MUNDO MICROBIANO
LOS MICROORGANISMOS
Bacterias (procariotas)
Hongos verdaderos (eucariotas)
Parásitos (eucariotas)
Virus (acelulares)
Bacteriófagos (virus que infectan las bacterias)
Priones (prión proteico PrP)
Viroides (molécula de ARN circular, no poseen cápside)
Incluye el conocimiento histórico y conceptual de la microbiología.
Los criterios de clasificación de los seres vivos, nomenclatura, morfología,
estructura(que elemento tiene esta bacteria), fisiología, metabolismo y genética de los
microorganismos .
Agentes físicos y químicos que actúan sobre las bacterias inhibiendo su crecimiento y
propiciando su destrucción.
Agentes antibacterianos, quimioterápicos y antibióticos, que se aplican en el
tratamiento de las enfermedades infecciosas.
El vibrium cólera es el que se va a presentar en una diarrea
Relación huésped-parásito.
Mecanismos de defensa del huésped inespecíficos, y específicos o inmunitarios.
Reacciones antígeno-anticuerpo (serología)
Introducción a la epidemiología, prevención o profilaxis.
BACTERIOLOGÍA
Sistemática o Especial
Estudia cada una de las especies bacterianas implicadas en patología humana,
agrupadas por familias o géneros bajo las diversas perspectivas que interesan a la
microbiología médica, tales como características microbiológicas, patogenia, cuadro clínico,
diagnóstico e identificación, epidemiología, tratamiento, prevención y control.
Virulento.- con mucho riesgo a morir
La capsula que recubre hace que el sistema que se tenga no pueda aceptar externos.
Bacilos: son unos palitos, cocos: son unos redonditos
Echericha colli, tenemos millones, que eliminamos en la deposición
Los dermatofitos: son hongos, pueden ser superficiales, aquellos que se nutren de la
queratina, por ejemplo la piel, el pelo, las uñas.
La característica de la hoja nos permite diferenciar
Los medios de cultivo de los hongos mayormente, son peludos, como de la papaya, las lesiones
que produce son las homicomicosas, de la uña que son pulposas, si se afecta, la levadura
produce esto
Los dermatofitos solo hacen daño a la uña
Propagos: es cuando se infecta a procariote
Los VIRUS no tienen organoides, pero si tienen un genoma que pueden ser ADN, ARN en
secuencia
Si no tienen este envoltura, son viroides, si no tiene no son patógenos si lo tiene si son
patógenos y se pegan.
este es el esquema del virus HIV, cuyo genoma es ARN,
tiene su capside y tiene una envoltura, cuya superficie tiene las tachuelas, las espiculas se
acopla a CD4, no puede multiplicarse solo, necesita infectar a una procariota(profagos) o
eucariota
Oxiurus: son los que habitan el colon
La microbiología médica estudia los microorganismos (seres vivos microscópicos) que afectan
al hombre causando enfermedades infecciosas.
Año Acontecimiento
1674 Jonh Leeuwenhock descubre los microorganismos
1796 Jenner obtiene una vacuna contra la viruela
1840 Friedrich Henle propuso la “Teoría de los gérmenes”
1847 Semmeleweiss establece la causa de la fiebre puerperal
1859 Pasteur refuta la generación espontánea de los microorganismos
1865 Lister introduce las técnicas de antisepsia
1876 Koch demuestra que microorganismos específicos causan enfermedades específicas
1881 Koch utiliza el agar para obtener un cultivo axénico
1892 Iwanowski descubre los virus
1894 Ehrlisch enuncia el principio de la toxicidad selectiva
1929 Fleming descubre la penicilina
1935 Domagk descubre la Sulfanilamida
1943 Waksman descubre la estreptomicina
Echericha colli esta presente en las infecciosa urinarias
Célula procariota no tiene núcleo ni membrana nuclear, tiene nucleiode, no tiene organoides
salvo unos ribosomas.
Existe una pared bacteriana, de protección para esa célula, le da forma a la bacteria
Otras pueden tener capsula
Un coco en forma individual no produce patología, las tétradas y sarcinas normalmente no
desarrollan en seres humanos, que se coloran lila y rojo
Las rojas se llaman neiserias, son de 3 tipos que causan patologías
Palitos rectos, unos mas gruesos otros mas delgados, palitos, se llaman bacilos y Tienen forma
helicoidal
Los espilinos tienes pocas ondas
Las espiroquetas pueden medir20 30 40 um, y 0.1 um de grosor
Leucocito mide 12um e diámetro
Técnicas de observación.- la microscopia óptica, los hongos podemos ver a 40 en el
microscopio
Microfluorescecia, con sustancias, que podemos visualizar en microorganismos
Microscopia de campo oscuro, triponema pallidum
Microscopia óptica
Microscopia de fluorecencia: fluoreceína,rodamina, auramina
Microscopia de campo oscuro: treponema pallidum
Microscopia de contrate de fases: se observan en cortes histológicos
Microscopia electrónica
Microscopia electrónica, medimos por tantos Armstrong
Tinción simple permite observar la microscopia, con aceite de inmersión
Tomar la muestra
Las capsulas para ver las esporas otra coloración
La coloración de Gram, es útil para muchos aspectos, nos orienta para ver qué tipo de cultivo
debo utilizar
Hay medios de cultivo que son muy amplios, los medios de cultivo, siembro mal no va a crecer,
Tinciones bacterianas
• Preparación del frotis.
• Tinción Simple
• Extensión del cultivo en una película delgada sobre el portaobjetos.
Tinciones diferenciales o compuestas
Nos permiten ver la morfología de las bacterias
• Tinción de Gram (modificaciones) fue descubierta por un estudiante de medicina
Una muestra biológica por ejemplo es una orina, se traduce de un cuadro clínico de
una infección urinaria, puede ser las heces, un líquido acitico, un esputo, una
secreción vaginal, el médico debe saber cuál es la bacteria que está produciendo esta
infección. Ese gram necesita tener los resultados rápidamente. Son cuadros en los que
no vamos a esperar, el tiempo son 72 horas si el tiempo se extiende, por ejemplo si es
una meningitis podría quedar con secuelas como estado vegetativo o el paciente va a
morir.
El que yo haga la coloración, me va a ayudar a ver qué medio de cultivo necesita,
porque si me equivoco el cultivo no va crecer.
Que medio de cultivo voy a utilizar, ese gram, si negativo o positivo, así el paciente se
recuperara más prontamente. La importancia de esta coloración para el laboratorista,
para que trate empíricamente, la práctica hará que salga bien.
El frotis se hace en la lámina, luego se fija bien la bacteria la célula, para que no se
salga.
Se fija la muestra en la lámina, agregamos cristal
violeta, cubrimos la muestra, unos 10 segundos
Lavo y fijo con yodo, este va a fijar un complejo que se
va a formar dentro de la bacteria en un determinado lugar
Lavare lo que sobre, luego agrego alcohol acetona, el
alcohol disuelve las grasas, y aquellas bacterias que tiene buen contenido de grasa,
este alcohol las disuelve y retira el colorante del cristal violeta que estuvieron fijadas
inicialmente. Las que no tienen recubrimiento de grasa no perderán la coloración,
cuando se aplique el alcohol acetona
Luego de lavar se agrega safranina igual pondré 10
segundos, el resultado será el sgte:
aquellas bacterias que se ha mantenido un color violeta del cristal violeta, se
van a denominar gram positiva
aquellas bacterias que se ha retirado la grasa por el alcohol acetona y que
luego queda adicionado la safranina que es de color rojo, una bacteria que
está prescrito sin colorante va a captar el color rojo de la safranina, y
mantendrá ese color rojo, y se denominaran bacterias gram negativas
Empírico.- es cuando yo hago una terapia antimicrobiana sin haber hecho un estudio
microbiológico que me indique cual es el antimicrobiano que se debe utilizar contra las
bacterias , y eso se realiza cuando se hace un proceso de cultivo que se llama
antimicrobiano, ese cultivo especial donde se coloca múltiples discos con diversos
microbianos nos orienta a decir que ese es el microbiano , en ese momento hablamos
de un tratamiento científico mas no empírico pero cada uno se va a su posta donde no
hay microscopio, se debe aprender el manejo empirico de los microbianos, el
tratamiento, que les ayudara en el pueblito a donde vayan
Ademas de ella hay otras modificaciones
Tinciones Diferenciales o compuestas
Tinción de Gram (modificaciones)
Tinción de Zielh Neelsen.- sirve para identificar las bacterias del bacillo de koch el
bacilo de la tuberculosis que no se colorea con la coloracion de gram
Tinciones específicas
Tinción de Wirtz-Cocklin, sirve para visualizar endoesporas
Tinción de Hiss, para visualizar la cápsula bacteriana. Para empoderar la capsula Si
colorea específicamente la capsula
Tinción de Azul de Metileno de Löeffler, sirve para gránulos metacromáticos , por
ejemplo el colirum bacterium ,incluye en su citoplasma una serie de fosfatos de
bacterias, que ayuda a la coloracion
Tinción de Leifson, es para ver flagelos
Coloración de Fontana- Tribondeau.-sirve para ver las espiroquetas, que son tan largas,
tienen 30um, pero no las vemos porque son muy pequeñitas, esta coloración sirve
para ensanchar y poder visualizar.
Tinción argéntica de sales de plata :Espiroquetas
Medición del tamaño de los microorganismos
Las bacterias no vemos en aumento de 40 sino que las veremos con aceite de
inmersión en aumento de 100
El micrómetro (um) corresponde a la millonésima parte (1/1 000 000 ó 10-6 m).
El nanómetro (nm) es mil millones de veces inferior al metro (1/1 000 000 000 ó 10 -9
m).
El ángstrom (Aº) es diez mil millones de veces menor que el metro (1/10 000 000 000 ó
10-10 m).
El micrómetro corresponde a la milésima parte del milímetro (1/1 000 ó 10-3 mm).
Las células eucariotas y procariotas se miden en micrómetros (um), los virus en
nanómetros (nm) y los átomos y moléculas en Ángstrom.
Estructura de la bacteria, no tiene núcleo,
en el citoplasma tiene algunos ribosomas, la membrana es común, por fuera se encuentra
la pared y en algunos casos con capsula.
La pared bacteriana cumple funciones importantes.
La bacteria gram positiva tiene capsula y características mas especificas funciones como la
síntesis, elaboración de compuestos, eliminación
Afuera hay un espacio periplasmico donde sucede muchas situaciones metabólicas y por
fuera de ella se encuentra una gruesa capa de péptidoglucanos, que tiene las bacterias
gram positiva, es como si pusiésemos una sobre otra una malla muy fuerte, muy firme.
Esta estructura firme y dura, tiene huecos que permite que habrá pasajes y eliminacion de
las células externamente, la pared bacteriana no es una estructura compacta que encierra,
es dura pero con pasajes, con algunos compuestos que se anclan , lo ácidos lipoteitoicos y
otras que se anclan en la misma estructura, se llama la capa de péptido glicanos en la
bacterias gram positivas, esta conformada por 40 o mas capas de peptidoglicanos
Pared celular de las bacterias Gram positivas
Estructura química:
Peptidoglucano
Ácidos teicoicos
Ácidos lipoteicoicos
Polisacáridos
Proteínas
este enmarañado está formado por ácidos
uránicos que están unidos por proteínas, las capas son importantísimas que se van
colocando simultáneamente, que se juntan con los enlaces que permiten la firmeza de
la capa de peptdoglicanos, están unidos los acidos glicoicos, y los acidos lipoteitoicos al
enmarañado, además las bacterias gram positivas , cada una de ellas gram positivas y
negatias, no todas son iguales porque , algunas tienen polisacáridos y otras tienen
proteínas en forma específica, que cumplen roles especificos asociada a cada una de
las bacteria, es como una bacteria estafilococus Aureus, tiene un brazo que se le sale,
eso es algo especifico.
Síntesis de peptidoglicanos
Los precursores de la formación del péptido glicano se van a producir en el citopalsma
de la celula, y habrá un transportador que transportara desde la membrana
citoplasmática hacia el espacio periplasmico, donde empieza a sintetizarse esta malla
para formar los péptidos glicanos. Aquí es muy importante el bactoprenol que es el
transportador de los sustratos básicos que están en el citoplasma y asi se forman las
diferentes capas. Los antimicrobianos: son aquellas drogas que utilizan para matar
bacteria, han sido estudiadas para actuar sobre una determinada parte, Con un
comportamiento diferente. Por ejemplo los antimicrobianos como la penicilina actúan
en destruir la pared celular, si la bacteria es lisada, la destruyen. Aquí es el propio
antimicrobiano que destruye a la bacteria.
1.- Se activan sustratos solubles y se forma unidades de peptidoglicano
2. En la membrana se unen y ensamblan sobre el fosfato de bactoprenol
3. En el exterior se fijan unidades de peptidoglicano formando entrecruzamientos
de las cadenas
Transpeptidación
Reacción de cruzamiento, las transpeptidasas están ligadas en la membrana
• La reacción de entrecruzamiento es una transpeptidación.
• Catalizada por transpeptidasas ligadas
a la membrana celular.
• D-D-carboxipeptidasas eliminan las D-alaninas terminales.
• Las transpeptidasas y carboxipeptidasas se denominan proteínas fijadoras de penicilina
(PBPs).
Como las enzimas actúan para forman proteoglicanos
Ácidos teicoicos y lipoteicoicos.
Polimeros hidrosolubles de fosfatos de Poliol
Unidos por puentes covalentes a peptidoglicanos.
Importantes para la viabilidad celular, esta bacteria que posee estos elementos
permitirá a la celula adherirse, provocan reacciones especificas al sistema
inmunológico, cuando la bacteria ingresa por un proceso infeccioso, no solamente
puede destruir sino elementos estructurales de la bacteria pueden destruir, además
tienen información para poder eliminar toxinas y enzimas que serán traducidos en
cuadros patológicos. No solamente actúa a nivel del daño que pueda producir.
Pared celular de bacterias Gram negativas
Son las que se pintaban de color rojo, tienen una membrana celular, tienen un espacio
periplasmico, que externamente tiene una membrana externa y que tiene
características similares, a que su composición son de lípidos, claro que esta
membrana tiene otros elementos más, al ser lípidos el alcohol acetona disuelve las
grasas, la bacteria así queda limpia y de color rojo. Esta membrana externa tiene
fosfolípidos, diferentes proteínas y lípidos y todo este componente se llama
lipopolisacaridos
La parte baja de los lípidos se llama el lípido A que es característico de las gram
negativa, se denomina de una endotoxina, cuando la bacteria gram negativa es
destruida, se traduce como un cuadro shock, le baja la presión, le aumenta la
frecuencia,
Si el paciente hace infeccion, pensaremos que la bacteria le esta provocandoe esto, y
buscaremos un farmaco
Pared celular de las bacterias Gram negativas
Estructura química:
• Tiene una delgada capa de Peptidoglucano
Estructura del Lipopolisacárido.- conformado por lípido a donde hay ácidos grasos,
aquí afuera hay una cadena de sacáridos que es el antígeno O
Pared celular de las micobacterias (no podemos hacerlo con la coloración gram)
Estructura química:
• Peptidoglucano N-glicolil-muramico.(producen la necrosis caseosa como
qeuso fresco)
• Arabinogalactano.
• Ácidos micólicos.
• Lípidos de superficie.
• Porinas
Funciones de la Pared bacteriana
Da forma a la bacteria
Contrarresta la presión osmótica de turgencia
Durante una infección el peptidoglucano puede interferir con la fagocitosis.
Residuos MurNac-O-acetilados resisten la acción hidrolítica de lisozima y glucosidasas
de los fagocitos. Aunque la lisozima es muy buena en la lagrima
Bacterias Grampositivas y Gramnegativas liberan fragmentos de péptidoglucano O-
acetilado en sangre, y producen fiebre y somnolencia estimula la IL-1.