CLASE N°3
CULTIVO CELULAR
● Tejidos forman órganos
● Se pueden cultivar fuera de los organismos enteros, tejidos o células aisladas
in vitro (vidrio)
Conjunto de técnicas que permiten el MANTENIMIENTO Y MULTIPLICACIÓN de células en el
laboratorio
● separadas de un tejido
● manteniendo al máximo sus propiedades fisiológicas, bioquímicas y genéticas
TIPOS DE CULTIVO
● ÓRGANOS
1. Se coloca el órgano sobre una rejilla situada en la interfase líquido-gas de un medio
del que PUEDE LIBERAR DESECHOS Y OBTIENE NUTRIENTES
2. Se conservan las INTERACCIONES HISTOLÓGICAS Y GRACIAS A ELLO permite
mantener los tipos celulares DIFERENCIADOS, por lo que representan una buena
réplica del tejido de origen
● EXPLANTES PRIMARIOS
1. Se coloca un FRAGMENTO de tejido o de órgano en la interfase SÓLIDO-LÍQUIDO de
un soporte de vidrio o de plástico
2. Las células se adhieren a la superficie y las células de la periferia del EXPLANTE
pueden migrar y proliferar por la superficie del soporte
● ORGANOTÍPICO
1. Varios tipos celulares que interaccionan entre sí de una forma que intenta parecerse
lo más posible a la original
2. La idea es que pueda ser usado en injertos o trasplantes
3. BASE DE INGENIERÍA DE TEJIDOS
● CELULAR PRIMARIO
1. El más utilizado, se puede obtener a partir de explantes primarios o de suspensiones
de células disgregadas.
2. La disgregación celular se realiza por métodos enzimáticos o mecánicos
3. NO HAY INTERACCIÓN CÉLULA CÉLULA Y CÉLULA CON MATRIZ EXTRACELULAR
4. Son capaces de proliferar y la población crece
5. Cuando ocupan TODA la superficie disponible se dice que han alcanzado la
CONFLUENCIA, al cabo de un tiempo hay que trasplantar las células a un nuevo
recipiente → SUBCULTIVO O PASE
TIPOS
MONOCAPA:
las células crecen adheridas sobre un soporte sólido (plástico o vidrio). El anclaje al sustrato es un
prerrequisito para la proliferación celular. Es el método utilizado para la mayoría de las células
excepto para las hematopoyéticas.
SUSPENSIÓN:
las células se encuentran dispersas en el medio de cultivo. Su crecimiento no depende del anclaje.
Este tipo de cultivo se restringe a las células hematopoyéticas, células madre, líneas celulares
transformadas y células tumorales. Alcanzan la confluencia cuando el número de células es grande
y los nutrientes son insuficientes
SENESCENCIA CELULAR: DEJAR DE DIVIDIRSE LUEGO DE UN DETERMINADO NÚMERO DE
DIVISIONES EN CULTIVO
FIBROBLASTOS HUMANOS NORMALES: SE DIVIDEN SOLAMENTE ENTRE 25 Y 40 VECES ANTES
DE DETENERSE
CULTIVO DE CÉLULAS INMORTALES: Células HeLa
“primera línea de células humanas inmortales”