplasmina
Patologías relacionadas
Metabolismo anormal del Cu:
• Enfermedad de Wilson: (degeneración
hepatolenticular) y
• Enfermedad de Menkes.
Metabolismo del cobre
• El Cu es un elemento traza esencial.
• Es cofactor de varias enzimas: respiración celular
(citocromo oxidasa), homeostasis del Fe
(ceruloplasmina), formación de melanina
(tirosinasa), producción de neurotransmisores,
síntesis de tejido conectivo (lisil oxidasa), y
protección contra oxidantes (superóxido dismutasa).
Metabolismo del cobre
• Exceso de Cu puede oxidar proteínas y lípidos,
unirse a ácidos nucleicos, y estimular la
producción de radicales libres.
• En un adulto, la concentración normal de Cu es
100 mg (hueso, hígado, riñón, y mm)
• La ingesta diaria de Cu es aprox 2-4 mg, 50% es
absorbido en estómago e intestino delgado, es
excretado en bilis y muy poco en orina
Metabolismo del cobre
Enfermedad de Wilson
• Enfermedad genética (mutación en el gen ATP7B, cr
13), fallo en la excreción del cobre y se acumula en
hígado, cerebro, riñón y GR.
• Toxicosis de cobre
• Anemia hemolítica, IHC (cirrosis, hepatitis), y Sd
neurológico en los ganglios basales y otros centros.
• Anillo de Kayser-Fleischer
• Dx: 250 g Cu/g en peso seco con un nivel plasmático de
ceruloplasmina inferior a 20 mg/dL
Enfermedad de Wilson
Enfermedad de Menkes
• Herencia recesiva ligada al cromosoma X.
• Afecta SN, tejido conectivo y sistema vascular.
• Mutación en el gen ATP7A: ATPasa responsable de
la salida directa de Cu de la célula.
• Acumulación de Cu en el intestino, disminución de la
actividad de enzimas dependientes de Cu
El defecto le dificulta al cuerpo la distribución y absorción
apropiada del cobre.
Enfermedad de Menkes
Alfa1-antiproteasa (alfa1-
antitripsina)
• Mayor componente de la fracción alfa-1 del plasma.
• Sintetizada por hepatocitos y macrófagos.
• Principal inhibidor de serin proteasas plasmática (serpina o
Pi)
• Enfisema: bajos niveles de la proteína
Alfa1-antiproteasa (alfa1-
antitripsina)
• Es una proteína de una sola cadena de 394 AA que
contiene tres cadenas de oligosacárido
• Inhibe la tripsina, elastasa y algunas otras proteasas
(principal inhibidor serin proteasa del plasm)
• Hay por lo menos 75 formas polimórficas
• El principal genotipo es MM y su producto fenotípico es
PiM
Alfa1-antiproteasa (alfa1-
antitripsina)
• Cuando la cantidad de proteína es deficiente y las
cels blancas PMN aumentan en el pulmón (durante
neumonia), el individuo afectado carece de un
mecanismo adecuado que restrinja el daño
proteolítico en el pulmón.
• El fumado oxida la metionina a metionina sulfóxido y
la inactiva. Como resultado, las moléculas afectadas
de alfa1-antitripsina no neutralizan la elastasa. Este
efecto es devastador en px (fenotipo PiZZ) que ya
tienen bajos niveles de la proteína.
Alfa-2-
macroglobulina
• Glucoproteína 720 kDa, 8-
10% del total de proteínas
plasmáticas.
• Transporta aprox el 10%
del zinc en plasma (el
restante por la albúmina).
• Es sintetizada por
hepatocitos, monocitos y
astrocitos.
Alfa-2-macroglobulina
• Posee un enlace tiol interno (entre cisteína y
glutamina).
• Este enlace es altamente reactivo y está involucrado
en algunas acciones biológicas de la proteína.
Alfa-2-macroglobulina
• Se une a varias proteinasas, citoquinas (factor
de crecimiento derivado de plaquetas, TGF-
beta, etc.) y las dirige hacia células o tejidos
específicos donde se disocian y pueden ejercer
sus acciones biológicas.
Amiloidosis
• Acumulación de proteínas fibrilares insolubles
entre las células.
• Aumento en la producción de proteínas o
acumulación de formas mutantes de otras.
• Uno o varios órganos pueden ser afectados (sitios
y extensión de la deposición)
Amiloidosis
Amiloidosis
Tratamientos van dirigidos a:
• Prevenir la producción de proteínas
precursoras.
• Estabilización de la estructura de proteínas
precursoras (láminas).
• Desestabilización de fibrillas amiloides
(reconversión en conformaciones normales).