CITOLOGIA
DIAGNOSTICA
Estudio morfológico de las células aisladas o en
grupos celulares extraidos de su contexto
tisular con el fin de obtener, al menos, una
aproximación al diagnóstico de la lesión.
Ventajas:
Las muestras pueden obtenerse fácil y rápidamente, sin
riesgo para el animal y suponiendo un mínimo costo
económico.
Los resultados son rápidos.
Permite plantear actuaciones posteriores y dirigir la
terapia.
Desventajas:
Se trabaja con material celular muy limitado y
sobretodo en ausencia de toda arquitectura tisular.
La citología debe ser un coadyuvante de la
biopsia y del estudio histopatológico ---- NUNCA
un sustituto.
Método rápido ----- líquidos y masas sólidas.
La ausencia de células tumorales NO excluye la
presencia de neoplasia ------ NO
CONCLUYENTE.
Es un acercamiento diagnóstico no un diagnóstico
definitivo, salvo en TVT, linfoma y mastocitoma.
Examen citológico de impronta de tumor venéreo transmisible canino
con nódulos cutáneos (a, 40x) y masa en pene (b, 100x). Se observa
anisocariosis, núcleo grande, nucléolos prominentes, escaso citoplasma
basófilo con vacuolas, figuras en mitosis y presencia de polimorfonucleares,
especialmente en los nódulos cutáneos. Tinción Giemsa.
[Link]
Mastocitoma canino - 100 x
[Link]
Varias figuras mitoticas en un linfoma
canino - 40 x
[Link]
Descripción clínica
Para cualquier caso clínico es necesario incluir la
reseña del animal (especie, raza, género, edad. Los
datos obtenidos a partir de la anamnesis y del
examen físico del animal incluyen:
Anamnesis:
a) Tiempo de aparición de la lesión
b) Modo de crecimiento
c) Aumento y disminución de tamaño desde que se observó por
primera vez (sí o no).
d) Presenta regresión espontánea (sí o no).
e) Presencia de linfadenomegalia regional (sí o no).
f) Aplicación de algún tratamiento (médico o quirúrgico).
g) Regresión con tratamiento médico (sí o no).
h) Recidiva (p. ej. reapareció después de tres meses de la escisión).
i) Si es recidiva, diagnóstico citológico o histológico anterior en caso
de haber uno.
Examen físico
a) Distribución de la(s) lesión(es).
b) Situación en los tejidos (cutánea, subcutánea o en
tejidos profundos).
c) Apariencia y forma (lisa, rugosa, alopécica, nodular,
pedunculada, sésil o ulcerada).
d) Calidad (seca, húmeda o hemorrágica).
e) Color (negro, eritematoso o violáceo).
f) Dimensiones (siempre incluir las tres: largo, ancho y
profundidad).
g) Palpación
OBTENCION Y MANEJO
DE LA MUESTRA
1. OBTENCION DE CELULAS
EN LIQUIDOS:
Paracentesis abdominal
Toracocentesis
Artrocentesis
Lavados:
◦ Nasales
◦ Traqueales
◦ Broncoalveolares.
[Link]
Para lesiones
expuestas o
material para
biopsia por escición.
3. IMPRONTAS
Para lesiones que
drenan, lesiones
externas o biopsias
por escisión.
4. PUNCION- ASPIRACION CON AJUGA
FINA (PAAF - BACAF)
Es la técnica que más frecuentemente se utiliza
para obtener muestras citológicas de “masas”.
◦ Lesiones nodulares cutáneas o subcutáneas
◦ Nódulos linfáticos.
◦ Masas u órganos internos ---- Ecografía.
5. PUNCION CON AGUJA FINA (PAF)
Se realiza introduciendo la aguja sin jeringa en la
lesión varias veces.
Las células se introducen por capilaridad
Reduce la contaminación con sangre
Confección de laminillas
Frotis
Impresiones
Raspados
Impresiones con hisopos
En cruz (scuash)
Preparación combinada
Centrifugación
Frotis lineales
Sedimentación
Fijación ---- Secado al aire.
Tinción: Papanicolaou, Romanowsky, Diff -
Quick
INTERPRETACION
CITOLOGICA
EXAMENES DE LAS
CELULAS
ERITROCITOS
- Se usa como marcador para
medir el tamaño de otras células.
- Hemorragias
NEUTROFILOS
Estados estériles ------ bien
conservados
Estados sépticos ----
degenerados (picnosis, cariorexis,
vacuolas), microorganismos
fagocitados.
[Link]
Linfocitos
Células plasmáticas
Histiocitos
Células mesoteliales
Eosinófilos
Mastocitos
Células del epitelio escamoso.
Líquido ascítico:
células mesoteliales reactivas
Líquido ascítico: macrófagos
Líquido ascítico:
macrófagos y células neoplásicas
Líquido ascítico negativo para células neoplásicas.
En el centro, célula mesotelial típica, de contornos netos,
binucleada. Histiocitos circundantes. Comparar tamaño con
las numerosas células mesoteliales típicas y eritrocitos
Líquido ascítico :
Linfocitos y células plasmáticas
Líquido pleural: linfocitos y eosinófilos
Células neoplásicas
Benignas
Malignas
Líquido pleural:
linfosarcoma
Interrogantes?
[Link] células normales o anormales?
[Link] proceso es inflamatorio o NO inflamatorio?
NO INFLAMATORIO
Líquidos bajos en proteína y células ---- Quistes
sebáceos y epidérmicos, quistes salivales,
trasudados.
INFLAMATORIO
Contienen neutrófilos, células plasmáticas e
histiocitos.
SEPTICO
Bacterias ---- neutrófilos tóxicos,
bacterias
Hongos ---- macrófagos y linfocitos.
NO SEPTICO
Neutrófilos sanos , linfocitos, macrófagos,
eosinófilos (alergias).
Inflamación séptica
[Link]
Citología inflamatoria
Fagocitosis de cocos por neutrófilos.
Inflamación NO séptica
[Link]
Citología inflamatoria
La presencia de neutrófilos con núcleos muy lobulados indica un ambiente poco
tóxico, como pueden ser los abscesos estériles.
Las flechas amarillas indican la presencia de material extraño fagocitado por los
macrófagos .
La flecha roja muestra un neutrófilo fagocitado por un macrófago.
Las flechas verdes señalan neutrófilos con 4-5 lobulaciones en su núcleo
Inflamación purulenta --- más del 85% de las
células inflamatorias son neutrófilos.
Inflamación aguda --- Más del 70% de las
células inflamatorias son neutrófilos.
Inflamación subaguda --- Un 30-50% de las
células inflamatorias son monocitos, macrófagos
y linfocitos.
Inflamación crónica --- más del 50% de las
células inflamatorias son monocitos y
macrófagos.
Inflamación granulomatosa --- Presencia
de abundantes células epiteloides y gigantes.
Mastitis granulomatosa. Fondo proteináceo que incluye numerosos
histiocitos epitelioides de amplio citoplasma y núcleo arriñonado, que en
sectores se disponen en acúmulos con presencia de células gigantes
multinucleadas.
[Link]
Inflamación piogranulomatosa ---
Inflamación purulenta con un componente
de células epiteloides y gigantes.
Inflamación eosinofílica o alérgica ---
Los eosinófilos superan el 10% de las células
inflamatorias.
[Link]
3. Existen pruebas de neoplasia?
4. Es benigna o maligna?
5. Es un carcinoma o un sarcoma?
El tipo celular de la neoplasia es lo último en
determinar y con frecuencia NO es posible
asegurarlo.
Indicadores generales:
Escasez o ausencia de células inflamatorias.
Hipercelularidad
Pleomorfismo celular
[Link]
Criterios de malignidad:
1. En la población celular:
Hipercelularidad
Grupos celulares desordenados
Pleomorfismo
Mitosis atípicas
[Link]
2. Celulares
Nucleares: Mayor tamaño del núcleo, mayor
tamaño y número de nucelolos, aumento de la
relación núcleo/citoplasma, hipercromatismo,
núcleos múltiples, polilobulados o irregulares.
Citoplasmáticos: basofilia, vacuolización.
3. Criterios indirectos de malignidad:
hemorragia, necrosis, fagocitosis de material
celular …..
¿Cuáles o cuántos de ellos deben estar
presentes para asegurar un diagnóstico
de malignidad?
La benignidad es un diagnóstico
histológico, NO citológicos
CITOLOGIA NEGATIVA : No se observan
criterios de malignidad
CITOLOGIA SOSPECHOSA: Se encuentran
menos de tres criterios de malignidad.
CITOLOGIA POSITIVA: Existen células malignas
con más de tres criterios de malignidad.
CARACTERISTICAS EPITELIAL CONJUNTIVO CELULAS
REDONDAS
Celularidad Alta Baja Alta (Excepto
histiocitomas)
Cúmulos celulares Si No No
Formaciones Tisulares Si No No
Tamaño celular Grande Mediano - Mediano -
Pequeño Pequeño
Forma celular Redonda Fusiforme Redonda
Forma nuclear Redonda Ovalada Redonda
Basofilia citoplasmática Si No No (Excepto
linfoma)
Gránulos A veces A veces No ( Excepto
citoplasmáticos mastocitoma)
Líquido ascítico: adenocarcinoma
Carcinoma epidermoide. Aspecto
citológico de células neoplásicas
agrupadas, con abundante
citoplasma poligonal y núcleos
redondeados, atípicos. HE, x 500
FIBROSARCOMA. Punción con
aguja fina: células con
anisocariosis, citoplasma
vacuolado y basófilo. Compatible
con células sarcomatosas.
Carcinoma epidermoide. Aspecto
citológico de células neoplásicas
agrupadas, con abundante
citoplasma poligonal y núcleos
redondeados, atípicos. HE, x 500
CITOLOGIA DE TEJIDOS
ESPECIFICOS
NÓDULOS LINFATICOS
Normales : linfocitos
pequeños y células
plasmáticas
ocasionalmente.
Hiperplasia benigna :
Aumento de la cantidad de
células plasmáticas por
estímulo antigénico.
Linfosarcoma: Gran porcentaje de linfoblastos --
- células grandes, citoplasma basófilo,
pleomórficos, nucleólos grandes, figuras mitóticas.
Linfadenitis: Infección primarias ---- Neutrófilos,
macrófagos, microorganismos.
Tumores metastásicos.
TUMORES
Carcinoma --- acúmulos, núcleos grandes,
citoplasma basófilo con vacuolas.
Carcinoma epidermoide. Aspecto citológico de células neoplásicas agrupadas,
con abundante citoplasma poligonal y núcleos redondeados, atípicos. HE, x 500
Lipoma ---masa fluctuante suave
Tejido adiposo normal, núcleos ocasionales,
colorante Sudán III o IV.
Mastocitoma --- Tumor de piel en botón
Gránulos metacromáticos en el citoplasma.
Melanoma ---- gránulos color café, gris o
negro en el citoplasma.
Las células tienden a acumularse.
Melanoma. Se evidencian melanocitos atípicos con núcleos
irregulares y nucléolos prominentes. Citología en impronta.
CAAF de ganglio. H/E x 1000 Extendido citológico muy celular con presencias de células
neoplásicas malignas con núcleos grandes atípicos, nucleolos prominentes, pseudoinclusiones
nucleares y pigmento pardo fino intra y extracelular correspondiente a melanina. Diagnóstico
citológico metástasis ganglionar de un melanoma melanótico.
Histiocitoma – Tumor de la piel en botón de
perros jóvenes, tienden a ulcerarse.
Células grandes, cantidad moderada de
citoplasma, núcleos redondos.
TUMOR DE GLANDULAS PERIANALES
FLUIDOS
CORPORALES
Los fluidos corporales normalmente entran y
salen de los vasos sanguíneos en forma de
ultrafiltrado
Origen sanguíneo
Componentes similares a los del
plasma, varía la proporción
Efusión = Derramamiento de un líquido
Efusión pleural
Efusión peritoneal
Efusión pericárdica
Líquido Sinovial
LCR
Obtención de la muestra
Llenar al menos 2 tubos EDTA y una o dos
jeringas de 10 ml---- Refrigerar
◦ Si son líquidos pobres en proteína (< 1,5 mg/dl)
añadir la misma cantidad de suero ….. Para evitar
alteración de morfología celular.
Si se sospecha de líquido séptico, 10 ml en
frasco de hemocultivo---- NO refrigerar.
Hacer frotis normal y lineal sin centrifugar del
EDTA
Evaluación
Características físicas ( Color, turbidez)
Recuento de células nucleadas (Tubo con
EDTA)…automático o en cámara de neubauer.
Frotis “normal” o lineal.
Examen bioquímico del sobrenadante y de una muestra
de su paralelo:
◦ Glucosa
◦ Triglicéridos
◦ Colesterol Si hay muy poca muestra, se debe
priorizar la citología y una gota
◦ Albúmina para refractómetro.
◦ Proteínas totales.
EXAMEN FISICO
COLOR
Suero o plasma ------------ Amarillo
Eritrocitos ------------------ Rojo, café rojizo.
Leucocitos ------------------ Blanco, crema, amarillo, gris o verde.
Quilo ------------------------- Blanco lechoso, rosa.
Bilirrubina -------------------- Amarillo, anaranjado, rojo, café.
TURBIDEZ
Depende de la cantidad de células suspendidas.
Eritrocitos ---- T. roja grisácea, botón.
Leucocitos --- T. ligera hasta pus cremosa.
Gotas de grasa --- T. lechosa.
COAGULACION
Depende de la cantidad de fibrina presente:
Trasudados ----- rara vez .
Exudados ---- coagulación rápida.
Algunos procesos purulentos pierden su capacidad de
coagular?
OLOR
Por lo general sin olor.
Putrefacción
DENSIDAD ESPECIFICA
Trasudado ------ menor 1.017
Exudado ----- mayor 1.017 - 1.025
T. modificado ---- 1.017
EXAMEN MICROBIOLOGICO
1. Examen directo ---- Montaje húmedo , Frotis y tinción.
2. Cultivo.
3. Inoculación.
EXAMEN CITOLOGICO
1. Volumen del paquete celular.
2. Cuenta celular nucleada total
3. Cuenta diferencial de células.
- Exudado purulento
- Proceso exudativo crónico
- Alergias o parasitosis
- Trasudado
- Células tumorales.
Cytospin
Preparación citológica sin citospin
(sedimentación)
Canine and Feline Cytology: A Color Atlas and Interpretation Guide 2. Edición
de Rose E. Raskin, Denny Meyer.
Clasificación clásica de líquidos
biológicos
En base a recuento de células nucleadas (TNCC) y
proteínas totales.
Color - TNCC Proteínas
Aspecto Totales (g/dl)
Trasudado Claro <1500 <2,0
pobre en Transparente
proteínas
Trasudado Variable <5000 >2,0
rico en Levemente
proteínas turbio
Exudado Variable >5000 >2,0
Turbio
Clasificación Fisiopatológica
Trasudados
Exudados
◦ Séptico
◦ No séptico
Efusión por exfoliación de células
◦ Neoplasia
◦ Mesotelio reactivo
Efusión por ruptura o filtración de vasos sanguíneos o
de una víscera: Hemorrágica, biliosa, uroabdomen,
quilosa, perforación GI, otras
TRASUDADO
De origen NO inflamatorio:
- Hipoproteinemia
- Estasis venosa.
Tiende a recurrir a menos que se elimine el factor
etiológico.
- Hidrotórax
- Hidroperitoneo
- Hidropericardio
- Hidroartrosis.
EXUDADO
De origen inflamatorio:
- Infecciones
- Traumatismo
- Inflamación estéril.
- Enfermedades neoplásicas (?)
Eliminación ----- benéfica para etiología.
Características: seroso, catarral, fibrinoso,
hemorrágico o purulento.
Clasificación en base a bioquímica
Proteínas Totales
Colesterol
LDH
Glucosa
Albúmina
Bilirrubina
Neutrófilos
Recuento Total de células
Criterios de Light
Líquido pleural (Medicina Humana)
Tres criterios para clasificar un exudado:
PT (efusión/PT suero) > 0,5
LDH (efusión/LDH suero) > 0,6
LDH (efusión) ,mayor 2/3 del límite superior de
referencia para LDH sérica
◦ Ejemplo:V. referencia LDH suero=200 --- 2/3 200= 133,133 es el
valor mínimo que debería tener un líquido pleural para ser
exudado
Si al menos 1 de los criterios se cumple es un exudado.
Sólo si ninguno de los criterios se cumple es un trasudado
Criterios de efusión pleural para
perros
Causas de efusión pleural en el perro
Criterios de efusión pleural para gato
Causas de efusión pleural en el gato
Limitaciones de los criterios de Light
Pueden clasificar algunos trasudados como
exudados cuando hay aumento de la presión
hidrostática en ICC.
◦ ALB-S – ALB-e < 1,2 en estos pacientes ayuda a
clasificar como trasudados la efusión, especialmente si
están en tratamiento con diuréticos.
Criterios generales de efusión
abdominal en el perro y gato
Causas de efusión abdominal en
perros y gatos
Efusión hemorrágica
Aspecto serosanguinolento
Más del 3% del hematocrito
Formas de diferenciar la contaminación en la toma de
muestra por hallazgos de citología (eritrofagocitosis 1
día, hematoidina semanas, siderófagos semanas)
Causas:
◦ Razas grandes: rotura de bazo por hemangiosarcoma, torsión de
algún órgano.
◦ Perros en general: alteraciones coagulación secundaria,
traumatismo, dirofilariasis, más las anteriores en menor
frecuencia.
Efusión pericárdica.
Efusión Quilosa
Aspecto macroscópico lechoso muy turbio (no
patognómico, animales anoréxicos).
No confundir con trasudado rico en linfocitos (ausencia
quilomicrones)
◦ TrIglicéridos E <100 mg/dl
◦ o TG-E > TG-S
Más típicas en gatos y en pleura (obstrucción o ruptura
de vaso linfático por neoplasia, trauma o idiopático)
[Link]
Citología:
linfocitos maduros y macrófagos con vacuolas lipídicas,
a veces neutrófilos si es crónico.
Bioquímica:
◦ Triglic_E/Triglic_S > 2 + Quilomicrones
◦ Colesterol_E/Triglic-E<1
[Link]
Efusión biliosa
No siempre es macroscópicamente verdosa o
amarillenta. A veces es un material mucinoso
(blanquecina): mucocele
Más frecuente en perros
◦ Obstrucción, pancreatitis, ruptura de vesícula o
conducto biliar o colecistitis necrosante.
Bilirrubina_E/Bilirrubina_S >2 o 2,5
Acidos biliares_E > Acidos biliares_S
Citología:
Inflamación neutrofílica + pigmentos bilioso +
bacterias
Bilis blanca: a veces en lugar de cristales de bilis se
observa material mucinoso a fibrilar azul pálido.
(ruptura de mucocele o del conducto biliar común).
Uroabdomen
En perros y gatos: ruptura de vejiga urinaria u otras estructuras
urinarias por traumatismo, obstrucciones uretrales, neoplasia,
filtración por suturas tras cistotomía o iatrogénica al cateterizar.
Macroscópicamente: Líquido transparente a
sanguinolento o de claro a turbio.
Citología: inflamación mononuclear inicialmente y luego
neutrofílica
Creatinina_E/Crea_S >=2 en el perro (E:100%, S:86%)
y gato
Potasio_E/Potasio_S>= 1,4 en perro (E:100%, S:100%)
y gato >=1,2
Rotura de la vejiga traumática en un
perro. Hay un gran coágulo de
sangre sobre el ápice de la vejiga
donde ocurrió la ruptura.
Una sola capa, de espesor
completo, simple patrón continuo se
utiliza para cerrar un defecto en una
vejiga de una ruptura de la vejiga
[Link]
Efusión neoplásica
Pueden o no aparecer células neoplásicas
◦ Linfomas
◦ Mesoteliomas
[Link]
PIF
Más frecuente en gatos menores de 2 años, otros
pasado los 10 años.
Macroscópicamente claro y amarillento, a veces
viscoso.
TNCC variable (más frecuente baja)
Cociente A/G < 0,8 menor de 0,45 + probable.
PT > 3,5 + probable
Glicoproteína ácida 1>1,55 mg/dl en suero o efusión
(S y E 93%)
[Link]
LIQUIDOS
BIOLÓGICOS
Factores preanalíticos
Desinfección área de punción (contaminación externa)
y dejar secar.
Pretratar jeringa de asprado con 25 UI heparina
sódica/ml líquido sinovial.
Alicuotar en 3 tipos de tubo:
◦ EDTA: para evaluación citológica
◦ Tubo seco: microbiología, proteínas y prueba cóagulo mucina
Si hay poco volumen se prioriza la citología
LÍQUIDO SINOVIAL
Cuándo extraer LS?
Inflamación con producción excesiva de líquido
Fiebre generalizada de origen desconocido
Enfermedad sistémica con afectación de articulaciones
Cojeras alternantes
De dónde?
Articulación con exceso de líquido o inflamada
En proceso sistémico 2 o 3 articulaciones
Acceso a la articulación del hombro Acceso a la articulación del codo
Acceso a la articulación del tarso
[Link]
Acceso a la articulación del carpo Acceso a la articulación de la cadera
Acceso a la articulación de la rodilla
[Link]
Pruebas laboratoriales a realizar
Descripción macroscópica del líquido:
◦ Volumen (media 0,25 ml, máximo 1 ml)
◦ Turbidez, color, viscosidad.
Recuento celular: cámara de Neubauer (c. nucleadas y
RBC).
Examen microscópico en fresco
◦ Tinción de Gram
◦ Tinción panóptico rápido
Otras determinaciones: Citología (dejar secar muy bien)
Color y aspecto
Debe ser transparente o amarillento
Si turbio: fibrina, cristales células.
[Link]
Viscosidad
Viscosidad normal: similar a la clara del huevo.
Al levantar una gota desde el portaobjetos, se comporta
como un fluido pseudoplástico formando una hebra de
aproximadamente 2,5 cm de longitud antes de
romperse
Menor longitud o no formación de la hebra =
inflamación
Recuento celular
Recuento celular en cámara o estimación en
citología:
◦ A 10X, contar células en varios campos y multiplicar por
100 la media.
◦ A 40X si hay más de 2 células por campo es sugestivo de
un recuento mayor de lo normal.
Valores normales: menor de 3000 células/uL en
perro y < 1000 c/uL en el gato.
Artritis inflamatoria: >10.000 c/uL. Predominan
neutrófilos degenerados o no frente a células
mononucleares.
Osteoartritis: < 5000 c/uL. Predominan células
mononucleares frente a neutrófilos.
Otras determinaciones
Glucosa _L/Glucosa_S debe estar entre 0,8 y 1.
Valores del cociente menores o iguales a 0,5
indican inflamación y/o infección.
Proteínas totales: valor normal 2-2,5 g/dL.
Cociente albúmina/globulina normal=4
Test del coágulo de mucina: 1 volumen de
líquido+ 3 volúmenes de ácido acético glacial 2% (o
vinagre) en un tubo. Semicuantifica la cantidad de
ácido hialurónico en el líquido.
◦ Formación de coágulo que ocupa casi todo el
volumen al mover suavemente es normal.
◦ Coágulo pequeño o no coagulación indica
inflamación.
Enfermedades articulares con resultados
variables en el análisis del líquido sinovial
Artritis inflamatorias instauradas recientemente (TNCC
moderados)
Artritis inflamatorias en resolución (TNCC moderados)
Artritis reumatoide canina tiene dos presentaciones:
◦ Predominantemente neutrofílica (más frecuente)
◦ Predominantemente mononuclear
En osteoatritis a veces hay predominio de
mononucleares.
Clasificación de líquido sinovial
LÍQUIDO SINOVIAL INFLAMATORIO
Osteoartritis: inflamación moderada con incremento
moderado del % de mononucleares.
Causa infecciosa: inflamación severa, predominio de
neutrófilos (Recomendable cultivo de membrana más que del líquido)
Causa inmunomediada: inflamación severa,
predominio de neutrófilos, células especiales como
ragocitos o células LE (Leucocitos eosinófilos).
Celularidad variable, a menudo elevada.
Perro: inmunomediado Gato: infeccioso
Ragocitos en el LS de un paciente con AR. Las flechas señalan las típicas
inclusiones intracitoplasmáticas de tonalidad oscura (MGG, 1.000x).
[Link]
Célula LE (flecha) en un líquido sinovial (MGG, 1.000x).
[Link]
LÍQUIDO SINOVIAL NO INFLAMATORIO
Enfermedad degenerativa articular/osteoartritis
<5000 c/uL, grandes mononucleares vacuoladas, sin
neutrófilos, osteoclastos, condrocitos.
Hemartrosis aguda (hemofilia)
LÍQUIDO SINOVIAL NEOPLÁSICO
Sarcoma de sinoviocitos, histiocítico, condrosarcoma,
osteosarcoma, fibrosarcoma
LÍQUIDO
CEFALORRAQUIDEO
Indicaciones para analizar LCR
Signos de encefalitis
◦ Recuento y tipo celular y proteínas totales.
Signos de enfermedad medular o mielopatía
◦ Cuando no se observan lesiones evidentes en el
diagnóstico por imagen. Tomar muestra antes de la
mielografía
Obtención del LCR
Rasurar y asepsia (campo quirúrgico)
Anestesia general, posición lateral.
Cisterna magna, punción lumbar
1 ml LCR por cada 5 Kg de peso
Tubo seco (*) y con EDTA
Priorizar citología
No medir proteínas totales en EDTA,
porque produce falsas elevaciones
Contraindicaciones y
complicaciones
Aumento de la presión intracraneal
Riesgo anestésico general
Contaminación de muestra y meníngea por
deficiente asepsia
Sangrado o hemorragia.
Pruebas a realizar
En la clínica antes de 30 minutos post-extracción.
Laboratorio externo: añadir suero a igual volumen
para preservar las células (48h) y dejar LCR original
para medir proteínas.
Recoger LCR antes de suministrar corticoides
Evaluación macroscópica: claro, sin color (similar al
agua)
Recuento de eritrocitos: restar 1 leucocito al TNCC
por cada 500 g en perro y por cada 200 en gato.
Recuento total de células: < 5 células/uL en cisterna,
<3 c/uL en Lumbosacra perros, < 2 c/uL en el gato
Recuento diferencial de células nucleadas: mayoría
mononucleares y pocos neutrófilos.
Proteínas y Albúmina: A/G cisterna magna < 25 mg/dL,
Lumbosacra < 45 mg/dL.
Glucosa: comparar con la glicemia (60-80% de ésta)
Cultivo, PCR, Anticuerpos igG/IgM, electroforesis.
Evaluación macroscópica
Normalmente apariencia de agua
Color amarillento (xantocromía)
◦ Hemorragia previa al menos 10 horas antes de la
punción (puede durar hasta 2-4 semanas post-
hemorragia, aunque normalmente desaparece en 4-8
días).
◦ Ictericia grave
◦ Aumento severo de proteínas
Hemorrágico (iatrogénico)
Aumento de hasta 15.000 GR/uL, aumenta poco el
recuento de leucocitos a menos que haya leucocitosis
marcada.
Poco efecto sobre las proteínas: se necesitan 1200
eritrocitos/uL para aumentar las proteínas en 1 mg/dL.
Turbio
Al menos 200 leucocitos/uL o 700 GR/uL o 500 c/uL de
ambos, o proteínas muy elevadas.
Proteínas
Índice de IgG líquido/IgG suero: aumenta en
enfermedades inflamatorias infecciosas. Es útil cuando se
observa pleocitosis.
Medición semicuantitativa: técnica de Pandy.
Aumento de proteínas > alteración barrera
hematoencefálica y/o producción de Igs
Si hay GR, se resta 1 mg/dL de proteínas por cada 1000
GR/uL.
No siempre hay alteraciones citológicas cuando las
proteínas están altas (disociación albúmino-citológica)
Características LRC según enfermedad
ENFERMEDAD TIPO DE PLEOCITOSIS PROTEÍNAS (mg/dL)
ME vírica Ninguna o moderada mononuclear Normal a < 100
ME PIF Moderada a marcada neutrofílica, mixta, a veces > 100
eosinofílica
ME Ricketsial Leve a moderada mononuclear o mixta < 100
ME Erlichia Leve a moderada neutrofílica Moderada a marcadamente elevadas
granulocítica/Anaplasma
ME bacteriana Moderada a marcada neutrofílica. Cambios >100
tóxicos a veces
ME fúngica Moderada a marcada mixta. A veces eosinofílica >100 (variable según evolución)
ME granulomatosa Ninguna o moderada mononuclear o mixta Moderada a marcadamente elevadas
ME necrotizante Moderada a marcada mononuclear o m ixta <100 (variable según evolución)
ME eosinofílica Moderada a marcada eosinofílica Moderada a marcadamente elevadas
Steroid Response ME Moderada a marcada neutrofílica (mononuclear Moderada a marcadamente elevadas
si crónica)
Características LRC según enfermedad
ENFERMEDAD TIPO DE PLEOCITOSIS PROTEÍNAS (mg/dL)
Hernia de disco Leve a moderada neutrofílica, linfocítica <100 normalmente
si es crónica o mixta.
Trauma espinal Normal e leve, presencia GR y todos los <100 normalmente
tipos celulares nucleados
Discoespondilitis Normal a leve, neutrofílica o <100 normalmente
mononuclear.
Empiema Normal a leve neutrofílica <100 normalmente
Accidente cerebro-vascular Normal a leve, neutrofílico o <100 normalmente
mononuclear
Epilepsia idiopática Normal a leve, mononuclear <100 normalmente
Tumor cerebral Normal, a veces células neoplásicas Elevadas en rango
amplio
Neuropatía nervios craneales, TNCC normal sin pleocitosis Elevadas en rango
enfermedad vestibular idiopática amplio
FROTIS VAGINALES
METODOS
Obtener secreciones de la vagina con una torunda, una
espátula especial, una pipeta de bulbo.
TINCION
Colorante Wright o Giemsa usando la misma técnica
que para el frotis sanguíneo.
Mezclar una gota de secreción vaginal con una gota de
colorante (Azul de toloudina) --- 3- 5 minutos ---
cubreobjetos.
Determinar el tipo y cantidad de células de las
diferentes etapas del ciclo estral
Los cambios hormonales que sufre la vagina durante
el ciclo, se reflejan en la morfología de sus células
epiteliales.
Establecimiento del tiempo óptimo para la
gestación de la perra.
Al inicio del ciclo, la célula epitelial está en
contacto con la irrigación sanguínea
(nutrición celular).
Aumento de estrógenos, engrosamiento
del epitelio vaginal
Formación de nuevos estratos celulares
Transformación celular que va de célula
parabasal a célula anucleada o escama
CÉLULA PARABASAL
Grande de forma oval o redonda
Núcleo prominente
Poco citoplasma
Desprende de la capa de células germinales cercana a
los vasos sanguíneos
Proestro, diestro y anestro
CÉLULA INTERMEDIA
Grande
Redonda a bordes irregulares
Núcleo más pequeño o más grande que la
parabasal pero con mayor cantidad de
citoplasma.
Proestro y diestro
CÉLULA SUPERFICIAL
Pequeña
Bordes angulosos
Núcleo pequeño
Característica del estro (periodo fértil), que es
cuando la vagina se encuentra bajo la influencia del
pico estrogénico
CÉLULA ANUCLEADA
Escama
Pequeña
Sin núcleo
Bordes angulosos e irregulares
Predomina en el estro.
CICLO ESTRAL DE LA
PERRA
ANESTRO
Tiempo que transcurre entre el final de la fase lútea
(diestro en perras vacías ó gestación en perras
gestantes) y el principio de la fase folicular (proestro)
Período de baja actividad del eje hipotálamo, hipófisis,
ovario.
El inicio del anestro en perras que no quedaron
gestantes es difícil de detectar ya que no existe un
cambio claro entre la finalización del diestro y el inicio
del anestro.
En las perras gestantes el parto marca la
demarcación entre gestación y el inicio del
anestro.
Involución uterina postparto y/o la preparación
del útero para el siguiente ciclo.
Sin evidencia clínica de actividad ovárica.
LA DURACIÓN DEL ANESTRO VARÍA CON RAZA,
ESTACIÓN DEL AÑO, EDAD, ETC,
3 A 9 MESES SI LA PERRA CICLA 2 VECES AL AÑO
9 A 11 MESES SI CICLA 1 SOLA VEZ.
NO HAY DIFERENCIA CLÍNICA ENTRE LA PERRA
DIÉSTRICA Y LA PERRA ANÉSTRICA (PRESENTAN LOS
MISMOS SIGNOS CLÍNICOS TANTO EN DIESTRO COMO EN
ANESTRO)
PROESTRO
3 a 20 días con un promedio de 9 días
Crecimiento folicular (FSH)
El folículo en desarrollo empieza a secretar estrógenos
Incremento de las concentraciones sanguíneas de
estrógenos provoca signos clínicos característicos.
◦ Edema e inflamación vulvar.
◦ Secreción vulvar sanguinolenta, por diapedésis y ruptura capilar
subepitelial del endometrio
◦ Secreción de feromonas que atraen al macho (la perra no acepta la
monta aún.)
ESTRO
Se considera el inicio del estro cuando la perra acepta
al macho y el final cuando esto ya no ocurre
3 a 20 días, con un promedio de 9
Resulta difícil establecer un patrón estándar para
todas las perras.
Comportamiento de receptividad sexual provocado por
un decremento en el nivel de estrógenos y un aumento
en los niveles de progesterona.
La perra puede seguir presentado descarga
sanguinolenta por vulva.
La hembra muestra los signos clínicos de
celo mientras existan niveles circulantes de
estrógenos.
Principalmente cambios de comportamiento:
◦ receptiva al macho
◦ contrae la región perineal
◦ retira la cola a un lado
◦ se queda quieta apoyándose en sus extremidades
para facilitar la penetración.
SIGNOS FÍSICOS:
◦ La vulva se torna flácida
◦ La secreción vaginal continúa (puede ser ya de un
color rosado o seguir siendo hemorrágica)
DIESTRO
La hembra rechaza la monta
No atrae a los machos
La vulva regresa a su tamaño normal (tamaño
anestral), desapareciendo la flacidez y la secreción
Los términos metaestro y diestro han sido utilizados
para referirse a la fase lútea del ciclo, pero ha de
quedar claro que el metaestro se refiere al período de
luteinización temprana de los folículos que en el caso
de la perra se presenta durante la fase final del
proestro y el estro y el diestro al periodo de
funcionamiento del cuerpo lúteo.
El diestro termina cuando inicia el anestro, pero
los eventos endocrinos para entender este
proceso no han quedado claros.
En la perra gestante el parto marca el final del
diestro
En la perra no gestante??