UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA Bioquímica
“AÑO DE LA UNIDAD, LA PAZ Y EL DESARROLLO”
UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA
SALUD
ESCUELA PROFESIONAL DE
ENFERMERIA
ANÁLISIS DE SANGRE: PERFIL LIPÍDICO
CURSO: Bioquímica
DOCENTE: Dra. Samame Talledo, Belinda Elvira
CICLO: 2023-II
ALUMNA: Valladolid Checa, Patricia Maribel
PIURA – PERÚ
2023
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UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA Bioquímica
ÍNDICE:
I. INTRODUCCIÓN ........................................................................................................................ 3
II. OBJETIVOS:................................................................................................................................ 3
3.1 FUNDAMENTO DEL MÉTODO ............................................................................................. 4
3.2 MATERIALES ........................................................................................................................... 4
3.3 EQUIPOS ................................................................................................................................... 4
3.4 REACTIVOS.............................................................................................................................. 4
3.5 PROCEDIMIENTO ................................................................................................................... 5
3.6 CÁLCULO DE LOS RESULTADOS ....................................................................................... 5
3.7 VALORES NORMALES ........................................................................................................... 5
IV. DETERMINACIÓN DE HDL ..................................................................................................... 5
4.1 FUNDAMENTOS DEL MÉTODO ........................................................................................... 5
4.2 MATERIALES ........................................................................................................................... 6
4.3 EQUIPOS ................................................................................................................................... 6
4.4 REACTIVOS.............................................................................................................................. 6
4.5 PROCEDIMIENTO ................................................................................................................... 6
4.6 CÁLCULO DE LOS RESULTADOS ....................................................................................... 7
4.7 VALORES NORMALES ........................................................................................................... 7
V. DETERMINACIÓN DEL LDL ................................................................................................... 7
5.1 FUNDAMENTO DEL MÉTODO ............................................................................................. 7
5.2 MATERIALES ........................................................................................................................... 7
5.3 EQUIPOS ................................................................................................................................... 7
5.4 REACTIVOS.............................................................................................................................. 8
5.5 PROCEDIMIENTO ................................................................................................................... 8
5.6 CALCULO DE LOS RESULTADOS ....................................................................................... 8
5.7 VAROLES NORMALES ........................................................................................................... 8
VI. CONCLUSIONES:....................................................................................................................... 9
VII. CUESTIONARIO: ..................................................................................................................... 10
VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS: ...................................................................................... 15
IX. RECURSOS: .............................................................................................................................. 16
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LABORATORIO N.º 07
ANÁLISIS DE SANGRE: PERFIL LIPÍDICO
I. INTRODUCCIÓN
Los lípidos son un grupo de grasas que son parte importante de las células y
fuentes de energía de nuestro cuerpo. Un perfil lipídico o lipidograma mide el nivel de
lípidos específicos en la sangre.
El colesterol y los triglicéridos son dos importantes tipos de lípidos que por
su naturaleza grasa no pueden mezclarse en la sangre y ser transportados por sí solos. Por
ello, necesitan de proteínas para transportarse de un lado a otro, llamadas lipoproteínas.
En un perfil lipídico, se miden algunas de estas proteínas de acuerdo a su
densidad. Por ello, en tus resultados, verás términos como lipoproteínas de alta densidad
(HDL), lipoproteínas de baja densidad (LDL) y lipoproteínas de muy baja densidad
(VLDL). A las dos primeras, se les conoce popularmente como Colesterol HDL o y
Colesterol LDL.
Es utilizado para evaluar el riesgo de desarrollar una enfermedad
cardiovascular producto de un trastorno en el metabolismo de lípidos. En esta alteración
contribuyen hábitos poco saludables (dieta, sedentarismo, cigarrillo, alcohol) en personas
susceptibles genéticamente.
II. OBJETIVOS:
• Conocer los niveles de lípidos en la sangre, incluyendo colesterol total, colesterol
LDL, colesterol HDL y triglicéridos.
• Utilizar los resultados para evaluar el riesgo cardiovascular, esto implica analizar los
niveles de colesterol LDL ("colesterol malo") y colesterol HDL ("colesterol bueno")
para determinar la propensión a enfermedades cardíacas
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III. PERFIL LIPÍDICO
3.1 FUNDAMENTO DEL MÉTODO
La secuencia reaccional es la siguiente:
Esteres del colesterol CHE colesterol + ácidos grasos
Colesterol + O2CHOD colesten – 3- ona + H2O2
H2O2 + 4 – AF + aceptor POD quinonimina roja
3.2 MATERIALES
• Material para toma de muestra.
• Tubo de ensayo.
• Gradillas.
• Pipetas automáticas.
• Pipetas de 5ml.
3.3 EQUIPOS
• Baño María.
• Espectrofotómetros.
• Centrífuga.
3.4 REACTIVOS
• STANDARD: Solución Colesterol.
• ENZIMAS: Colesterol Esterasa (CHE).
✓ Colesterol Oxidasa (CHOD).
✓ Peroxidasa (POD).
✓ 4 aminofenaza (4 – AF).
• BUFFER: Solución Buffer pH 6.8 contenido Fenol y Colato de Sodio.
• REACTIVO DE TRABAJO: Reconstruir el contenido de una vial de enzimas con
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una parte de enzimas con una parte de Buffer. Transferir al frasco de Buffer
enjuagando varias veces el vial con el mismo. Mezclar hasta disolución completa.
Homogenizar y usar.
3.5 PROCEDIMIENTO
Entre tubos de ensayo, colocar:
B S D
Estándar ---------- 30 µl -----------
Muestra ---------- ----------- 30 µl
Rvo. de trabajo de 3ml 3ml 3ml
colesterol
Incubar 5 minutos en Baño María a 37ºC.
Leer en Espectrofotómetro a 505 nm, llevando el aparato a cero con el blanco.
3.6 CÁLCULO DE LOS RESULTADOS
Colesterol mg%: Abs.D x Factor
FACTOR:(200 mg%)
3.7 VALORES NORMALES
➢ 170 – 240 mg%
RESULTADOS
❖ COLESTEROL TOTAL: 540.5
❖ COLESTEROL HDL:123.5
❖ COLESTEROL LDL: 168.6
IV. DETERMINACIÓN DE HDL
4.1 FUNDAMENTOS DEL MÉTODO
Las lipoproteínas de alta densidad (HDL) se separan precipitando selectivamente las
lipoproteínas de baja densidad y muy baja densidad (LDL Y VLDL) mediante el
agregado de Sulfato de Dextrán de PM 50.000 en presencia de iones Mg++.
En el sobrenadante separador por centrifugación, quedan las HDL y se realiza la
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determinación del colesterol ligado a las mismas.
4.2 MATERIALES
• Material para toma de muestra.
• Tubos de ensayo.
• Gradilla.
• Pipetas de 1 ml.
• Micropipetas.
4.3 EQUIPOS
• Espectrofotómetro.
• Centrífuga.
4.4 REACTIVOS
• REACTIVO DEXTRÁN: Solución de sulfato de Dextrán.
• REACTIVO MAGNESIO: Solución de cloruro de magnesio.
• REACTIVO DE TRABAJO DE COLESTEROL ENZIMÁTICO.
4.5 PROCEDIMIENTO
En un tubo de ensayo, colocar:
• 01 ml de muestra + 100 µl de Reactivo Precipitante.
• Homogenizar agitando durante segundos.
• Dejar 30 minutos en el refrigerador.
• Centrifugar 15 minutos a 3000 rpm.
Extraer el sobrenadante límpido y usarlo como muestra en el siguiente procedimiento:
En tres tubos de ensayo, colocar:
B S D
Sobrenadante ----------- --------- 150 µl
Estándar ----------- 30 µl ---------
Rvo. de trabajo de 3 ml 3ml 3 ml
colesterol
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Mezclar e incubar durante 15 minutos a 37ºC.
Retirar del baño y enfriar.
Leer a 505 nm en espectrofotómetro, llevando a cero con el blanco.
4.6 CÁLCULO DE LOS RESULTADOS
➢ HDL colesterol mg% = Abs.D x F
4.7 VALORES NORMALES
Hombre: 30 – 70 mg%
Mujer: 30 – 85 mg%
V. DETERMINACIÓN DEL LDL
5.1 FUNDAMENTO DEL MÉTODO
Las lipoproteínas de baja densidad se separan del suelo, precipitándolas selectivamente
mediante el agregado de polímeros de alto peso molecular.
Luego de centrifugar, en el sobrenadante quedan las demás lipoproteínas (HDL Y
VLDL); el colesterol Oxidasa / Peroxidasa con colorimetría según Trinder (Fenol / 4 –
AF).
Por diferencia entre el colesterol total y el determinado en el sobrenadante, se obtiene el
colesterol unido a las LDL.
5.2 MATERIALES
• Tubos de ensayo de 10 x 75.
• Gradilla.
• Pipetas de 1 ml.
• Pipetas de 5 ml.
• Micropipetas.
5.3 EQUIPOS
• Centrifuga.
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• Espectrofotómetro.
5.4 REACTIVOS
• REACTIVO PRECIPITANTE: Solución de sulfato de polvinito disuelto en
plolitilenglicol.
• REACTIVO DE TRABAJO DE COLESTEROL.
5.5 PROCEDIMIENTO
✓ En un tubo de ensayo, colocar:
✓ Muestra: 400 µl.
✓ Reactivo Precipitante: 200 µl.
✓ Homogenizar agitando durante 20 segundos y dejar 15 minutos en BAÑO MARÍA a
0º – 25ºC.
✓ Centrifugar15 minutos a 300 r.p.m.
✓ Usar el sobrenadante como muestra para el siguiente procedimiento:
B S D
Sobrenadante ----------- --------- 150 µl
Estándar ----------- 30 µl ---------
Rvo. de trabajo de 3 ml 3ml 3 ml
colesterol
Mezclar e incubar 15 minutos a 37ºC. Retirar del Baño María y dejar enfriar.
Leer en espectrofotómetro a 505 nm llevando el aparato a cero con el blanco.
5.6 CALCULO DE LOS RESULTADOS
F = 168.6
LDL Colesterol mg% = Colesterol Total – (D x F)
LDL = 254 – (0.58 X 168.6)
LDL = 254 – 97.7
LDL = 156 mg%
5.7 VAROLES NORMALES
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➢ Menos de 140 mg%
VI. CONCLUSIONES:
• Un perfil lipídico proporciona información crucial sobre los niveles de lípidos en la
sangre, como el colesterol total, el colesterol LDL ("colesterol malo"), el colesterol
HDL ("colesterol bueno") y los triglicéridos. Estos datos son fundamentales para
evaluar el riesgo de enfermedad cardiovascular.
• El colesterol LDL cuya función es transportar colesterol a los tejidos, pero cuando
hay en exceso puede acumularse en las paredes de venas y arterias provocando
aterosclerosis.
• El colesterol HDL ayuda a eliminar otras formas de colesterol del torrente
sanguíneo. Los niveles más altos de colesterol HDL están asociados con un menor
riesgo de desarrollar una enfermedad cardíaca.
• La obesidad y la alimentación rica en grasas aumentan el riesgo de tener niveles
altos de triglicéridos.
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VII. CUESTIONARIO:
1. Señale y comente ¿Qué factores resultan de riesgo para los niveles de los
diferentes tipos de colesterol en la sangre?
• El nivel de colesterol en la sangre está determinado por factores genéticos y
ambientales que incluyen: la edad, el sexo, el peso corporal, la dieta, el
consumo de alcohol y tabaco, el ejercicio físico, los antecedentes familiares, los
fármacos y también la presencia de diferentes situaciones patológicas. (1)
• Comer muchos alimentos ricos en grasas saturadas aumenta los niveles de
colesterol LDL "malo". Las grasas saturadas se encuentran en los cortes grasos
de la carne y en los productos lácteos. No más del 10 % de las calorías diarias
deben proceder de las grasas saturadas.
• Falta de actividad física
• Fumar reduce el colesterol HDL, especialmente en las mujeres, y aumenta el
colesterol LDL.
• El estrés puede elevar los niveles de ciertas hormonas , como
los corticosteroides . Estas pueden hacer que el cuerpo produzca más
colesterol.
• El consumo excesivo de alcohol (más de dos bebidas al día para los hombres o
una para las mujeres) puede aumentar el nivel de colesterol total. (2)
2. ¿Qué recomendaciones técnicas y dietéticas sugiere para controlar el nivel de
colesterolemia?
• Dieta y estilos de vida:
Una dieta adecuada y un estilo de vida saludable (no fumar y mantener un nivel
de actividad física acorde con la edad y la condición física de la persona)
pueden reducir el riesgo de enfermedad coronaria. Por ello, es deseable que la
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población adopte dichos hábitos, de modo global y, en especial, aquellos
grupos de personas con mayor riesgo de sufrir aterosclerosis, como son los
fumadores, hipercolesterolémicos, obesos, diabéticos, hipertensos, sedentarios
y los familiares de enfermos con cardiopatía isquémica precoz. (3)
• Recomendaciones dietéticas:
Se debe recomendar una dieta equilibrada, con el aporte conveniente de
calorías para conseguir un peso adecuado (un índice de masa corporal entre 20
y 25, cuando es superior a 25 se considera sobrepeso y si es superior a 30 se
califica de obesidad). Es conveniente establecer una reducción ponderal
pactada con el paciente, lo que le ayudará a alcanzar el objetivo propuesto4.
Puede ser razonable alcanzar una pérdida semanal de 0,5 kg, para lo que se
necesita conseguir un balance energético negativo de 500 kcal/día. Para ello es
de especial utilidad el aumento de la actividad física.
El consumo de grasas monoinsaturadas puede variar entre un 15 y un 20%, con
una ingestión de grasas saturadas inferior al 10%. La ingestión de colesterol
debe ser inferior a 300 mg/día. Simultáneamente, se debe aumentar el consumo
de hidratos de carbono complejos hasta un 50-55% del aporte calórico total. A
ello hay que añadir la limitación en el consumo excesivo de sal y de alimentos
ricos en carbohidratos simples, en especial si existe sobrepeso. (3)
ALIMENTOS CONSUMO CONSUMO CONSUMO MUY
DIARIO MODERADO 2-3 VECES ESPORÁDICO
SEMANALES O DIARIO
CON MODERACIÓN
Cereales Pan, arroz, pastas, Pasta italiana con huevo y Bollería, ensaimadas,
maíz, harinas, bollería y galletas magdalenas, galletas
cereales y galletas preparadas con aceite de y bollería industrial
integrales. oliva. preparada con grasas
no recomendables.
Frutas, hortalizas Todas Aguacates, aceitunas, Paletas chips o
y legumbres patatas fritas en aceite de patatas o verduras
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oliva. fritas en aceites
inadecuadas.
Huevos, leche y Leche desnatada, Queso fresco o con bajo Leche entera, nata,
derivados yogur y productos contenido graso, leche y quesos duros y muy
con leche yogur semidesnatados. grasos, flanes y
desnatada. cremas.
Pescado y Pescado blanco, Bacalao salado, sardinas y Huevas, pescados
marisco pescado azul, caballa en conserva, fritos en aceites.
atún, almejas, etc. calamares, mejillones,
cangrejos.
Carnes Carne de conejo, Ternera, vaca, buey, Embutidos, beicon,
pollo y pavo sin cordero, cerdo, jamón. hamburguesas,
piel. salchichas.
Grasas y aceites Aceite de oliva. Aceites de semillas y Mantequilla,
margarinas sin ácidos margarinas sólidas,
grasos trans. manteca de cerdo,
tocino, aceite de
palma y coco.
Postres Mermelada, miel, Flan sin huevo, caramelos, Chocolate y
azúcar, etc. turrón, bizcochos caseros y pastelería.
dulces.
Bebidas Agua mineral, Refrescos azucarados
refrescos sin
azúcar, zumos
naturales e
infusiones.
Frutos secos Almendras, Cacahuetes Cacahuetes salados,
avellanas, coco y pipas.
castañas, nueces,
ciruelas, pasas.
Especias y salsas Pimienta, Mayonesa y besamel. Salsas hechas con
mostaza, hierbas, mantequilla, leche
sofritos, vinagre y entera y grasas
alioli. animales
1) Ingerir una cantidad elevada de ácidos grasos saturados, presentes sobre todo en las
grasas de origen animal.
2) Ingerir una cantidad elevada de colesterol.
3) Ingerir una cantidad de calorías superior a la que necesita el organismo, lo cual ocasiona
obesidad.
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El objetivo de una terapia dietética es evitar dichos excesos modificando los hábitos
alimenticios perjudiciales sin afectar la nutrición adecuada del individuo. Para reducir la
concentración del colesterol en la sangre el primer paso es modificar la dieta habitual. (4)
3. ¿Qué factores tienen influencia sobre el nivel de colesterol sanguíneo?
El consumo de aceite de quinua y aceite de pescado promueve la formación de tejido
adiposo saludable, y reducen los niveles de glucosa y colesterol. Contrariamente el consumo
de manteca vegetal propicia la hipertrofia de adipocitos de gran tamaño e incrementa los
parámetros bioquímicos evaluados. (5)
• Mala alimentación. Comer demasiada grasa saturada o grasas trans puede dar lugar a
niveles de colesterol poco sanos. Las grasas saturadas se encuentran en cortes de
carne grasos y productos lácteos no descremados. Las grasas trans por lo general se
encuentran en refrigerios empaquetados o postres.
• Obesidad. Tener un índice de masa corporal (IMC) de 30 o más aumenta el riesgo de
tener colesterol alto.
• Falta de ejercicio. El ejercicio ayuda a aumentar el HDL del cuerpo, que es el
colesterol “bueno”.
• Tabaquismo. Fumar cigarrillos puede bajar el nivel de HDL o colesterol “bueno”.
• Alcohol. Beber demasiado alcohol puede aumentar el nivel de colesterol total.
• Edad. Incluso los niños pequeños pueden tener niveles de colesterol poco sanos,
pero es mucho más común en las personas de más de 40. A medida que envejeces, el
hígado puede cada vez menos eliminar el colesterol LDL. (6)
4. Utilidad del colesterol sanguíneo.
El colesterol está presente en todo el organismo formando las membranas
celulares, participa en la síntesis de hormonas esteroideas como progesterona,
testosterona, estradiol y cortisol, síntesis de algunas vitaminas como la vitamina
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D y la síntesis de los ácidos biliares que facilitan la digestión y absorción de las
grasas de la dieta. (7)
Es componente fundamental de las membranas de muchas células animales; se
encuentra también en las lipoproteínas del plasma sanguíneo. El colesterol es un
nutrimento; está presente de manera constante en nuestra dieta. (3)
El colesterol LDL (lipoproteína de baja densidad) es el que comúnmente se
llama “colesterol malo” cuya función es transportar colesterol a los tejidos, pero,
cuando hay en exceso puede acumularse en las paredes de venas y arterias
provocando ateroesclerosis.
Una concentración elevada de colesterol malo en el cuerpo tiene un impacto
negativo en la salud ya que aumenta el riesgo de padecer cardiopatías y
accidentes cerebrovasculares, mientras el colesterol HDL conocido como
“colesterol bueno” al circular a través del torrente sanguíneo es capaz de
recolectar el colesterol malo transportarlo al hígado y evitar su acumulación en
las paredes de venas y arterias. (8)
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VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
1. Cachofeiro DV. Alteraciones del colesterol y enfermedad cardiovascular
[Internet]. [Link]. Disponible en:
[Link]
[Link]
2. Colesterol en la sangre - Causas y factores de riesgo | NHLBI, NIH
[Internet]. [Link]. Disponible en:
[Link]
3. Villar Álvarez F, Mata López P, Plaza Pérez I, Pérez Jiménez F, Maiques
Galán A, Casasnovas Lenguas JA, et al. Recomendaciones para el control de
la colesterolemia en España. Rev Esp Salud Publica [Internet]. 2000; 74(5–
6):00–00. Disponible en:
[Link]
57272000000500003
4. Manjarrez L, Fernanda M, Completo N. "El colesterol: lo bueno y lo malo"
[Internet]. [Link]. Disponible en:
[Link]
5. Gutiérrez Zorrilla IM, Bernuy-Osorio ND, Zea Mendoza O, Vílchez-Perales
C. Influencia de ácidos grasos en parámetros sanguíneos y adipogénesis.
Estudio experimental en pollos eclosionados. Arch Latinoam Nutr [Internet].
2022; 72(4):285–93. Disponible en:
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6. Nivel de colesterol alto [Internet]. [Link]. 2023 [citado el 28 de
noviembre de 2023]. Disponible en: [Link]
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7. García Andrés I, Moros Peiro B, Delgado Guerrero B, Muñoz Solera C,
Lozano Alonso S, Sisamón Marco I. Prevención y mejora de
hipercolesterolemia. Revista Sanitaria de Investigación [Internet]. 2021;2(10
(Octubre)):242. Disponible en:
[Link]
8. de Salud S. El colesterol, de gran importancia para nuestro organismo
[Internet]. [Link]. [citado el 28 de noviembre de 2023]. Disponible en:
[Link]
nuestro-organismo
IX. RECURSOS:
1. [Link]
2. [Link]
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