.
Informe de lab. Microbiología Industrial Fecha: 15/10/2025
CONTROL DE MICROORGANIMOS:
AGENTES QUIMICOS Y FISICOS
Grupo 6 miércoles 4-6 PM:
Joham Sebastián Arrieta Castillo. ID: 1103099172
Luis Esteban Alvis Sierra. ID: 1103497992
Luis Carlos Pianeta Bertel. ID: 1193089406
Marlon Andrés Tamara Pérez. ID: 1131105408
Departamento de Ingeniería, Universidad de Sucre, Sincelejo, Colombia
INTRODUCCIÓN
Como es ampliamente reconocido, los microorganismos poseen la capacidad no solo de subsistir, sino también
de proliferar en entornos con condiciones físicas y químicas muy diversas [1]. Sin embargo, existen condiciones
limitantes y específicas que estos pueden soportar para mantenerse viables. En ambientes naturales, las
fluctuaciones en las condiciones del medio ejercen efectos inhibitorios e incluso letales sobre una fracción de
la comunidad microbiana. La proporción de microflora que compone cada una de estas categorías depende,
parcialmente, de la intensidad de los factores físico-químicos [2].
La actividad metabólica de un organismo es el resultado de sus reacciones químicas internas, y dado que el
curso de estas reacciones está determinado por la temperatura, los procesos vitales se hallan igualmente
influenciados por este factor [1]. Cada especie bacteriana presenta un rango de temperatura específico para su
desarrollo. Con base en este criterio, las bacterias se clasifican en: Psicrófilos (se desarrollan a 0°C o menos),
Mesófilas (crecimiento óptimo entre 25-40°C) y Termófilas [1], [2]. Cada uno de estos tipos presenta una
temperatura mínima, óptima y máxima para su crecimiento. Las temperaturas que superan el máximo ejercen
un efecto letal, mientras que las que están por debajo del mínimo tienen un efecto estático, incluso si se produce
la muerte de algunas células en la población [3].
1. OBJETIVOS
1.1 OBJETIVO GENERAL
Evaluar el efecto de los agentes físicos y químicos en los microorganismos.
1.2 OBJETIVOS ESPECIFICOS
Diferenciar cada uno de los métodos existentes para el control de los microorganismos.
Distinguir el control mediante empleo de agentes químicos y agentes físicos.
1
.
2. MARCO TEORICO
En el ámbito de la microbiología industrial, especialmente dentro de la agroindustria, controlar el crecimiento
de microorganismos no es solo un procedimiento de laboratorio, sino una necesidad práctica para asegurar la
calidad e inocuidad de los productos [4]. Para lograrlo, utilizamos dos grandes tipos de herramientas: los
agentes físicos y los químicos. Los agentes físicos, como el calor, actúan de manera directa; por ejemplo, al
aplicar altas temperaturas, las proteínas y enzimas bacterianas se desnaturalizan, lo que puede llegar a eliminar
los microorganismos o, en otros casos, simplemente detener su multiplicación [5]. Otro factor físico clave es la
presión osmótica; cuando sumergimos células en un medio con alta concentración de azúcar o sal, el agua
dentro de ellas sale hacia afuera, se deshidratan y dejan de crecer, un fenómeno conocido como plasmólisis [6].
Por su parte, los agentes químicos, como los desinfectantes y los antibióticos, son como "llaves" que interfieren
en procesos vitales de los microbios. Pueden dañar su membrana celular, impedir que formen su pared
protectora o bloquear su metabolismo, y es justamente esta acción la que visualizamos como un halo de
inhibición alrededor de un disco en una placa de cultivo [7], [8].
Finalmente, el pH del medio donde crecen también es decisivo; un ambiente demasiado ácido o alcalino puede
ser inhóspito para la mayoría, alterando su funcionamiento interno y limitando su desarrollo [5]. Dominar el
uso combinado de estos métodos nos permite no solo trabajar con seguridad en el laboratorio, sino también
diseñar procesos industriales más eficientes y confiables.
3. METODOLOGIA Y PROCEDIMIENTO
2
.
4. RESULTADOS Y ANALISIS
4.1 RESULTADOS
Tablas de datos
Cambio de la presión osmótica
Medio Turbidez Descripción Evidencia
NaCL 5% Existe, pero no Se observa algo turbio,
destaca indicando que E. coli
crece en bajas
concentraciones de sal,
aunque menos que en
condiciones normales.
NaCL 15% No El líquido está
transparente, sin
turbidez. La alta
salinidad impide el
crecimiento porque la
célula pierde agua
NaCL 20% No El tubo permanece claro,
sin crecimiento. La
presión osmótica es muy
alta, el agua sale de las
células y E. coli muere.
3
.
Cambio en la temperatura y el tiempo de exposición
Medio 5min 20min Evidencia
4°C No existe turbidez No existe turbidez por lo
cual no hay crecimiento
bacteriano
37°C Si existe turbidez Si existe turbidez, por lo
que hay un crecimiento
microbiano normal
100°C No existe turbidez No hay crecimiento
bacteriano, las altas
temperaturas eliminan las
bacterias
4
.
Acción de antibióticos
Medio Crecimiento Descripción Evidencia (Cuadrantes)
Antibiótico 1 Sí, se observa E. coli es sensible al
(Streptomycin) una zona de antibiótico, lo que
inhibición clara. significa que su
Medida (9mm) crecimiento se detiene.
Se nota un halo amplio
alrededor del disco de
antibiótico.
Antibiótico 2 No, la zona de Hay poca o ninguna
(Erithromycin) inhibición es inhibición, lo que
pequeña o indica que E. coli
inexistente. presenta resistencia
parcial o total al
antibiótico. El halo es
muy pequeño o no
aparece.
Antibiótico 3 Sí, con una zona E. coli es muy sensible,
(Gentamycin) de inhibición el antibiótico actúa con
grande. gran eficacia,
Medida (10mm) generando un halo bien
definido y amplio.
Antibiótico 4 No, la zona de Hay poca o ninguna
(Kanamicyn) inhibición es inhibición, lo que
pequeña o indica que E. coli
inexistente. presenta resistencia
parcial o total al
antibiótico.
5
.
Cambio en el pH
Medio (pH) Turbidez Descripción Evidencia
4 Existe, pero es casi A este pH ácido, el crecimiento
nula bacteriano es muy limitado. Se
observa poca o casi ninguna
turbidez debido a que el
ambiente no es favorable para
el desarrollo de E. coli.
7 Existe, se nota la El pH neutro favorece el
turbidez crecimiento óptimo de E. coli,
por lo que se observa una
turbidez evidente en el medio.
Indica una alta actividad
microbiana y buena adaptación
al medio.
9 No existe, se ve el En este pH alcalino, no hay
tubo sin turbidez crecimiento visible. El medio
alguna permanece claro, lo que indica
que las condiciones son
demasiado básicas para el
desarrollo de E. coli.
6
.
4.2 ANALISIS
Efecto de la Presión Osmótica
El crecimiento observado en la concentración de NaCl al 5% demuestra la capacidad de E. coli para
realizar osmoregulación efectiva en ambientes hipotónicos moderados. Las bacterias Gram-negativas como E.
coli poseen mecanismos de transporte iónico y acumulación de solutos compatibles (como prolina y glicina
betaína) que les permiten mantener el equilibrio hídrico. Sin embargo, el crecimiento reducido indica un estrés
osmótico significativo, donde parte de la energía metabólica se desvía hacia procesos de homeostasis en lugar
de crecimiento.
En contraste, la ausencia total de crecimiento a concentraciones del 15% y 20% revela el colapso de los
mecanismos de adaptación. A estas concentraciones hipertónicas, la pérdida masiva de agua celular mediante
ósmosis conduce a la plasmólisis irreversible, donde la membrana citoplasmática se separa de la pared celular,
causando daños estructurales irreparables y la muerte celular. Esto explica por qué medios con alta
concentración salina son efectivos para conservar alimentos.
Efecto de la Temperatura
Los resultados a diferentes temperaturas ilustran perfectamente el principio de los tres puntos cardinales en
el crecimiento microbiano:
A 4°C, aunque no hay muerte inmediata, el efecto estático es evidente. Las reacciones enzimáticas de E. coli,
optimizadas para alrededor de 37°C, se vuelven extremadamente lentas, paralizando el metabolismo. Las
membranas celulares pierden fluidez, dificultando el transporte de nutrientes.
El crecimiento óptimo a 37°C confirma la naturaleza mesófila estricta de E. coli, donde todas sus enzimas y
sistemas de membrana funcionan en su máxima eficiencia.
La letalidad inmediata a 100°C, incluso en exposiciones cortas, se explica por la desnaturalización masiva
de proteínas y la fusión de membranas lipídicas. Este efecto es irreversible y convierte a la temperatura en el
agente físico más confiable para esterilización.
Antibiograma
Los resultados del antibiograma revelan información crucial sobre los mecanismos de acción antibiótica y
la fisiología de E. coli:
Streptomicina:
Diámetro medido: 9 mm → Diámetro corregido = 9 mm - 5 mm = 4 mm
Este aminoglucósido ejerce su acción mediante la unión irreversible a la subunidad 30S del ribosoma
bacteriano, causando una lectura errónea del mRNA y la producción de proteínas no funcionales. El diámetro
moderado del halo sugiere una sensibilidad intermedia, posiblemente relacionada con la actividad de bombas
de eflujo o enzimas modificadoras.
7
.
Gentamicina:
Diámetro medido: 10 mm → Diámetro corregido = 10 mm - 5 mm = 5 mm
Como aminoglucósido de espectro amplio, muestra mayor efectividad que la estreptomicina contra esta cepa
de E. coli. Su mecanismo de acción similar, pero con mejor penetración a través de la membrana externa de
bacterias Gram-negativas explica el halo más grande.
Resistencia a Eritromicina y Kanamicina:
La resistencia a eritromicina (macrólido) es esperable en E. coli, ya que su membrana externa es naturalmente
impermeable a macrólidos y posee genes de resistencia constitutivos. La resistencia a kanamicina sugiere la
posible presencia de enzimas modificantes de aminoglucósidos (AME), particularmente comunes en cepas
ambientales de E. coli.
Efecto del pH
El perfil de crecimiento en función del pH refleja la especificidad enzimática de E. coli:
En pH 4, el ambiente ácido provoca la inundación de protones en el citoplasma, superando la capacidad de
los sistemas tampón celulares. Esto altera el gradiente de protones esencial para la síntesis de ATP y el
transporte de nutrientes, limitando severamente el crecimiento.
El pH 7 representa el óptimo fisiológico donde las enzimas clave del metabolismo energético y biosintético
operan con máxima eficiencia.
En pH 9, el ambiente alcalino afecta la carga neta de las proteínas y puede alterar la estructura de la
membrana celular. Además, interfiere con el transporte de hierro y otros micronutrientes esenciales, explicando
la inhibición completa del crecimiento.
5. CONCLUSION
Esta práctica nos permitió visualizar de manera tangible cómo los microorganismos, a pesar de su asombrosa
capacidad de adaptación, poseen límites fisiológicos claros que pueden ser aprovechados para su control.
Comprobamos que la presión osmótica elevada actúa como un deshidratador celular, provocando que las
bacterias pierdan agua vital hasta inhibir por completo su crecimiento.
Asimismo, confirmamos que la temperatura no solo regula su velocidad de desarrollo, sino que, en extremos,
resulta letal al desnaturalizar irreversiblemente sus proteínas y estructuras celulares. El pH, por su parte, se
reveló como un factor determinante: un ambiente neutro favorece el crecimiento óptimo, mientras que
condiciones ácidas o alcalinas alteran su equilibrio interno y suprimen la actividad metabólica.
Finalmente, el antibiograma nos ofreció una lección práctica de gran relevancia: la efectividad de los
antibióticos es específica y variable. Mientras algunos logran inhibir el crecimiento mediante la interrupción de
procesos vitales como la síntesis de proteínas interfiriendo, por ejemplo, con el mRNA bacteriano, otros
8
.
encuentran resistencia, lo que subraya la necesidad de un uso racional y dirigido de estos compuestos. En
conjunto, estos resultados enfatizan que el control microbiano efectivo se basa en comprender y aplicar de
forma estratégica los principios que gobiernan su supervivencia y crecimiento.
6. CUESTIONARIO
¿Cuál es el mecanismo osmótico en la célula microbiana?
El mecanismo osmótico es la forma en que la célula regula su contenido de agua para mantener su forma y
funcionamiento interno.
En un medio con baja concentración de sal/azúcar (Hipotónico): El agua del entorno entra en la célula por
ósmosis. Las bacterias tienen una pared celular rígida que les impide reventar, pero esto genera una presión
interna (presión de turgencia) que es vital para ellas.
En un medio con alta concentración de sal/azúcar (Hipertónico): Esto es lo que probamos con el NaCl al
15% y 20%. El agua dentro de la célula sale hacia el entorno más concentrado. La célula se deshidrata, la
membrana se separa de la pared celular en un proceso llamado plasmólisis. Sin agua, las reacciones metabólicas
se detienen y la célula no puede crecer (efecto estático) o muere (efecto letal).
¿Cuál es el efecto de la temperatura, pH, químico como agentes externos del ecosistema microbiano?
Estos factores actúan como "interruptores" o "venenos" para los microbios, alterando su entorno y su
maquinaria interna.
Temperatura:
Bajas (Ej: 4°C): Disminuyen la velocidad de las reacciones químicas internas. El metabolismo se vuelve muy
lento, entrando en un estado de "hibernación" o efecto estático. No mueren todas, pero no pueden crecer.
Óptimas (Ej: 37°C para E. coli): Permiten la máxima eficiencia de las enzimas y, por lo tanto, un crecimiento
rápido.
Altas (Ej: 60-100°C): Desnaturalizan las proteínas y enzimas. Es como "cocer" la bacteria. Las proteínas
pierden su forma y dejan de funcionar, lo que lleva a la muerte celular (efecto letal).
pH:
Óptimo (Neutro, para la mayoría): Las enzimas trabajan con máxima eficiencia.
Extremos (Ácido o Alcalino): Alteran la carga eléctrica de las proteínas y enzimas, impidiendo que
funcionen correctamente. También dañan la membrana celular y dificultan el transporte de
nutrientes, inhibiendo el crecimiento.
Agentes Químicos (Desinfectantes, Antibióticos):
Su efecto varía, pero generalmente dañan estructuras clave. Pueden:
Destruir la membrana celular (como algunos desinfectantes).
Inactivar enzimas esenciales.
Interferir con la síntesis de la pared celular o de proteínas (como los antibióticos que usamos).
9
.
¿Explique el mecanismo de acción de los antibióticos usados en la práctica?
Basándonos en los antibióticos mencionados en el análisis (Streptomycin, Gentamicin, Erythromycin,
Kanamycin), aquí están sus mecanismos:
Streptomycin y Gentamicin (Aminoglucósidos):
Mecanismo: Se unen de forma irreversible a la subunidad 30S del ribosoma bacteriano.
Consecuencia: Esto provoca que el ribosoma lea mal el código del mRNA (el mensaje genético). Como
resultado, la bacteria produce proteínas defectuosas y no funcionales. Sin proteínas vitales, la bacteria no
puede sobrevivir. Es un efecto letal.
Erythromycin (Macrólido):
Mecanismo: Se une a la subunidad 50S del ribosoma bacteriano.
Consecuencia: Bloquea el "túnel" por donde la cadena de proteína en crecimiento va saliendo del ribosoma.
Esto detiene la síntesis de proteínas (efecto estático). La bacteria no puede fabricar nuevas proteínas para
crecer o reproducirse.
Kanamycin (Aminoglucósido):
Mecanismo: Es similar al de la Streptomycin y Gentamicin (también se une a la subunidad 30S del ribosoma),
pero su efectividad depende de la capacidad de entrar en la bacteria.
Consecuencia en nuestra práctica: La resistencia que observamos (sin halo de inhibición) se explica
porque E. coli a menudo posee enzimas especiales (enzimas modificantes) que atacan y desactivan este
antibiótico antes de que pueda llegar a su objetivo (el ribosoma).
7. REFERENCIAS
[1] J. M. Willey, K. S. Bender, C. J. Woolverton y L. M. Sherwood, Prescott's Microbiology, 12th ed. New
York, NY, USA: McGraw-Hill Education, 2019.
[2] M. T. Madigan, K. S. Bender, D. H. Buckley, W. M. Sattley y D. A. Stahl, Brock Biology of
Microorganisms, 16th ed. London, UK: Pearson, 2021.
[3] A. O. Summers, "Microbial life in extreme temperatures," Annu. Rev. Microbiol., vol. 63, pp. 1–20, Oct.
2009.
[4] G. J. Luna, Manual operativo de Análisis Microbiológicos para alimentos. Bogotá, Colombia: Fondo
Editorial Fundación Universidad de Bogotá Jorge Tadeo Lozano, 1994.
[5] T. D. Brock, Microbiología, 6ª ed. México: Prentice Hall Hispanoamericana S.A., 1991.
[6] E. G. B. et al., Microbiología Médica, 17ª ed. México: Manual Moderno, 2001.
[7] E. W. Koneman, Diagnóstico Microbiológico. México: Editorial Médica Panamericana, 1990.
[8] Manual de Medios de Cultivo. Merck, 2006.
10